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一种基于菌丝悬浮液的核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)接种方法的建立被引量：12: 2010年; 通过分析核盘菌(Sclerotiniasclerotiorum)菌丝培养时间、菌丝体浓度以及接种后的保湿时间等因子对接种后油菜植株发病的影响,建立了一套有效的基于菌丝悬浮液的核盘菌喷雾接种方法体系.主要步骤包括:从在平板活化3 d后核盘菌菌落边缘打取菌碟(Φ6 mm),按10块?100 mL-1加入液体培养基中,25℃、200 r?min-1下振荡培养4 d,用匀浆机匀浆30 s制成菌丝悬浮液,终浓度调至600 nm波长下吸光度值为1.0～2.0,用空压机喷雾接种油菜植株,保湿48 h.该方法适用于油菜苗期对菌核病的抗病性评价,还可用于立枯丝核菌(Rhizoctoniasolani)的接种研究.; 臧宪朋徐幼平蔡新忠; 关键词：核盘菌接种方法立枯丝核菌抗病性评价

拟南芥AGO2的亚细胞定位分析被引量：8: 2013年; Argonaute(AGO)是一类高度保守的蛋白,对基因沉默和植物抗病性起重要调控作用。为进一步了解AGO作用机制,今采用生物信息学技术对拟南芥AGO蛋白各成员的细胞定位进行预测,并对AtAGO2进行亚细胞定位分析。10个拟南芥AGO蛋白均不含信号肽序列,表明它们不是外泌蛋白。AtAGO1,AtAGO2,AtAGO3,AtAGO4和AtAGO9带有核定位信号,但携带的核定位信号肽序列各不相同,显示这些AGO蛋白可能定位于细胞核。通过克隆AtAGO2全长序列,构建获得与报告基因eGFP融合表达的细胞定位检测载体pCHF3-eGFP∷AtAGO2,采用农杆菌介导的方法将其瞬时表达于本氏烟(Nicotiana benthamiana)叶片中,激光共聚焦显微镜观察结果表明,AtAGO2蛋白定位于细胞质和细胞核中。茉莉酸(jasmonic acid,JA)处理诱导AtAGO2蛋白在细胞质膜及其周围"颗粒化"聚集,但抗病诱导剂苯并噻二唑(benzothiodiazole,BTH)处理不影响AtAGO2蛋白的亚细胞定位。这些结果说明AtAGO2可能通过JA途径参与植物抗病性的调控。; 赵丽夏文强蔡新忠; 关键词：ARGONAUTE 亚细胞定位核定位抗病性

泛素融合降解蛋白基因UFD1对植物抗病和抗逆性的调控功能分析: 2012年; 采用反转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)克隆获得1个番茄泛素融合降解蛋白(ubiquitin fusion degradation protein,UFD)基因片段UFD1,并应用病毒诱导的基因沉默(virus-induced gene silencing,VIGS)技术分析该基因对植物抗病性和抗逆性的调控功能.结果表明:在本氏烟(Nicotiana benthamiana)植株中UFD1基因的沉默导致Cf-4/Avr4和Cf-9/Avr9介导的过敏性反应(hypersensitive response,HR)以及水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)诱导的HR显著减弱,烟草野火病坏死症状明显减轻,在高盐胁迫下叶片叶绿素含量显著降低,但对菌核病病害症状以及抗干旱能力的影响不明显.表明UFD1基因是植物抗病和抗逆性的重要调控因子,它可能对Cf-4/Cf-9介导的基因对基因抗性、对Xoo的非寄主抗性和耐盐性起正向调控作用,而对烟草野火病抗性起负调控作用.; 赖亿玉黎飞徐幼平蔡新忠; 关键词：抗病性抗逆性

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教育部“新世纪优秀人才支持计划”(NCET-08-0485)