国家自然科学基金(U1304328)
- 作品数:4 被引量:9H指数:2
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- 黄芩苷对耐药大肠杆菌marA基因mRNA表达水平影响
- 为探究黄芩苷对耐药大肠杆菌主动外排调控基因marA的mRNA表达水平的影响,微量肉汤稀释法确定黄芩苷增敏环丙沙星的最佳浓度,然后对8株耐药菌株采取不加任何药物、单独加32μg/mL黄芩苷或4μg/mL环丙沙星、32μg/...
- 付赛赛苑丽潘玉善吴华胡功政刘建华
- 关键词:黄芩苷环丙沙星大肠杆菌
- 文献传递
- 黄芩苷和环丙沙星联合对鸵鸟源大肠杆菌的协同作用被引量:5
- 2014年
- 为研究黄芩苷能否增强喹诺酮类药物环丙沙星对鸵鸟源大肠杆菌的抗菌活性,本试验先用二倍稀释法测定单个药物对鸵鸟源大肠杆菌的抗菌活性,进而筛选出10株耐药菌株(T1~T4、T7、T8、T10、T12、T21、T25),然后采用微量肉汤稀释棋盘法,用环丙沙星和黄芩苷对以上10株耐药菌株进行体外联合药敏试验。结果发现环丙沙星和黄芩苷单用的MIC分别为64和512或1024 μg/mL;联合用药后,对10株耐药菌的分级抑菌浓度进行测定,其中T1、T2、T3、T7、T8、T10、T12、T21的分级抑菌浓度均为0.375,T4、T25的分级抑菌浓度均为0.25,10株菌的分级抑菌浓度均小于0.5。结果表明,环丙沙星和黄芩苷联合对鸵鸟源大肠杆菌起协同作用。
- 刘建华吴华潘玉善苑丽苗恩果胡功政
- 关键词:环丙沙星黄芩苷
- 甘草查尔酮A增强头孢噻呋钠对鸡源大肠杆菌作用研究
- (目的)为研究甘草查尔酮A能否增强头孢菌素类药物头孢噻呋钠对鸡源大肠杆菌的抗菌活性。(方法)本试验采用微量肉汤稀释法测定头孢噻呋钠对鸡源大肠杆菌的MIC,筛选出头孢噻呋钠耐药菌株,然后用棋盘稀释法、药敏纸片扩散法、生长曲...
- 郭泽宇杨永亚刘志欢吴华贺丹丹苑丽潘玉善胡功政刘建华
- 关键词:头孢噻呋钠鸡源大肠杆菌
- 文献传递
- 环丙沙星诱导对临床耐药菌株主动外排基因转录的影响被引量:2
- 2017年
- 笔者拟研究环丙沙星诱导对大肠埃希菌临床耐药菌株Y35、J45主动外排基因acrA、acrB、acrD、acrE、acrF、mdtA及外排调控基因marA、robA和soxS mRNA水平的影响。采用微量肉汤稀释法,测定环丙沙星对Y35、J45不同诱导阶段MIC;采用荧光定量PCR检测方法,对Y35、J45及二者诱导至10、20、30代菌株的主动外排及外排调控基因mRNA相对转录量进行测定。结果显示:经过30代诱导,环丙沙星对诱导株MIC均增至原来的2倍,达到256μg·mL^(-1)。Y35耐药株诱导至10和30代时,除了mdtA基因外,其他8个基因转录量介于1.20~96.07,与未诱导株相比差异显著(P<0.05或P<0.01),acrD基因转录量增加最为明显;至20代时,acrA、acrB、marA与10代诱导株相比,转录量下降,但高于原代菌株转录量;acrE、robA和soxS基因转录量数值介于1.40~3.81,与未诱导株相比差异显著(P<0.05或P<0.01)。J45耐药株至10代时,acrB、acrF基因转录量增加,转录量分别为原代菌株2.76和1.73倍,其他测定基因转录量下降;至20代时,acrA、acrB、acrE、mdtA基因转录量增加显著,分别为原代菌株的15.35、58.89、31.56、36.50倍,差异极显著(P<0.01);至30代时,所有检测基因的转录量均大于原代菌株,acrF基因转录量增加最为明显,是原代菌株的102.54倍。本研究表明,长期使用环丙沙星诱导,能够使临床耐药株对其MIC值增加,耐药性增强;环丙沙星诱导能促使临床耐药菌株主动外排基因mRNA转录量增加,更强的耐药性可能是由主动外排泵介导产生。
- 刘建华付赛赛王亚云胡功政潘玉善苑丽
- 关键词:最小抑菌浓度环丙沙星主动外排泵
- 鸡源大肠杆菌对多黏菌素耐药性分析及mcr-1快速传播机制研究
- (目的)为了研究鸡源大肠杆菌对多黏菌素的耐药性及其抗性基因mcr-1的快速传播机制。(方法)以从中南地区7个省份分离的182株鸡源大肠杆菌作为研究对象,采用PCR扩增技术,对鸡源大肠杆菌的多黏菌素耐药情况及mcr-1基因...
