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陕西省科学技术研究发展计划项目(2008K0909)

作品数：1 被引量：1H指数：1
相关作者：彭岱章翔杨晓亮曹卫东更多>>
相关机构：第四军医大学西京医院更多>>
发文基金：陕西省科学技术研究发展计划项目国家自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇细胞
  • 1篇细胞系
  • 1篇细胞系建立
  • 1篇胶质
  • 1篇胶质瘤
  • 1篇靶向
  • 1篇靶向性
  • 1篇RNA干涉

机构

  • 1篇第四军医大学...

作者

  • 1篇曹卫东
  • 1篇杨晓亮
  • 1篇章翔
  • 1篇彭岱

传媒

  • 1篇中华神经外科...

年份

  • 1篇2010
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
稳定整合靶向性14-3-3ζ基因RNA干涉载体的胶质瘤细胞系建立被引量：1
2010年
目的构建针对细胞凋亡抑制蛋白14-3-3ζ基因的特异性RNA干涉载体,并建立稳定转染该干涉载体的人胶质瘤细胞系。方法根据14-3-3ζ编码序列,设计并合成针对14-3-3ζ基因的特异性RNA干涉片断,并将其克隆入pSilencer3.1-H1neo干涉载体中,构建14-3-3ζ基因shRNA真核表达载体pSilencer-14-3-3ζ。重组载体pSilencer-14-3-3ζ和pSilencer3.1-H1neo阴性对照载体pSilencer3.1-H1neo Negtive经脂质体LipofectamineTM2000介导法转染胶质瘤细胞株U251;转染细胞经过G418筛选,采用Western blot方法分别在蛋白水平检测、筛选G418抗性的克隆细胞。结果酶切鉴定和核苷酸序列分析证实,成功构建了14-3-3ζ基因shRNA真核表达载体pSilencer-14-3-3ζ,经酶切、测序鉴定证实克隆正确。获得了稳定转染pSilencer-14-3-3ζ载体的胶质瘤细胞株。结论 14-3-3ζ基因特异性RNA干涉载体能够显著抑制14-3-3ζ基因在U251细胞中的表达,这为进一步研究14-3-3ζ在胶质瘤细胞系U251中的生物学功能和作用机制奠定了实验基础。
彭岱杨晓亮章翔曹卫东
关键词：RNA干涉胶质瘤
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