国家自然科学基金(31271848)
- 作品数：11 被引量：24H指数：4
- 相关作者：沈立荣谌迪于张颖谭量量李玫璐更多>>
- 相关机构：浙江大学杭州碧于天保健品有限公司中国计量大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金杭州市重大科技创新项目浙江省科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 蜂王浆主蛋白提取工艺优化及质量分析被引量：3
- 2014年
- 用离心法从鲜王浆中提取蜂王浆主蛋白，进行液料比、pH、抽提时间和离子强度对MRJPs提取率影响的正交实验，并作MRJPs蛋白质量、副产物王浆酸和总糖回收率分析。实验结果表明：影响MRJPs提取率的因素从大到小依次为离子强度〉pH〉抽提时间〉液料比，在最佳提取条件（液料比8mL／g、pH8、抽提8h，离子强度0．5mol／L）下，MRJPs提取率为81．14％。提取的MRJPs蛋白SDS—PAGE电泳和ELISA分析显示，其分子量在42．1～97．4ku，纯度71．7％。副产物分析显示，王浆酸和总糖回收率分别为2．91％和1．26％。该结果为王浆活性蛋白开发和副产物综合利用提供了科学依据。
- 于张颖肖发柳丹丹翟量沈立荣
- 关键词：蜂王浆正交实验
- 蜂王浆主蛋白对围绝经期小鼠生殖功能的保护作用被引量：4
- 2019年
- 为研究蜂王浆主蛋白(major royal jelly proteins,MRJPs)对围绝经期小鼠生殖内分泌的影响,选取11~13月龄自然衰老雌性ICR小鼠作为动物模型开展实验。将50只小鼠随机分为蜂王浆主蛋白低、中、高剂量组(分别给予125、250、500 mg/kg MRJPs)、阳性对照组(给予125 mg/kg酪蛋白)和老年模型组(给予生理盐水),另选10只5月龄雌性小鼠作为青年对照组(给予生理盐水),所有小鼠每日灌胃1次,持续7周后,计算小鼠子宫指数和卵巢指数,并通过放射免疫技术检测血清激素雌二醇(estradiol,E2)、孕酮(progesterone,P)、促卵泡生成素(folliclestimulating hormone,FSH)和促黄体生成素(luteinizing hormone,LH)含量;此外,采用定量聚合酶链式反应检测小鼠卵巢中激素受体表达量,并在光学显微镜下对卵巢和子宫组织形态进行观察。结果表明:与老年模型组相比,补充中、高剂量的MRJPs可显著提高小鼠卵巢指数和子宫指数,显著提高血清激素E2和P的水平,降低FSH和LH含量,并提高雌激素受体基因ERα、ERβ和孕激素受体基因PR的表达量,增加子宫内膜平均厚度,改善卵巢的卵泡发育和形态。表明MRJPs具有类雌激素效应,对围绝经期小鼠生殖功能具有一定的保护作用。本研究为蜂王浆和MRJPs应用于预防和改善女性围绝经期综合征提供了科学依据。
- 刘欣陈勇沈立荣
- 关键词：小鼠围绝经期综合征生殖功能血清激素
- 蜂王浆主蛋白(MRJPs)作为灭活胎牛血清(FBS)替代品培养人体细胞的效果评价（英文）
- 2016年
- 目的:为MRJPs应用于人体细胞培养提供科学依据,为发展蜂王浆在细胞工程的新用途提供技术支撑。创新点:首次验证MRJPs对多种人体细胞的促分裂效果,证实MRJPs可部分替代FBS培养人体细胞,并取得培养人体细胞的MRJPs与FBS和细胞因子的适合比例。方法:鲜蜂王浆中分离得到的MRJPs溶液与FBS按不同比例(0/10、3/7、6/4和9/1)复配成复合血清,分别添加于无血清培养基中用于培养293T、HFL-I、231、HCT116和Changliver等5种人体细胞。以添加体积分数为10%的FBS的无血清培养基为对照,根据MTT法测定的吸光度和细胞形态比较分析结果,得到促进细胞分裂的MRJPs溶液与FBS最佳配合比例。然后在筛选出的最佳复合血清中添加不同的细胞因子,再通过同样的比较分析,得到适合的细胞因子组合。结论:MRJPs对多种人体细胞具有促进分裂作用,可部分替代FBS培养人体细胞。MRJPs与FBS的最佳配比为:60%MRJPs溶液和40%FBS(复合血清);该复合血清与细胞因子的最佳组合为:复合血清+表皮生长因子+胰岛素-转铁蛋白-硒。
