浙江省自然科学基金(Y3090343)
- 作品数：10 被引量：43H指数：4
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- 苦瓜枯萎病病菌的分离与鉴定被引量：12
- 2010年
- 自浙江省金华市苦瓜种植田采集到10株苦瓜的枯萎病病株,采用组织分离法,获得23株病原菌菌株;根据培养性状、形态特征以及分子特征,鉴定为由尖孢镰孢菌(Fusarium oxysporumSchl.)侵染引起。对该尖孢镰孢菌(F.oxysporum)进行了致病性及寄主专化型测定,结果表明该病原菌对苦瓜有明显致病性,不侵染其他测试的瓜类,证明苦瓜枯萎病是由尖孢镰孢菌苦瓜专化型(Fusarium oxysporumf.sp.momodicaeSun&Huang)引起。
- 杨叶周琴嵇豪韦凤徐晓波蒋冬花
- 关键词：苦瓜尖孢镰孢菌
- D001阳离子交换树脂分离红曲霉发酵液中γ-氨基丁酸的研究被引量：3
- 2011年
- 研究了红曲霉发酵液中的γ-氨基丁酸(GABA)分离纯化工艺。对3种脱色剂进行筛选,D101树脂对红曲发酵液具有最高的脱色率和GABA得率。分别以静态和动态吸附-解析方法考察D001离子交换树脂对GABA的最优分离条件,结果表明:脱色发酵液pH下上样,上样流速为1 BV/h,采用水和2 mol/L氨水两步洗脱,洗脱液浓缩后结晶为透明针状,GABA的总得率为45.4%。
- 嵇豪蒋冬花周琴汪鹏荣董夏梦蔡琪敏
- 关键词：Γ-氨基丁酸
- 红曲霉T-DNA插入突变库中色素突变子的筛选被引量：1
- 2011年
- 红曲霉（Monascus purpureus）是我国重要的传统食用和药用微生物,能分泌红曲色素、莫纳卡琳（Mo-nacolin K）、γ-氨基丁酸、麦角固醇等物质,被广泛用于生产食品发酵剂、食品着色剂、保健食品和药品等,在我国有上千年的应用历史。本实验以根癌农杆菌（Agrobacterriumtum efaciens）介导的红曲霉突变体库中754株突变子菌株为材料,通过乙醇提取法筛选出了9株产红曲色素发生显著变化的色素突变子,其中S50在505 nm波长处的色价降为原始菌株S的0.12倍,几乎变为白化株。300~600 nm波长下UV-VIS扫描图谱特征显示,色素突变子不仅色价发生了变化,而且吸收波长、吸收峰值也发生了不同程度的变化。最后,对色素突变子菌落形态、显微结构、潮霉素抗性、遗传稳定性以及产桔霉素能力等进行分析,为研究红曲霉产色素相关基因奠定了基础。
- 庄静娜蔡琪敏曹丽凌韦凤蒋冬花
- 关键词：红曲霉根癌农杆菌突变体库红曲色素桔霉素
- 响应面法优化巨大芽孢杆菌中的聚-β-羟基丁酸(PHB)提取工艺被引量：1
- 2012年
- 为获得聚-β-羟基丁酸(PHB)提取的最佳工艺,以氯仿浓度,提取时间,和提取温度为影响因子,在单因素实验结果的基础上,应用Box-Benhnken中心组合方法进行三因素三水平的实验设计,以PHB提取量为响应值,运用响应面法(RSM)对提取条件进行进一步的优化。结果表明:在氯仿浓度69.7%,提取温度59.7℃,提取时间3.0 h的条件下,PHB提取量达到最大值4.430 g/L。
- 周琴董夏梦汪鹏荣蓝丽精嵇豪蒋冬花
- 合成聚-β-羟基丁酸芽孢杆菌的筛选、鉴定及碳氮源优化被引量：6
- 2010年
- 从污泥中分离纯化,筛选得到一株高产聚-β-羟基丁酸的菌株,标号为Bm-10,针对不同碳氮源对Bm-10产聚-β-羟基丁酸的影响进行了研究,结果表明最适碳氮源分别为葡萄糖和牛肉膏.菌株Bm-10经形态、生理生化和16S rDNA基因序列鉴定,确定为巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium).
