国家自然科学基金(30960428)
- 作品数：13 被引量：41H指数：5
- 相关作者：曹骥杨春李瑗苏建家卢晓旭更多>>
- 相关机构：广西壮族自治区肿瘤防治研究所广西医科大学广西医科大学附属肿瘤医院更多>>
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- 沉默CDC25A基因后肝癌HepG2细胞差异表达基因的筛选
- 本文主要从以下几方面展开论述： 第一部分 构建慢病毒RNA干扰载体稳定沉默CDC25A基因的人肝癌HepG2细胞模型 目的:构建稳定沉默细胞分裂周期蛋白25A(CDC25A)基因的人肝癌HepG2细胞模型。 方法:...
- 何盼
- 关键词：肝癌病理机制细胞周期
- RNA干扰技术沉默CDC25a基因对人肝癌细胞HepG2增殖的影响被引量：1
- 2014年
- 目的:研究细胞分裂周期素25a(cell division cycle 25a,CDC25a)基因沉默后对于人肝癌细胞系Hep G2增殖的影响。同时探讨该影响发生的可能作用机制。方法:使用RNA干扰技术沉默人肝癌Hep G2细胞的CDC25a基因,采用实时荧光定量PCR技术检测肝癌细胞中的CDC25a及其作用基因cyclin E及CDK2的mRNA表达水平,Western blotting检测CDC25a的蛋白表达水平,并采用MTT法、Giemsa染色法及流式细胞技术检测细胞的增殖情况。结果:CDC25a的mRNA及蛋白表达水平在RNA沉默组细胞中的表达低于阴性对照组及正常对照组细胞(P<0.05)。Cyclin E及CDK2的mRNA表达水平在沉默组低于阴性对照及正常对照组(P<0.05)。MTT法、Giemsa染色法结果显示沉默组细胞增殖能力低于阴性对照组及正常对照组细胞(P<0.05),流式细胞技术结果显示沉默组细胞阻滞在G1期。结论:LV-CDC25a-RNAi重组体感染Hep G2细胞可以有效抑制CDC25a基因的表达,使人肝癌Hep G2细胞增殖受到抑制,提示CDC25a基因可能是肝癌治疗的关键靶点。
- 李薇曹骥周玲丽罗旺杨春骆成飘李瑗苏建家
- 关键词：RNA干扰
- MCM7蛋白在人 大鼠 树鼩肝癌组织中的表达和意义被引量：10
- 2013年
- 目的:应用跨种属策略研究MCM7蛋白在人、大鼠、树鼩3个不同种属肝癌、癌旁组织及正常肝组织中的表达,探讨MCM7与肝癌发生发展的关系及临床意义。方法:应用Western blot及免疫组织化学技术检测MCM7蛋白在人、大鼠、树鼩的肝癌、癌旁组织及正常肝组织中的表达并进行临床病理因素分析。结果:Western blot结果显示,MCM7蛋白在人和大鼠肝癌组织中的表达水平显著高于对应癌旁及正常肝组织(P均<0.05),在树鼩肝癌组织中MCM7蛋白的表达水平亦高于其癌旁组织及正常肝组织,但差异无统计学意义(P均>0.05)。免疫组织化学结果显示,MCM7蛋白主要在细胞核中表达,其在人、大鼠、树鼩肝癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁及正常肝组织(P均<0.05);MCM7蛋白的表达水平与患者肝癌分期、肝外转移及术后复发相关(P均<0.05)。而3种属的癌旁组织与正常肝组织相比,两种技术检测结果显示差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论:MCM7蛋白在肝癌发生发展中可能起着关键分子的作用,并与人肝癌的临床分期,肝外转移及术后复发密切相关,有可能成为肝癌治疗的新靶点。
- 朱伶群杨春秦虹卢晓旭李瑗欧超苏建家曹骥
- 关键词：肝癌MCM7关键分子
- 大鼠肝癌形成过程MCM7基因动态变化
- 2014年
