国家高技术研究发展计划(2012AA022206B)
- 作品数：3 被引量：7H指数：1
- 相关作者：魏东芝苏二正李明亮朱颖马晓强更多>>
- 相关机构：华东理工大学南京林业大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划江苏高校优势学科建设工程资助项目中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：化学工程轻工技术与工程生物学更多>>
- 木瓜蛋白酶的原位固定化及理化性质研究被引量：6
- 2014年
- 以氨基载体原位固定化PEG相中的木瓜蛋白酶,获得了高固定化率（95.9%）和酶活回收率（38.9%）的固定化木瓜蛋白酶,解决了双水相分离纯化后成相聚合物和目的蛋白难以分离的问题。固定化木瓜蛋白酶的最适p H在7.0左右,最适温度处于60-70℃之间。相比游离木瓜蛋白酶,在广泛的p H区间内（3.0-9.0）固定化酶稳定性都较好,热稳定性也有改善。在4℃密闭容器内将固定化木瓜蛋白酶以湿润状态保存可以较好地保留其活性。LH-HA固定化木瓜蛋白酶可以特异性地水解单克隆抗体Ig G,制备Fab和Fc片段。
- 苏二正李明亮魏东芝
- 关键词：木瓜蛋白酶单克隆抗体FAB片段
- 枯草芽孢杆菌头孢菌素C脱乙酰基酯酶在大肠杆菌中的诱导及组成型表达
- 2017年
- 本研究构建了8种诱导型质粒和16种组成型质粒,试图实现枯草芽孢杆菌头孢菌素C脱乙酰基酯酶(CAH)基因在大肠杆菌中的高效异源表达。经过筛选,最终选择带有pUC19上的起始位点、SIL_3基因、trp启动子以及间隔序列为B1的组成型表达质粒p B1-SIL_3-K为最佳表达质粒。将PB1-SIL_3-K转入Escherichia coli DH5α,重组菌在37℃发酵培养24 h,其OD值达到5.4,酶活达到了138.61 U/mL。进一步通过培养基组成、培养条件、放大过程等优化,在7 L发酵罐上,CAH最高酶活达到1 340 U/mL,为目前国内外文献报道最高水平。
- 朱颖马晓强杨胜利魏东芝苏二正
- 关键词：组成型表达
- 天然固定化木瓜脂肪酶催化芳香仲醇动力学拆分被引量：1
- 2014年
- 将木瓜来源的廉价天然固定化脂肪酶CPL用于手性拆分芳香仲醇,以4-苯基-2-丁醇作为模式底物,考察了反应温度、反应溶剂、酰基供体以及底物摩尔比对CPL拆分能力的影响,结果表明,适宜的反应温度30～45℃,酰基供体为活性乙烯酯,正己烷或环己烷作为反应溶剂,底物/酰基供体摩尔比1∶2,在该条件下底物的转化率接近50%,e.es大于99%,反应的对映体比值E大于200。CPL对其他结构类似的芳香仲醇也具有很好的拆分能力。该研究为手性芳香仲醇的酶催化制备提供了新的催化剂选择。
- 苏二正尤鹏永魏东芝
- 关键词：酶催化动力学拆分生物工程