- 周琴蒋冬花杨叶嵇豪
- 关键词：聚-Β-羟基丁酸碳源氮源芽孢杆菌
- 两株紫色红曲菌根癌农杆菌介导的T-DNA转化子的生物学特性被引量：3
- 2013年
- 从根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的紫色红曲菌(Monascus purpureus)菌株S的转化子库中筛选出2株产红曲色素性能变化显著且遗传稳定的转化子S62和S158,分别对其菌落形态、显微结构、菌落生长速度、遗传稳定性、潮霉素抗性及其产色素和桔霉素的能力等进行了分析.结果表明,2株转化子的生物学特性均发生了显著变化,且发酵后红曲色素的色价和桔霉素的产量降低.其中:转化子S62液态发酵后色价为2.71 U/mL,仅为原始菌株S色价的0.04倍;转化子S158发酵后色价为17.62 U/mL.
- 曹丽凌齐育平梁帅帅施晓莉蒋冬花
- 关键词：根癌农杆菌转化子红曲色素
- 红曲菌转化子性状分析及分子验证
- 2012年
- 以根癌农杆菌(Agrobacterrium tumefaciens)介导的紫色红曲菌(Monascus purpureus)突变体库中的538株转化子菌株为材料,通过菌落形态观察并结合显微特征分析,筛选获得了9株形态特征变化显著的转化子,对其进行了分子验证和遗传稳定性检测,证明转化子基因组DNA中含有T-DNA插入片段,并能稳定遗传.在此基础上,采用乙醇提取法和改良的纸色谱法分别对转化子的主要代谢产物红曲色素和γ-氨基丁酸(γ-Ami-nobutyric Acid,GABA)进行了分析,发现突变株产生次级代谢产物的能力有不同程度的变化.
- 蔡琪敏庄静娜魏银文吴寒华崔宇辉曹丽凌蒋冬花
- 关键词：红曲菌突变体库转化子红曲色素
- 响应面法优化红曲霉X27液态发酵产γ-氨基丁酸工艺条件被引量：15
- 2010年
- 基于P-B法试验的结果,利用响应面法对红曲霉菌株X27液态发酵产γ-氨基丁酸(GABA)的工艺条件进行了优化。Plackett-Burman法确定了红曲霉X27液体发酵产GABA的三个主要的影响因素(温度,pH和通气量);然后利用响应面分析方法,确定其最优工艺条件为:34℃,pH 5.5,通气量120 L/h,其GA-BA产量可达9.18 g/L。
- 叶砚蒋冬花嵇豪
- 关键词：红曲霉GABA响应面法液态发酵
- 农杆菌介导的紫色红曲霉遗传转化体系的建立和优化被引量：5
- 2010年
- 通过优化各种转化因素,建立了根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导红曲霉(Monascus)的高效转化体系:红曲霉在PDA培养基培养21 d后收集孢子,制备红曲霉孢子悬浮液,浓度为106个/mL,根癌农杆菌浓度为OD600值0.5,诱导剂AS浓度为100μmol/L,农杆菌与红曲霉在25℃共培养3 d。采用此转化体系构建了含有530多个转化子的红曲霉T-DNA插入突变体库。随机选取50株转化子菌株进行分子验证和稳定性检测,证明T-DNA成功插入红曲霉基因组DNA中,并能稳定遗传。最后,通过形态观察筛选出8株变异较大的菌株,为以后的红曲霉基因功能研究奠定了一定的基础。
- 蔡琪敏蒋冬花嵇豪蓝丽精
- 关键词：红曲霉根癌农杆菌T-DNA突变体库
- 酵母菌SRAP-PCR反应体系的优化及遗传多样性分析
- 2010年
- 从8个正向引物和11个反向引物随机组合成的88个引物对中筛选出14个引物组合,对19株酵母菌进行PCR扩增。采用正交试验设计方法,对SRAP的影响因素进行研究,从Mg2＋、dNTPs、DNA浓度、引物、TaqDNA聚合酶设计5因素4水平进行优化试验,以确定PCR电泳分析的最佳条件。14个引物组合共扩增出279条带,其中92.5%呈多态性,相似系数范围为0.60-1.00。
- 蒋冬花徐晓波叶莹莹嵇豪蔡琪敏
- 关键词：SRAP酵母菌正交设计聚类分析
