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碱性成纤维细胞生长因子基因转染对犬牙龈成纤维细胞的影响被引量：5: 2009年; 背景：研究发现，局部应用外源性碱性成纤维细胞生长因子可明显促进体外培养牙龈成纤维绌胞的增殖，口内局部应用可加速牙龈组织伤口的愈合。目的：观察碱性成纤维细胞生长因子基因转染对Beagle犬牙龈成纤维细胞生物学特性的影响。设计、时间、地点：观察对比体外细胞学实验，于2008-04／09在福建医科大学细胞与发育工程中心及解放军南京军区福州总医院比较医学科完成。材料：Beagle犬4只，12月龄，体质量10-13kg，雄性；含有人全长碱性成纤维细胞生长因子cDNA的plRES2．EGFP．bFGF质粒为自行构建。方法：切取Beagle犬左上颌第2，3，4前磨牙的游离龈，无菌磷酸盐缓冲液冲洗4遍，将组织块剪碎后用2．5g／L的胰酶37℃消化2h，离心后弃上清，加入含体积分数为10％胎牛血清的DMEM，接种于6孔板并覆盖玻片，置丁37℃、体积分数为5％C02的培养箱培养，取对数生长期细胞消化传代。利用脂质体介导法将plRES2．EGFP．bFGF质粒转染Beagle犬牙龈成纤维细胞，以空质粒转染组及未转染组作为对照。主要观察指标：MTT法检测牙龈成纤维细胞增殖状况；AO／EB双染色检测牙龈成纤维细胞凋亡：化学比色法检测牙龈成纤维细胞碱性磷酸酶活性。结果：3组细胞均在转染后第3天开始进入对数生长期。MTT检测结果显示，转染后随着时间改变，与空质粒转染组及未转染组相比，实验组牙龈成纤维细胞的增殖能力明显增强（P〈0．05），而空质粒转染组及未转染组差异无显著性意义（P〉0．05）。AO／EB双染色结果显示，实验组牙龈成纤维细胞凋亡率低于空质粒转染组及未转染组（P〈0．05）。转染碱性成纤维细胞生长因子基因后，牙龈成纤维细胞碱性磷酸酶活性未见明显改变，与未转染细胞差异无显著性意义。结论：碱性成纤维细胞生长因子基因转染可以加速牙龈; 陈欣戬闫福华钟泉赵欣江一平; 关键词：碱性成纤维细胞生长因子基因治疗成纤维细胞

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国家自然科学基金(34071892)

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