国家自然科学基金(30371383)
- 作品数:5 被引量:23H指数:3
- 相关作者:杨恬杨珂连小华符刚余瑾更多>>
- 相关机构:第三军医大学重庆大学第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金重庆市科技攻关计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- annexinⅡ在人表皮角质形成细胞分化中的表达被引量:1
- 2004年
- 目的 :探讨annexinⅡ在正常人表皮角质形成细胞(normalhumanepidermalkeratinocytes,NHEK)分化中的表达 .方法 :①体外培养NHEK ,采用无血清无钙离子的角质形成细胞生长培养基 (KGM) ,通过改变培养基中的钙离子浓度来调节NHEK的增殖和分化 ,采用免疫细胞化学 (ICC)技术分别检测annexinⅡ在增殖和分化NHEK中的表达 .②采用免疫组织化学 (IHC)技术检测成人及新生儿表皮NHEK中annexinⅡ蛋白的表达 .结果 :①低钙 (0 .0 7mmol L)培养条件下 ,annexinⅡ呈弱阳性表达 ,且主要分布于核周 .高钙 (1.5mmol L)条件下培养 2 4h后 ,annexinⅡ仍呈弱阳性表达 ,但表达的部位出现明显变化 ,主要分布于细胞间 ;4 8h后 ,annexinⅡ于胞质及胞膜均呈强阳性表达 .②人正常皮肤切片的IHC结果显示 :annexinⅡ主要分布于基底上层的分化NHEK中 .结论 :annexinⅡ可能参与人表皮NHEK分化的调控 .
- 李习玲连小华张诚杨恬
- 关键词:表皮角质形成细胞细胞分化
- 毛囊Bulge细胞的分离培养及生物学特性研究被引量:1
- 2006年
- 目的分离培养大鼠毛囊Bulge细胞并观察其生物学特性。方法运用显微分离法及酶消化法分离大鼠毛囊Bulge细胞并进行培养,观察其增殖能力及细胞形态等的改变;采用免疫组化方法,检测毛囊Bulge细胞K19、β1整合素的表达情况。结果本方法培养的大鼠毛囊Bulge细胞纯度高、活力好,具有高增殖、低分化特性,同时表达K19、β1整合素。结论成功地分离培养了毛囊Bulge细胞,并在体外长期保持其低分化特性,为进一步深入研究毛囊发育分化提供了实验基础。
- 余瑾符刚杨恬杨珂
- 关键词:细胞分离细胞培养
- 大鼠表皮干细胞的分布与体外分离培养被引量:9
- 2007年
- 目的研究大鼠表皮干细胞的分布与体外分离培养。方法用免疫组织化学技术研究大鼠表皮干细胞的分布;用DispaseⅡ、胰酶二步法消化新生大鼠皮肤,获得单细胞悬液,Ⅳ型胶原筛选,体外培养大鼠表皮干细胞,进行免疫组化鉴定,荧光标记流式细胞仪分析。结果在表皮基底层、毛囊外根鞘区α6-integrin、K15等表皮干细胞标记物染色阳性,而分化指标CD71染色阴性;CD34在表皮基底层阴性表达,而在毛囊隆突区阳性表达;体外分离的基底层表皮干细胞生长良好,具有较高的克隆形成率;干细胞标记物α6-integrin、K15呈阳性表达,流式细胞仪检测α6-integrin达到84%,说明较为成功地体外分离培养出大鼠表皮基底层干细胞。结论在表皮基底层、毛囊外根鞘区存在表皮干细胞。
- 陈伟杨恬连小华杨珂黄恩毅
- 关键词:表皮干细胞细胞培养体外
- β-catenin在大鼠毛囊损伤修复中表达变化的研究被引量:5
- 2004年
- 目的 探讨大鼠毛囊损伤修复过程中β连环蛋白(β-catenin)表达的变化规律及意义。方法 建立大鼠触须毛囊损伤动物模型,应用免疫组化以及RT-PCR检测大鼠毛囊损伤前后β-catenin表达的变化,以及损伤后不同时期β-catenin mRNA水平的改变。结果 正常大鼠毛囊中β-catenin仅有微弱表达,而损伤后毛囊外根鞘细胞中强表达β-catenin;RT-PCR结果表明β-catenin mRNA在毛囊损伤后5小时明显上升,在损伤24小时后达到峰值,随后逐渐下降,到72小时时恢复正常水平。结论 β-catenin在大鼠毛囊损伤前后表达明显改变,提示β-catenin在大鼠毛囊损伤修复中起重要作用,可能是大鼠毛囊生长、周期维持的重要调节因子。
- 张艺杨恬曾益军
- 关键词:毛囊Β-CATENIN
- 毛囊bulge细胞在角膜缘基质诱导下向角膜上皮细胞分化的初步研究被引量:9
- 2005年
- 目的探讨体外培养的毛囊bulge细胞向角膜上皮细胞分化的可能性。方法体外分离培养毛囊bulge细胞,然后在transwell中与角膜缘基质细胞共培养诱导分化,观察毛囊bulge细胞的分化情况,免疫组化检测K12及K19表达的变化。结果体外培养的毛囊bulge细胞保持高增殖,低分化状态。经过2周左右的共培养,毛囊bulge细胞逐渐分化,部分细胞K12表达阳性。结论角膜缘基质细胞可以诱导毛囊bulge细胞向角膜上皮细胞分化。
- 余瑾杨珂杨恬符刚
- 关键词:毛囊角膜上皮转分化