- 杨永亚郭泽宇陈环环苑丽潘玉善吴华贺丹丹胡功政刘建华
- 关键词:大肠杆菌
- 文献传递
- 黄芩苷对耐药大肠杆菌marA基因mRNA表达水平的影响被引量:2
- 2016年
- 为探究黄芩苷对耐药大肠杆菌主动外排调控基因marA的mRNA表达水平的影响,利用微量肉汤稀释法确定黄芩苷增敏环丙沙星的最佳浓度,然后对8株耐药菌株采取不加任何药物、单独加32mg/L黄芩苷或4 mg/L环丙沙星、32mg/L黄芩苷和4mg/L环丙沙星联合及16mg/L CCCP和4mg/L环丙沙星联合等5种方式培养,抽提总RNA并反转录成cDNA,荧光定量PCR测定主动外排调控基因marA及管家基因gapA的Ct值,并计算不同培养条件下各个耐药大肠杆菌marA基因mRNA相对表达量。结果显示,标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,相关系数R^2=1.00,溶解曲线特异,marA基因产物Tm值为81.8~82.1℃;黄芩苷与环丙沙星联合培养的耐药菌外排泵基因marA表达量与环丙沙星单独培养相比明显下降,前者0.71~2.06,后者2.27~7.28;以上结果表明黄芩苷可以通过抑制外排泵调控基因marA发挥作用,提示其也许可作为大肠杆菌的外排泵抑制剂应用于临床。
- 付赛赛苑丽潘玉善吴华胡功政刘建华
- 关键词:黄芩苷环丙沙星大肠杆菌
- 黄芩苷和沉默基因acrA、marA和acrD对耐药大肠埃希菌环丙沙星敏感性的影响被引量:1
- 2017年
- 为探讨反义寡核苷酸(ASODN)沉默acrA、marA和acrD基因前后,黄芩苷对临床耐药大肠埃希菌(E.coli)环丙沙星敏感性的影响,设计并合成3个基因的ASODN引物,设置空白对照组、黄芩苷组、ASODN沉默组、ASODN沉默+黄芩苷组,分别转染到临床耐药菌感受态细胞中,涂布于一定浓度环丙沙星平板上,培养观察菌落生长情况并计数。结果发现,相对于空白对照组,黄芩苷组菌落数显著降低;acrA、acrD和marA基因沉默组与空白对照组相比,除了acrD基因沉默1号菌株和marA基因沉默的Y17菌株外,其余菌株在环丙沙星平板上的菌落数也出现不同程度地下降,具有显著性差异;acrA、acrD和marA基因沉默+黄芩苷组与黄芩苷组相比,多数菌株在环丙沙星平板上的菌落数均出现不同程度地下降;acrA基因沉默+黄芩苷组与acrA基因沉默组相比,4株菌株变化差异不显著,Y17号菌株菌落数有所上升,J45号菌株在该基因沉默后,环丙沙星平板上的菌落数出现下降的趋势,差异显著;acrD基因沉默+黄芩苷组与acrD基因沉默组相比,除了1号菌株变化差异不显著外,其余5株菌株变化差异显著,但Y17号菌株菌落数上升;marA基因沉默+黄芩苷组与marA基因沉默组相比,除了Y17、Y35这2株菌株变化差异显著外,其余4株菌株变化差异不显著。以上结果表明,黄芩苷主要通过抑制acrA和marA发挥外排抑制作用,acrD不是其增强环丙沙星敏感性的主要靶点。
- 付赛赛吴华苑丽潘玉善胡功政刘建华
- 关键词:反义寡核苷酸大肠埃希菌环丙沙星黄芩苷