- 目的:探讨MCM7基因在黄曲霉毒素B1(AFB1)实验诱发大鼠肝癌过程中的动态变化及意义。方法:将70只雄性4周龄Wistar大鼠随机分为AFB1组(50只)和对照组(20只),AFB1组腹腔注射AFB1,对照组则给予溶媒二甲基亚砜。在诱发肝癌过程中,分别于第13、33和53周对大鼠进行肝活检;实验至第73周处死全部大鼠取肝组织;采用实时荧光定量PCR、蛋白质印迹法和免疫组化方法检测肝组织中MCM7mRNA和蛋白的表达情况。结果:AFB1组肝细胞癌发生率为44.1%(15/34),对照组为0(0/16),AFB1组显著高于对照组,χ2=8.093,P<0.001。随着大鼠肝癌的形成,MCM7mRNA和蛋白的表达水平逐步升高,AFB1组第53和73周显著高于第13和33周,F值分别为55.632和207.253,P值均<0.001;对照组各时间点的表达较低且变化不大。免疫组化结果显示,AFB1组第53周MCM7蛋白阳性表达率为26.7%且以弱阳性为主,第73周MCM7蛋白阳性表达率为100%且多为强阳性,阳性表达率和表达强度均比其他时间点的高,两者比较差异均有统计学意义,P值均<0.001。结论:MCM7表达水平随着肝癌的形成逐渐上升,且在肝癌组织中表达最高,MCM7有可能是参与肝癌形成的关键基因,但其详细机制有待进一步探讨。
- 欧超秦虹骆成飘曹骥苏建家李媛杨春
- 关键词：肝肿瘤基因MCM7黄曲霉毒素B1动物模型
- 用生物信息学方法筛选人类和大鼠共同肝癌相关基因被引量：1
- 2012年
- 目的应用生物信息学技术，对基因芯片产生的大量数据进行系统地挖掘和分析，筛选在人类和大鼠不同种属间肝癌发生发展过程中起关键作用的共同基因。方法首先通过文献检索，在GEO数据库中下载符合纳入标准的3套样本基因芯片数据。运用bioconductor和Rversion的2．10．1版本对已下载数据进行标准化处理，运用软件包affy中的RMA算法对affymetrix平台的原始数据进行背景校正、标准化和log2转换；然后用excel的TTEST函数计算每一个基因的显著性，用DAVID进行探针基因名称转换，建立基因名称与样本对应的表达数据表；最后再进行Meta分析计算人类及大鼠的共同差显基因，并通过DAVID中的KEGG库富集调控通路。结果共检出人类与大鼠肝癌发生发展过程中的共同表达基因26个，其中5个为上调基因，21个为下调基因；富集出1条通路，即黏附斑通路，已有文献报道其与肝癌的发生发展密切相关。结论采用生物信息学方法可快速筛选出人类与大鼠肝癌发生发展过程中的共同关键基因以及与肝癌发生发展密切相关的通路。
- 王云胡艳玲曹骥何敏
- 关键词：生物信息学肝癌相关基因
- Cyclin B1基因在大鼠肝癌组织中的表达及意义被引量：1
- 2014年
- 目的探讨Cyclin B1基因在大鼠肝癌组织中的表达及意义。方法实验组为15只腹腔注射黄曲霉毒素B1诱发形成肝癌的大鼠,在诱癌第13、33、53周行肝活检取肝组织,第73周处死全部大鼠取肝组织。采用QPCR、Western blot和免疫组化方法检测其肝组织中Cyclin B1 mRNA和蛋白的表达。对照组为10只腹腔注射等量溶媒DMSO大鼠,研究方法同上。结果实验组第73周的肝组织Cyclin B1 mRNA表达明显高于其他时间点和对照组(P均<0.05)。实验组第53、73周的肝组织Cyclin B1蛋白表达阳性率高于其他时间点和对照组,第53、73周表达比较有统计学差异(P均<0.05)。结论在肝癌发生过程中,Cyclin B1表达随肝癌形成而升高,且在肝癌组织中表达最高,Cyclin B1基因可能是参与肝癌发生的关键基因之一。
- 秦虹欧超曹骥苏建家李媛杨春
- 关键词：CYCLINB1基因黄曲霉毒素B1
- 利用基因富集及元分析初步筛选影响肝癌发生发展的关键基因
- 目的从大量的肝癌相关基因芯片数据中筛选出影响肝癌发生发展的关键基因。方法运用跨种属肿瘤基因筛选策略比较不同种属的肝癌基因表达谱间的相似改变,选择5套不同种属的肝癌基因表达芯片分别通过基因组富集（GSEA）、元分析（MET...
