国家自然科学基金(30772872)
- 作品数：14 被引量：141H指数：6
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- 相关机构：北京中医药大学宁夏医科大学齐齐哈尔医学院更多>>
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- 毒热平注射液对流感病毒感染小鼠的保护作用被引量：12
- 2008年
- 目的探讨毒热平注射液对流感病毒感染小鼠的保护作用。方法用流感病毒亚甲型鼠肺适应株A/FM/1/47(H1N1)感染小鼠,建立小鼠流感病毒性肺炎的生物模型,采用ELISA方法测定肺组织悬液中的IL-4和IFN-γ的活性水平,观察毒热平注射液对流感病毒感染小鼠的保护作用。结果毒热平注射液各剂量组小鼠肺匀浆的IFN-γ活性水平明显升高而IL-4的活性显著下降;毒热平注射液的0.33 g/(kg.d)和0.17 g/(kg.d)剂量组对流感病毒感染小鼠具明显的保护作用。结论毒热平注射液能通过调节细胞因子的活性,纠正Th1/Th2细胞失衡而发挥抗流感病毒作用。
- 张艳丽范新生顾立刚李澎涛
- 关键词：流感病毒TH1/TH2
- 痰热清注射液对FM1感染HEK-293T细胞NF-κB转录活性及TNF-α产生影响的研究
- 目的:观察不同浓度的痰热清注射液对流感病毒亚甲型鼠肺适应株（FM1）感染小鼠肺组织中细胞因子TNF-α产生和FM1感染HEK-293T细胞中报告基因NF-κB转录相对活性的影响,探讨痰热清注射液抗流感病毒FM1的作用机制...
- 牛旭艳王甫张春晶郑金粟顾立刚
- 关键词：痰热清注射液TNF-Α
- 文献传递
- 毒热平注射液对流感病毒FM1感染小鼠免疫功能的影响被引量：3
- 2009年
- 目的研究毒热平注射液对流感病毒FM1感染性肺炎小鼠肺指数、白细胞介素4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)基因转录水平、CD40L蛋白表达水平的影响,探讨其抗病毒的作用机制。方法以ICR小鼠(SPF级)作为研究对象。实验分为7组:毒热平注射液大、中、小剂量组及双黄连组、利巴韦林组、FM1感染模型组、正常组。流感病毒FM1感染小鼠造模连续7d后摘取肺组织,计算肺指数,采用RT-PCR法测定肺组织中INF-γmRNA、IL-4mRNA基因转录水平,采用Westernblot法检测肺组织中CD40L蛋白表达水平。结果FM1感染模型组的肺指数明显高于正常组(P<0.001),利巴韦林组、双黄连组及毒热平注射液大、中、小剂量组与FM1感染模型组比较,肺指数均明显降低(P<0.001或P<0.01),其中以毒热平中剂量组最好。毒热平注射液能降低FM1感染小鼠肺组织中IL-4mRNA基因转录(P<0.001),且与浓度成反向关系,但毒热平注射液组的IL-4mRNA基因转录水平明显高于利巴韦林组(P<0.001);毒热平注射液能增强FM1感染小鼠肺组织中IFN-γmRNA基因转录(P<0.001),且与浓度呈正向相关性,毒热平注射液大、中剂量组与利巴韦林组比较无统计学意义(P>0.05)。毒热平注射液能抑制FM1感染小鼠肺组织中CD40L蛋白表达(P<0.001),抑制效果与浓度呈正相关性,但毒热平注射液中、小剂量组CD40L蛋白表达水平显著高于正常组与利巴韦林组(P<0.05)。结论毒热平注射液体内能降低流感病毒FM1感染小鼠的肺指数,增强肺组织IFN-γmRNA基因转录,抑制IL-4mRNA基因转录,抑制流感病毒FM1感染小鼠肺组织CD40L蛋白的表达。
