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猪瘟强毒与弱毒鉴别检测方法的研究进展被引量：1: 2015年; 猪瘟（Classical swine fever,CSF）以前又名烂肠瘟,是由黄病毒科黄病毒属的猪瘟病毒（Classical swine fever virus,CSFV）引起猪的一种高度接触性、致死性的传染病,临床上主要以稽留高热、皮肤和黏膜出现大量出血点为主要特征。猪瘟具有高度传染性,主要通过呼吸道和消化道传播,传播速度快、发病率和死亡率高,给养猪业造成了巨大的经济损失;; 沈志强谢金文王金良曲光刚祖立闯; 关键词：CSFV 野毒株 SWINE 弱毒株

猪瘟病毒E2基因主要抗原区的克隆及其原核表达被引量：1: 2012年; 为研究猪瘟病毒E2蛋白的抗原表位在机体免疫应答中的作用和特点,试验参照猪瘟兔化弱毒疫苗株(HCLV)的基因组序列,设计、合成了1对引物,应用RT-PCR方法扩增出长为786 bp的基因片段,命名为zE2,将zE2基因克隆到原核表达质粒pET 32a中,经酶切鉴定后转化大肠杆菌Rosetta(DE3),于37℃、1.0 mmol/L IPTG条件下诱导表达,大肠杆菌菌体裂解产物再经SDS-PAGE和Western-blot分析。结果表明:该基因片段得到较高表达,融合蛋白的分子质量约为48 ku,主要以包涵体形式存在,且具有一定的免疫学活性。; 谢金文王金良董林苗立中管宇高三阳沈志强; 关键词：猪瘟病毒 E2蛋白克隆原核表达

PPA-ELISA检测试剂盒在猪瘟抗体临床监测中的应用: 2013年; 近年来，我国猪瘟的流行和发病特点发生了很大变化，转变为隐性感染和亚临床感染，临床表现也更加复杂，既有区域性流行，又有零星散发，既有高死亡率的急性症状，又有持续感染的温和性症状，出现了所谓“非典型猪瘟”、“温和型猪瘟”和“带毒母猪综合征”，病理剖检也常常不同于典型猪瘟的病理变化，给兽医临床诊断带来很大困难。尽管血清学抗体检测方法很难有效区分疫苗毒与野毒产生的抗体，但由于其具有使用方便、一次检测量大和血清容易保存等优点而被广泛应用，在猪瘟流行状态监测和流行病学调查等方面有着重要作用，也是免疫猪群抗体水平监测的主要方法，对疫苗免疫效果评价及免疫程序的制定均具有重要意义词。本研究应用猪瘟病毒PPA—ELISA抗体检测试剂盒对436份免疫猪血清样品进行检测，旨在了解猪瘟的疫苗免疫效果，合理指导猪瘟的防疫，为猪瘟的综合防控提供参考。; 祖立闯谢金文王金良苗立中李峰沈志强; 关键词：ELISA检测试剂盒猪瘟抗体亚临床感染 PPA 非典型猪瘟

兔出血症病毒SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法的建立被引量：1: 2014年; 为了建立兔出血症病毒(RHDV)快速、敏感的检测方法。本研究利用RT-PCR技术扩增出RHDVVP60基因中201bp的保守序列,并克隆到p MD18-T载体中作为标准品制作标准曲线,建立了RHDV的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法。该方法检测灵敏度可达6×101拷贝,与兔水疱性口炎病毒和轮状病毒均不发生交叉反应,具有良好的特异性和重复性。结果表明,建立的实时荧光定量PCR具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等优点,可用于临床RHDV的检测。; 于新友李天芝王金良沈志强; 关键词：兔出血症病毒 VP60基因 SYBR