- Di CHENXiao-xuan XINHao-cheng QIANZhang-yin YULi-rong SHEN
- 关键词：细胞因子
- 蜂王浆主蛋白(MRJPs)超滤分离工艺优化及产物质量分析被引量：4
- 2014年
- 采用超滤方法从鲜王浆中提取王浆主蛋白(major royal jelly proteins,MRJPs),先就水料比、pH、离子强度3种单因素对MRJPs提取率的影响进行单因素分析,然后通过正交试验对MRJPs的超滤提取工艺进行优化,最后对MRJPs分离产物冻干粉和滤后液进行成分测定.结果表明:最佳提取工艺为水料体积质量比5:1(mL/g),pH 7.0,离子强度0.5 mol/L.在最佳工艺条件下,MRJPs的提取率为82.63%,冻干粉含可溶性蛋白91.00%、水分0.01%、总糖15.22%、王浆酸2.00%,超滤副产物——滤后液中王浆酸和总糖的回收率分别为3.60%和2.11%.超滤工艺具有无溶剂污染、王浆成分可回收利用,适合规模化生产的优点,为MRJPs分离提取提供了新的工艺方法,为王浆深加工和MRJPs蛋白产品开发提供了科学依据.
- 李玫璐谭量量裘卫尹志红沈立荣
- 关键词：蜂王浆超滤分离正交试验
- 蜂王浆主蛋白对雌性小鼠生殖功能的影响及其分子机制研究
- 社会在迅速发展，人们的生活压力也急速增加，女性的生殖健康问题越来越受关注。蜂王浆(RJ)是国内外备受欢迎的天然保健食品，拥有抗疲劳、抗炎、抗氧化、免疫调节等多种生理功效。多年来，虽然有关蜂王浆具有类雌激素活性和促进生殖功...
- 刘欣
- 关键词：蜂王浆生殖功能内分泌调节分子机制
- 文献传递
- 王浆主蛋白作为胎牛血清替代物培养中国仓鼠卵巢细胞CHO-K1的效果及作用机制被引量：1
- 2018年
- 用王浆主蛋白(major royal jelly proteins,MRJPs)部分代替胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)培养中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary cell,CHO-K1),比较添加不同MRJPs/FBS(M/F)比例的培养基对细胞相对增殖率的影响。四唑盐比色法(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)结果显示:当M/F比例为50/50时对细胞的促增殖作用最显著;与完全培养基对照组(M/F 0/100)相比,培养48与72 h时的相对活细胞数分别上升了25.1%和13.6%。细胞成像仪分析表明,M/F 50/50培养基的细胞密度最高,其细胞直径显著大于完全培养基对照组。流式细胞仪结果显示,与完全培养基对照组相比,M/F 50/50培养基中的细胞增殖指数(proliferation index,PI)提高了19.4%,推测MRJPs的促细胞增殖作用可能与DNA、蛋白质及酶的合成有关。拉曼光谱检测结果显示,各处理组培养基的细胞光谱图之间没有显著差异,说明MRJPs在促进细胞增殖的同时维持了细胞的稳定性。以上结果证明,MRJPs可以部分替代FBS培养生物医药产业中应用广泛的CHO-K1细胞,降低细胞培养成本,具有产业化前景,并为蜂王浆深加工提供新的用途。
- 钱浩诚蒋晨旻陈华才沈立荣
- 关键词：中国仓鼠卵巢细胞胎牛血清促增殖细胞周期拉曼光谱
- 果蝇组织中多不饱和脂肪酸代谢产物--类二十烷酸的高效液相色谱-串联质谱法测定被引量：1
- 2016年
- 果蝇样品经固相萃取后,采用高效液相色谱-串联质谱法进行样品分析,检测条件用Endeavorsil^(TM)C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm),以0.1%甲酸水-乙腈为流动相,流速为0.3 m L/min,柱温40℃;采用电喷雾离子源负离子多重反应监测模式,内标标准工作曲线定量,建立了果蝇组织中15种多不饱和脂肪酸代谢产物——类二十烷酸的测定方法。结果显示,在2.5~200 ng/m L范围内呈良好的线性关系(r=0.991),回收率范围在89.3%~108.9%,日内精密度相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)在1.2%~12.4%,日间精密度RSD在1.0%~15.0%,检出限0.1~2.6 ng/g,定量限0.3~8.7 ng/g。所建方法简便、准确、选择性高,为研究模式生物果蝇对多不饱和脂肪酸的代谢特性提供了科学依据。