- 景姗顾立刚周芸李澎涛
- 关键词：毒热平注射液流感病毒FM1白细胞介素4干扰素-ΓCD40L
- 清热解毒中药对流感病毒感染细胞NF-κB转录活性及TNF-α mRNA水平的影响被引量：4
- 2009年
- 目的观察清热解毒中药毒热平、痰热清注射液对流感病毒亚甲型鼠肺适应株(FM1)感染人胚肾上皮细胞株HEK-293T细胞中报告基因NF-κB相对转录活性以及靶基因肿瘤坏死因子(TNF-α)mRNA的影响,探讨清热解毒中药抗流感病毒FM1的作用机制。方法采用四唑盐(MTT)比色法体外检测毒热平、痰热清及利巴韦林注射液对HEK-293T细胞增殖的影响。FM1感染HEK-293T细胞后,利用双荧光素酶顺式报告系统,以利巴韦林对照,检测不同药物组中报告基因NF-κB-Luc相对荧光素酶活性;RT-PCR方法检测各组细胞中TNF-αmRNA水平。结果MTT结果显示,毒热平、痰热清、利巴韦林各药物组不影响细胞正常增殖(P>0.05)。报告基因结果显示,与细胞对照组相比,流感病毒FM1组细胞NF-κB转录活性显著增高(P<0.01),与FM1病毒组相比,毒热平1、10、100 mg/L,痰热清1/300、1/200、1/100倍稀释药液,利巴韦林50 mg/L均可不同程度下调NF-κB的转录活性(P<0.01)。RT-PCR结果显示,与细胞对照组比较,FM1病毒组的TNF-αmRNA表达明显增高(P<0.05),各药物组与FM1病毒组相比,TNF-αmRNA表达量明显降低(P<0.01)。结论毒热平、痰热清治疗流感病毒的作用机制之一,可能是通过下调转录因子NF-κB的转录活性,从而影响下游靶基因TNF-α的表达,减少肺损伤和相应炎症反应。
- 牛旭艳顾立刚张春晶王甫
- 关键词：清热解毒中药转录因子NF-ΚB
- 黄芩苷对流感病毒FM1肺炎小鼠肺损伤的保护研究被引量：30
- 2011年
- 目的:研究黄芩苷对流感病毒FM1感染小鼠肺组织NO及氧化损伤的保护作用。方法:将96只ICR鼠随机分为正常对照组、模型组、利巴韦林组(100mg.kg-1.d-1),黄芩苷大剂量组(1 500mg.kg-1.d-1),黄芩苷中剂量组(750mg.kg-1.d-1)和黄芩苷小剂量组(375mg.kg-1.d-1),每组16只。用流感病毒亚甲型鼠肺适应株A/FM/1/47(H1N1)感染小鼠,建立小鼠流感病毒性肺炎的生物模型,用不同剂量黄芩苷溶液灌胃治疗后,观察小鼠肺指数、肺组织H-E染色切片病理形态变化,比色法检测肺组织匀浆总NO合成酶(NOS)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)含量或活性。结果:黄芩苷中、小剂量组均能明显降低肺指数,减轻肺组织病变;显著下调肺匀浆总NO合成酶、丙二醛及上调谷胱甘肽过氧化物酶含量或活性(P<0.05,P<0.01)。结论:黄芩苷可通过抑制流感病毒性肺炎小鼠肺组织NO及过氧化物水平而发挥保护作用。
- 万巧凤顾立刚殷胜骏祈广见张舒李根茂葛东宇
- 关键词：黄芩苷流感病毒肺损伤NO合成酶谷胱甘肽过氧化物酶
- 毒热平注射液体外抗甲型流感病毒的作用研究被引量：4
- 2008年
