国家自然科学基金(31040080)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
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- 猪FcγR ⅡB多种剪接异构体的基因克隆与序列分析
- 2011年
- 目的:研究猪FcγRⅡB受体基因选择性剪接的多样性。方法:根据GenBank中猪FcγRⅡB(swFcγRⅡB)cDNA基因序列(DQ026064),应用Primer5.0软件设计合成了一对特异性引物,应用RT-PCR技术,从不同个体的猪肺泡巨噬细胞中扩增FcγRⅡB基因并进行测序分析,在GenBank中查找猪FcγRⅡBDNA序列(NW-001886241.1),并用相关软件分析其外显子组成。结果:共克隆出6个转录体,其中转录体2,4在信号肽部分都有一个丙氨酸的缺失。转录体5,6是两个新型的FcγRⅡB转录体,转录体5胞外区只有一个Ig结构域,转录体6是一个只含有一个Ig结构域的推导性可溶性Fc受体。结论:猪FcγRⅡB的表达因RNA选择性剪接方式不同而呈现出多样性。
- 张宜娜刘肖萍张志远段二珍张继希周永辉夏平安崔保安
- 关键词：FCΓR剪接异构体多样性
- PRRSV灭活抗原免疫接种后抗主要结构蛋白抗体的产生规律研究被引量：4
- 2011年
- 目的检测PRRSV灭活抗原免疫接种后抗主要结构蛋白抗体的产生规律。方法用差速离心法纯化PRRSV Hn-3/06株,0.1%甲醛灭活PRRSV,加入弗氏佐剂乳化制备成PRRSV灭活抗原。20只昆明系小鼠(7～8周龄)随机分为2组,每组10只,每次每只110μg蛋白剂量,第1组免疫1次,第2组免疫2次,每次间隔7 d。每隔7 d采血1次,间接ELISA方法检测血清中抗PRRSV及GP5、M和N蛋白的抗体效价。用Marc-145细胞进行细胞中和试验,间接免疫荧光灶抑制方法检测血清中和抗体效价。结果 2组小鼠均产生针对PRRSV及各结构蛋白的抗体,抗PRRSV的抗体和抗N蛋白的抗体一免后14 d出现,21 d后抗体效价达到1∶1 280,35 d抗体水平达到最高;抗M蛋白的抗体一免后42 d出现,49 d抗体水平达到最高,抗体效价达到1:160;抗GP5蛋白的抗体一免后49 d出现,至56 d抗体水平呈上升趋势,抗体效价达到1∶80。免疫2次的小鼠各项ELISA抗体效价总体略微偏高。细胞中和试验结果表明第1组免疫小鼠免疫后42 d左右产生微弱的中和抗体;第2组免疫小鼠一免后35～49 d产生可检测到的中和抗体,42 d时中和抗体水平达到最高,抗体效价达到1∶2。结论纯化灭活的PRRSV抗原诱导机体产生的抗主要结构蛋白的抗体滴度较低,说明PRRSV抗原的免疫原性较弱,不能诱导机体产生有效的保护抗体。
- 段二珍赵琳陈静张宜娜卢晓艳张志远刘肖萍夏平安张红英崔保安
- 关键词：PRRSVELISA结构蛋白