- 谭量量沈立荣
- 关键词：果蝇多不饱和脂肪酸代谢产物液相色谱-串联质谱法
- 从全球食品保障指数探讨食品安全被引量：9
- 2014年
- 近年来食品安全问题日益突出,建立公众参与的客观、公平、独立、透明的风险评估、风险交流机制成为我国未来应对食品安全风险的重要措施。2013年7月,英国经济学人智库(EIU)发布了"全球食品安全指数(GFSI)",对我国当年食品安全状况作了评估,受到各方的高度关注。为了让公众对相关背景有较为全面的了解,理性地对待我国的食品安全问题,我们依据相关信息,对GFSI作了客观解读,并以中国、美国和印度为例,从食品价格承受能力、食品供应能力和质量与安全三个方面,对这三个国家的食品安全状况进行了对比,并对我国食品安全监管体系的最新调整和改革措施进行了述评。
- 谌迪沈立荣
- 关键词：食品安全食品保障
- 王浆主蛋白(MRJPs)对张氏肝细胞的促增殖作用及其机制被引量：2
- 2015年
- 将王浆主蛋白(major royal jelly proteins,MRJPs)添加到细胞培养基中,用MTT法比较纯MRJPs与胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)、不同MRJPs/FBS比例对张氏肝细胞增殖的影响,用流式细胞仪检测MRJPs各处理对细胞周期的影响。结果表明:仅添加MRJPs不能促进细胞增殖;完全培养基(10%FBS)中MRJPs的最佳添加量为0.5mg/mL;MRJPs(5mg/mL)/FBS的添加比例为60/40时混合培养基对细胞的促增殖效果与完全培养基相比差异无统计学意义(P>0.05)。流式细胞仪检测结果显示,MRJPs与FBS配合使用可促使细胞S期及G0/G1期比例增大;推测MRJPs的作用可能与促进DNA合成、前期RNA和核糖体合成有关。
- 于张颖谌迪王一然沈立荣
- 关键词：胎牛血清促增殖细胞周期
- 饲料中添加姜黄渣对高温环境下养殖中华鳖存活率的改善作用（英文）被引量：1
- 2018年
- 目的:评估饲料中添加姜黄渣对中华鳖存活率及抗高温应激能力的改善作用;通过中华鳖的抗氧化能力分析,探讨姜黄渣的生化作用机制。创新点:证实了饲料中添加姜黄渣对中华鳖具有增强抗高温能力,提高存活率的作用,为姜黄渣作为新的水产饲料添加剂的资源开发应用提供了重要科学依据。方法:将320只雌性中华鳖(体重约250 g)随机分为对照组(标准饲料)和实验组(饲料中添加10%的姜黄渣)。在2013年7月到10月分别考察实验组和对照组中华鳖的体重、存活率;分析试验地海盐县的气温变化与中华鳖存活率的相关性;用超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)试剂盒分别检测了两组中华鳖肝组织的SOD酶活力及MDA含量;用高效液相色谱分别测定比较了两组中华鳖皮肤的姜黄素含量。结论:补充姜黄渣的中华鳖皮肤呈现金黄色,皮肤所含色素为姜黄素,平均含量为(0.14±0.03)μg/g。存活率调查显示,实验组的中华鳖存活率比对照组高135.5%;SOD和MDA分析显示,实验组中华鳖肝组织的SOD酶活比对照组高112.8%,MDA含量比对照组低36.4%。根据气温资料分析推测,持续高温容易导致中华鳖死亡,补充姜黄渣可有效降低高温造成的死亡率。综合分析显示,补充姜黄渣能显著提高中华鳖的存活率及抗高温应激能力,其作用与姜黄渣所含姜黄素的抗氧化活性相关。
- Yong CHENYi-fan ZHANGHao-cheng QIANJing-liang WANGZhe CHENJose M.ORDOVASChao-qiang LAILi-rong SHEN
- 关键词：姜黄素中华鳖存活率高温环境抗氧化