- 目的:观察毒热平注射液体外抗流感病毒的作用。方法:采用结晶紫染色法测定毒热平注射液不同加药方式对流感病毒亚甲型鼠肺适应株(FM1)的体外抑制作用及其作用24、36、48、72h的抗病毒效率。结果:毒热平注射液能明显阻止病毒吸附于细胞,并抑制细胞内病毒的复制增殖,在高浓度(≥0.18mg/mL)时有直接杀病毒作用。抗病毒效率在48h达高峰,且随时间延长在高浓度(≥0.27mg/mL)时基本不变,而在低浓度时有下降趋势。结论:毒热平注射液具有明显的体外抗流感病毒作用。
- 张艳丽顾立刚曾郁敏李澎涛
- 关键词：流感病毒抗病毒体外
- 毒热平注射液对流感病毒性肺炎小鼠肺组织MMP-9及TIMP-1含量的影响被引量：5
- 2011年
- 目的观察毒热平注射液对流感病毒性肺炎小鼠肺组织中基质金属蛋白酶9(matrix metallopro-teinase-9,MMP-9)及基质金属蛋白酶抑制物1(tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-1,TIMP-1)的影响。方法 66只ICR小鼠随机分为正常组、模型组、毒热平低剂量组(0.435mg/d)、中剂量组(0.870mg/d)、高剂量组(1.740mg/d)和利巴韦林对照组(对照组,2.500mg/d),每组11只。以经鼻吸入流感病毒亚洲甲型鼠肺适应株(FM1)复制小鼠流感病毒性肺炎模型。感染后当日开始腹腔注射给药,0.3mL/次,1次/天。5天后处死小鼠,计算肺指数;制作切片,光镜观察肺组织病理形态变化;采用ELISA双抗体夹心法测定肺组织匀浆液中MMP-9及TIMP-1含量。结果与正常组比较,模型组小鼠肺组织出现明显炎性病变,其肺指数、肺组织MMP-9及MMP-9/TIMP-1显著升高(P<0.01),而TIMP-1含量变化不明显(P>0.05);与模型组比较,毒热平低、中剂量组和对照组MMP-9降低(P<0.01),各剂量组和对照组TIMP-1升高(P<0.01),MMP-9/TIMP-1降低(P<0.01)。结论毒热平注射液可通过降低流感病毒性肺炎小鼠肺组织中MMP-9含量,提高TIMP-1含量,调节两者比值,从而减轻肺组织炎性损伤。
- 祁广见顾立刚彭桂英殷胜骏范新生
- 关键词：毒热平注射液基质金属蛋白酶抑制物
- 黄芩苷对FM1肺炎小鼠肺组织细胞凋亡FAS/FAS-L系统的影响被引量：23
- 2011年
- 目的研究黄芩苷对FM1肺炎小鼠肺组织细胞凋亡FAS/FAS-L系统的影响,探索黄芩苷抗流感病毒感染机制。方法制备小鼠甲型流感病毒性肺炎模型,通过死亡保护实验确定黄芩苷的最小有效浓度,TUNEL法观察小鼠肺组织细胞凋亡情况,RT-PCR技术检测肺组织FAS(CD95)、FAS-L(CD178)、Caspase-3 mRNA表达,Western blot方法测定肺组织FAS、FAS-L、Caspase-3蛋白表达。结果与模型组相比,黄芩苷187.5、375 mg.kg-1剂量均能明显降低肺组织细胞凋亡率,明显降低肺组织FAS、FAS-L及Caspase-3 mRNA和蛋白的表达(P<0.05)。结论黄芩苷能够明显抑制FM1肺炎小鼠肺组织细胞的凋亡,其可能通过影响细胞凋亡受体途径FAS/FAS-L系统而发挥抗流感病毒感染作用。
- 万巧凤顾立刚殷胜骏葛东宇李根茂
- 关键词：黄芩苷TUNELFAS-L
- 人参皂苷Rg1和Rb1对流感病毒感染细胞的影响及其机制研究被引量：4
- 2009年