猪瘟疫苗质量的替代检验方法研究进展被引量：8: 2015年; 国标的猪瘟疫苗效力检验、支原体检验、外源病毒检验等质量检验方法均存在试验周期长、操作繁琐、敏感性较低等缺点,随着现代免疫学与分子生物学技术的快速发展,猪瘟疫苗质量检验的新兴替代检验方法日臻发展和完善。论文就近年来针对猪瘟病毒的病毒含量测定、猪瘟疫苗效力检验、支原体检验、外源病毒检验等免疫学与分子生物学新兴检测方法的研究进展做一综述,以期为提高猪瘟疫苗的质量检验水平、保障猪瘟疫苗质量提供参考依据。; 祖立闯谢金文沈志强李娇唐娜王金良苗立中张娜王艳吴信明; 关键词：猪瘟疫苗分子生物学免疫学

兔病毒性出血症病毒VP60蛋白在诊断与亚单位疫苗应用中的研究进展被引量：13: 2012年; 兔病毒性出血症(RHD)是由兔病毒性出血症病毒(RHDV)引起的兔的一种烈性、毁灭性传染病。目前该病在世界范围内流行,给养兔业带来了巨大的经济损失。传统的组织苗存在动物福利与生物安全等的缺陷,新型疫苗和诊断试剂的研究迫在眉睫。VP60蛋白为病毒衣壳蛋白,惟一的结构蛋白,也是免疫原性蛋白,在病毒诱导机体的免疫反应中起主要作用,可诱导机体产生保护性的中和抗体,故VP60蛋白在RHD新型疫苗及诊断试剂研究领域具有很大的发展潜力。论文就VP60蛋白的分子生物学及其在RHD诊断与疫苗方面的研究进展进行综述,以期为RHD的综合防控提供参考依据。; 祖立闯沈志强李娇王艳王文秀; 关键词：兔病毒性出血症病毒 VP60蛋白亚单位疫苗

猪瘟抗体的几种常用检测方法概述被引量：3: 2013年; 近年来,我国猪瘟免疫失败常有发生,给养猪业带来较大的经济损失。猪瘟抗体检测能准确掌握猪群的猪瘟抗体水平,对猪瘟疫苗免疫效果评价、猪瘟免疫程序制定、猪瘟流行状态监测均具有重要意义。文章就猪瘟抗体中和试验、间接血凝试验、酶联免疫吸附试验、胶体金免疫技术等常用检测方法的研究与应用现状及其优缺点进行全面论述,为各级兽医部门及养殖户寻找和建立适合自身的抗体检测方法提供参考。; 李娇王金良沈志强; 关键词：猪瘟抗体

单克隆抗体在猪瘟诊断上的应用被引量：4: 2011年; 猪瘟单克隆抗体以其敏感性高、特异性强、能够识别病毒抗原结构的微小差异,同时单抗特有的理化同质性使抗原抗体反应结果便于质量控制,利于标准化和规范化等优点,在猪瘟的诊断以及强、弱毒鉴别诊断中得到了广泛应用,显示出了良好的应用前景。论文就猪瘟单克隆抗体及其在猪瘟诊断中的应用进展作一综述。; 李娇祖立闯沈志强唐娜王金良; 关键词：猪瘟单克隆抗体

间接ELISA在猪瘟抗体检测上的应用被引量：12: 2012年; 间接ELISA以其灵敏、特异、简单、快速、稳定、高通量及易于操作等优点,在猪瘟免疫猪群抗体水平监测、猪瘟的快速诊断与流行病学调查中得到了广泛应用,显示出了良好的应用前景。论文就间接ELISA方法及其在猪瘟诊断上的应用概况做一综述,以期为我国猪瘟的综合防控提供参考。; 李娇沈志强祖立闯王金良谢金文; 关键词：间接ELISA 猪瘟抗体

SYBR Green I实时RT-PCR检测牛病毒性腹泻-粘膜病病毒方法的建立及初步应用: 目的建立一种快速、特异、敏感的SYBR Green I实时RT-PCR方法检测牛病毒性腹泻-粘膜病病毒。方法对SYBR Green I实时RT-PCR检测牛病毒性腹泻-粘膜病病毒方法的反应条件、反应体系进行优化,同时与传...; 沈志强郭显坡王金良曲光刚张松林唐娜赵蕾; 关键词：牛病毒性腹泻-粘膜病病毒实时聚合酶链反应灵敏度; 文献传递

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