- 曹骥卢晓旭胡艳玲李瑗朱伶群杨春唐艳萍欧超张春燕
- 文献传递
- RNA干扰FABP5基因对人肝癌HepG2细胞裸鼠移植瘤生长的影响被引量：6
- 2015年
- 目的:研究脂肪酸结合蛋白5(FABP5)基因沉默的慢病毒载体对人肝癌Hep G2细胞成瘤效应的影响。方法:采用RNA干扰技术构建重组逆转录慢病毒载体。Hep G2细胞分为3组:实验组以FABP5基因沉默慢病毒颗粒(LV-shRNA-FABP5)感染Hep G2细胞;阴性对照组以空载体慢病毒颗粒(LV-shRNA-NC)感染Hep G2细胞;空白对照组不做任何处理。将裸鼠随机分为3组,接种肿瘤细胞后观察裸鼠成瘤情况。4周后测量肿瘤的体积和重量,绘制移植瘤生长曲线。Real-time PCR、Western blot及免疫组织化学法检测裸鼠移植瘤中FABP5的表达。结果:LV-shRNA-FABP5可以降低Hep G2细胞FABP5的表达。3组裸鼠接种癌细胞后均有肿瘤形成。与空白对照组和阴性对照组相比,实验组肿瘤生长速度明显减慢,且体积及重量明显减小(P<0.05);实验组裸鼠肝癌移植瘤组织的FABP5 mRNA和蛋白表达水平相比空白对照组和阴性对照组表达明显下降(P<0.05)。结论:沉默FABP5基因表达能有效抑制人肝癌裸鼠移植瘤的生长。FABP5可能成为肝癌基因治疗的一个有效靶点。
- 周玲丽曹骥李薇罗旺杨香娣杨春骆成飘唐艳萍李瑗
- 关键词：RNA干扰肝癌裸鼠移植瘤
- 跨种属研究Smad3在肝癌组织中的表达及意义被引量：5
- 2013年
- 目的:研究Smad3在人、大鼠、树鼩等不同种属的肝癌、癌旁及正常肝组织中的表达和意义,进一步验证跨种属筛选肝癌关键蛋白研究策略的可行性。方法:采用实时荧光定量PCR和Western blotting技术分别检测人、大鼠和树鼩的肝癌及其相应癌旁组织以及正常肝组织中Smad3 mRNA和蛋白表达水平。结果:Smad3 mRNA在人、大鼠和树鼩的肝癌中表达水平均低于其相应的癌旁组织(均P<0.05);在大鼠肝癌组织中的表达低于正常肝组织(P<0.05);在树鼩癌旁组织中的表达高于正常肝组织(P<0.05);其余各组织间mRNA表达水平的差别无统计学意义(均P>0.05)。Smad3蛋白在人和大鼠的肝癌组织中的表达水平均低于其相应的癌旁组织及正常肝组织(均P<0.05);在树鼩肝癌组织中的表达水平也低于相应的癌旁组织和正常肝组织,但差别无统计学意义(均P>0.05);3个种属的癌旁组织与正常肝组织比较,差别无统计学意义(均P>0.05)。结论:Smad3在人、大鼠和树鼩3个种属的肝癌组织中的mRNA和蛋白表达水平均下调,提示该蛋白表达水平的改变可能在肝癌发生发展中起重要作用,有可能成为防治肝癌的靶分子。
- 朱伶群曹骥卢晓旭李瑗欧超苏建家杨春
- 关键词：SMAD3蛋白肝肿瘤
- 跨种属肝癌组织细胞周期蛋白B1表达意义研究被引量：2
- 2013年
- 目的:研究细胞周期通路中的细胞周期蛋白B1(Cyclin B1)在人、大鼠、树鼩不同种属的肝癌、癌旁及正常肝组织中的表达和意义。方法:采用实时荧光定量-PCR(Q-PCR)和蛋白质印迹法检测人(38例肝癌及对应癌旁组织、10例正常肝组织)、大鼠(15例肝癌及其相应癌旁组织、14例正常肝组织)和树鼩(10例肝癌及其相应癌旁组织、10例正常肝组织)中Cyclin B1的mRNA和蛋白表达水平。结果:人肝癌组织Cyclin B1mRNA的表达量(0.011 4±0.009 6)高于正常肝组织(0.004 8±0.002 9),差异有统计学意义,P=0.033;高于癌旁组织Cyclin B1mRNA的表达量(0.003 7±0.002 7),差异有统计学意义,P=0.002;癌旁组织与正常组差异无统计学意义,P=0.609。大鼠肝癌组织Cyclin B1mRNA的表达量(0.002 8±0.001 9)高于正常肝组织(0.000 6±0.000 3),差异有统计学意义,P=0.003;其对应的癌旁组织Cyclin B1mRNA的表达量(0.002 9±0.002 5)高于正常肝组织,差异有统计学意义,P=0.001;肝癌组织与其对应的癌旁组织差异无统计学意义,P=0.809。树鼩肝癌组织Cyclin B1mRNA的表达量(0.014 8±0.010 9)高于正常肝组织(0.001 3±0.000 9),差异有统计学意义,P=0.007;对应癌旁组织Cyclin B1mRNA的表达量(0.008 3±0.006 4)高于正常肝组织,P=0.060;肝癌组织与对应的癌旁组织比较,差异无统计学意义,P=0.352。Cyclin B1mRNA在人肝癌组织中的表达与临床分期、门脉癌栓、术后复发、肿瘤直径及肿瘤分化明显有关,而与肝外转移、肿瘤个数及血清AFP水平无明显关系。Cyclin B1蛋白在人的肝癌组织中的平均表达量(0.570 7±0.221 9)明显高于其对应癌旁组织(0.418 5±0.254 3),差异有统计学意义,P=0.005;高于正常肝组织(0.375 4±0.127 0),差异有统计学意义,P=0.019。Cyclin B1在大鼠的肝癌组织中的平均表达量(0.661 9±0.398 1)明显高于正常肝组织(0.372 6±0.104 8),差异有统计学意义,P=0.039。Cyclin B1在树鼩的肝癌组织中的平均表达量(0.656
- 卢晓旭曹骥朱伶群杨春李瑗
- 关键词：细胞周期蛋白B1肝肿瘤荧光定量PCR印迹法