- 目的研究人参皂苷Rg1和Rb1对流感病毒感染所致的细胞氧化应激损伤、细胞内转录因子（NF—KB和AP—1）转录活性及前炎症细胞因子IL-8释放的影响。方法甲型流感病毒H3N2作为刺激因素，以DCFH—DA为探针，流式细胞仪检测细胞内活性氧（iROS）产生水平。利用双荧光素酶顺式报告系统，榆测人参皂苷Rg1和Rb1对NF—κB—luc及AP-1-luc相对荧光素酶值的影响。RT—PCR法进一步验证人参皂苷Rg1和Rb1对TL-8mRNA表达水平的影响。结果病毒感染后细胞中ROS产生增加45％～55％，而给予有效浓度人参皂苷Rg1和Rb1后，荧光强度降低，与正常细胞内自由基含量基本相同。通过NF-κB及AP-1双荧光素酶报告系统检测发现，与正常对照组比较，病毒感染的细胞中NF—κB及AP-1荧光素酶报告活性明显升高；与病毒损伤组比较，人参皂苷Rg1、Rb1治疗组NF—κB及AP—1荧光素酶报告活性明显受到抑制。RT—PCR结果显示人参皂苷Rg1和Rh1能明显抑制病毒诱导的1L-8mRNA表达水平的变化，使之趋近于正常对照组水平。结论人参皂苷Rg1和Rb1可拈抗病毒感染细胞中ROS产生水平、降低氧化应激敏感的信号传导通路Nn-κB及AP-1的转录活性，并抑制二者下游靶基因IL-8表达。
- 张春晶顾立刚牛旭艳王甫彭桂英
- 关键词：氧化应激核因子-ΚB激活蛋白-1
- 毒热平注射液对甲型流感病毒H3N2体外感染细胞中TLR7信号通路的影响被引量：6
- 2010年
- 目的:观察甲型流感病毒H3N2感染人胚肾上皮细胞(HEK-293T)细胞及人肺腺癌上皮细胞(A549)细胞后,对NF-κB转录活性以及TLR7、TNF-α、IL-8、IFN-βmRNA的影响,探讨H3N2对体外感染细胞中TLR7信号通路的影响及清热解毒中药毒热平注射液的干预作用。方法:采用MTT法体外检测各组药物对293T、A549细胞增殖的影响;H3N2感染293T细胞后,利用双荧光素酶报告系统,以利巴韦林、清开灵注射液为药物对照,检测毒热平注射液各浓度组细胞中NF-κB相对荧光素酶活性;H3N2感染A549细胞后,RT-PCR方法检测各组细胞中TLR7、TNF-α、IL-8、IFN-βmRNA水平。结果:MTT结果显示,毒热平、利巴韦林、清开灵注射液各浓度不影响细胞正常增殖(P>0.05)。报告基因结果显示,与细胞对照组相比,H3N2感染组细胞NF-κB转录活性显著增高(P<0.01);与H3N2感染组相比,利巴韦林0.5μg/mL,清开灵1/128稀释组,毒热平1μg/mL,10μg/mL,100μg/mL组均可不同程度下调NF-κB的转录活性(P<0.01)。RT-PCR结果显示,与细胞对照组比较,H3N2病毒组的TLR7、TNF-α、IL-8、IFN-βmRNA表达明显增高(P<0.01);与H3N2感染组相比,一定浓度的药物组TLR7、TNF-α、IL-8、IFN-βmRNA表达量明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论:流感病毒H3N2攻击细胞可以显著上调TLR7受体的表达和核因子NF-κB转录活性,并引起下游相关靶基因的表达增多。毒热平注射液可以下调H3N2引起的TLR7信号通路的激活,抑制NF-κB的转录活性,减少下游炎性因子TNF-α、IL-8、IFN-β的表达。关键词:H3N2;毒热平注射液;NF-κB;双荧光素酶报告系统;TLR7;
- 牛旭艳张春晶顾立刚
- 关键词：H3N2毒热平注射液信号转导
