福建省科技厅基金项目(2003D06)
- 作品数：5 被引量：9H指数：2
- 相关作者：李和军郑祥雄李频周小玲张家永更多>>
- 相关机构：福建医科大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人CD40-IgG1Fc段融合蛋白对EBV转化的B细胞凋亡的影响被引量：2
- 2009年
- 目的探讨人CD40-IgG1Fc段融合蛋白对EB病毒(EBV)转化的B淋巴细胞在细胞生长及凋亡方面的影响。方法应用流式细胞术检测EBV转化的B淋巴细胞膜表面异位表达CD40L;应用本研究所构建的CD40-IgG1Fc段融合蛋白CHO稳定表达株的培养上清与EBV转化的B淋巴细胞共孵育,通过MTT法检测B细胞的生长变化,吖啶橙(AO)、溴化乙锭(EB)双染色法和DNA ladder法检测融合蛋白对B细胞凋亡的影响。结果EBV转化的B细胞膜表面异位表达CD40L;CD40-IgG1Fc段融合蛋白可有效抑制EB病毒转化的B细胞生长,抑制程度与蛋白浓度呈正相关;AO与EB双染色法及DNA ladder法均检测到B细胞凋亡明显增加,与共孵育时间呈正相关。结论CD40-CD40L的相互作用是EBV转化的B细胞异常激活的重要机制,人CD40-IgG1Fc段融合蛋白能阻断CD40-CD40L的相互作用,抑制EB病毒转化的B细胞的生长,促进其凋亡,为下一步自身免疫性疾病的临床实验治疗奠定了基础。
- 李和军张家永李频郑祥雄周小玲
- 关键词：CD40融合蛋白B淋巴细胞
- CD80-IgG1Fc融合蛋白修饰的HepG2细胞对淋巴细胞抗肿瘤免疫的影响被引量：1
- 2006年
- 目的:探讨CD80-IgG1Fc段融合蛋白修饰的HepG2细胞对淋巴细胞抗肿瘤免疫的影响。方法:应用福建省临床免疫研究所构建的CD80-IgG1Fc段融合蛋白,修饰肝癌细胞株HepG2细胞,用流式细胞术检测修饰的HepG2细胞上CD80的表达。将修饰的HepG2细胞与健康人外周血淋巴细胞混合后进行培养,分别应用MTT比色法、乳酸脱氢酶释放试验;检测经CD80-IgG1Fc段融合蛋白修饰的HepG2细胞对外周血淋巴细胞增殖及其细胞毒性的影响。结果:CD80-IgG1Fc段融合蛋白可有效地结合于HepG2细胞膜上,结合的量在一定范围内与融合蛋白的浓度呈正相关(P<0.05)。融合蛋白修饰的HepG2细胞可明显刺激外周血淋巴细胞活化增殖并增强CTL的细胞毒活性(P<0.05)。结论:CD80在抗肿瘤免疫中起着重要作用,用CD80-IgG1Fc段融合蛋白修饰的HepG2肿瘤细胞能明显增强淋巴细胞的特异性抗肿瘤免疫,为CD80用于肿瘤免疫治疗的研究提供了实验依据。
- 李频李和军张家永石国勋郑祥雄
- 关键词：CD80融合蛋白肿瘤免疫
- CD80融合蛋白修饰的H22细胞激发抗肿瘤免疫被引量：2
- 2007年
- 目的探讨CD80-IgG1 Fc段融合蛋白修饰的H22细胞对淋巴细胞抗肿瘤免疫的影响。方法应用福建省临床免疫研究所构建的CD80-IgG1 Fc段融合蛋白,修饰小鼠肝癌细胞株H22细胞,用流式细胞术检测修饰的H22细胞上CD80的表达。将修饰的H22细胞与小鼠脾细胞悬液混合后进行培养,分别应用MTT比色法、乳酸脱氢酶释放试验,检测经CD80-IgG1 Fc段融合蛋白修饰的H22细胞对脾淋巴细胞增殖及其细胞毒性的影响。结果CD80-IgG1 Fc段融合蛋白可有效地结合于H22细胞膜上(P<0.05),融合蛋白修饰的H22细胞可明显刺激脾淋巴细胞活化增殖并增强CTL的细胞毒活性(P<0.05)。结论CD80在抗肿瘤免疫中起着重要作用,用CD80-IgG1 Fc段融合蛋白修饰的H22细胞能明显增强淋巴细胞的特异性抗肿瘤免疫,为CD80用于肿瘤免疫治疗的研究提供了实验依据,为下一步体内免疫治疗肿瘤奠定了基础。
- 李和军李频郑祥雄周小玲
- 关键词：CD80融合蛋白肿瘤免疫
- CD80-IgG1Fc段融合蛋白真核表达载体的构建及表达被引量：3
- 2006年
- 目的构建人CD80-IgG1Fc段融合蛋白的真核表达载体CD80-IgG1Fc/pcDNA3.1(+),并在CHO细胞中进行表达。方法应用T-A克隆技术和亚克隆技术,构建人CD80膜外段-IgG1Fc段融合蛋白的真核表达载体CD80-IgG1Fc/pcDNA3.1(+),并将其转染入CHO细胞株并筛选,进行稳定表达。通过Western blot及ELISA法,检测融合蛋白的表达。结果成功地构建了真核表达载体CD80-IgG1Fc/pcD-NA3.1(+),并建立CHO细胞稳定表达株。Western blot及ELISA法检测到细胞培养上清中有融合蛋白的表达。结论成功地构建了人CD80膜外段-IgG1Fc段融合蛋白的真核表达载体CD80-IgG1Fc/pcDNA3.1(+),并在CHO细胞中稳定表达,为下一步抗肿瘤的研究奠定了基础。
- 李和军李频周小玲郑祥雄
- 关键词：CD80IGG1FC段融合蛋白基因克隆真核表达
- CD32在人肝癌细胞株上的表达被引量：2
- 2010年
- 目的检测CD32在人肝癌细胞株SMMC-7721、BEL-7404、HepG2上的表达,探索其在肿瘤免疫治疗中的应用价值。方法分别应用RT-PCR方法、流式细胞术检测3种肝癌细胞株上CD32的表达情况,以u937为阳性对照。结果u937高表达CD32,而肝癌细胞株SMMC-7721、BEL-7404、HepG2未检测到CD32的表达。结论肝癌细胞株SMMC-7721、BEL-7404、HepG2不表达CD32,应用基因工程方法调节肿瘤细胞上不同亚型CD32的表达,或许可以激发机体抗肿瘤免疫,成为肿瘤免疫治疗的新途径。
- 李和军刘宁李频郑祥雄
- 关键词：肝癌细胞肿瘤免疫治疗
