国家自然科学基金(81101730)
- 作品数：7 被引量：8H指数：2
- 相关作者：杜晶春徐霞李雪燕吴玉朱蕊更多>>
- 相关机构：广州医学院广州医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- TRAIL联合药物诱导肿瘤细胞凋亡协同机制的研究被引量：1
- 2012年
- 肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)能选择性诱导肿瘤细胞和恶性转化细胞凋亡,对大多数正常细胞却无杀伤作用,被认为是一种非常具有发展潜力的抗肿瘤因子,近年已成为国内外研究的热点。许多学者发现在 TRAIL 联合各种药物作用于肿瘤细胞的过程中二者有协同效应,但不同药物与 TRAIL 协同诱导肿瘤细胞凋亡的机制各不相同。
- 李雪燕杜晶春徐霞
- 关键词：凋亡
- 凋亡素选择性抗肿瘤的分子机制被引量：1
- 2012年
- 凋亡素（apoptin）是一种来源于鸡贫血病毒（chicken anemia virus，CAV）的小分子量蛋白。CAV是一种无囊膜的DNA病毒，其基因组为2300bp的单链环状DNA分子，含有3个完全或部分重叠的开放读码框，分别编码3个蛋白质：VP1、VP2和VP3E。
- 吴玉杜晶春徐霞
- 关键词：凋亡素分子机制抗肿瘤鸡贫血病毒DNA病毒开放读码框
- 人羊水来源间质干细胞的鉴定及其免疫调节功能和相关机制研究被引量：2
- 2013年
- 目的:从人羊水组织中体外培养获得间质干细胞,并探讨其免疫调节能力和相关的调节机制。方法:收集人羊水组织,采用贴壁培养的方法扩增和传代。检测羊水来源的间质干细胞的体外分化能力,并检测其免疫调节能力,同时检测颗粒酶B在人羊水来源间质干细胞中的表达情况,并通过特异性抑制剂阻断方法验证颗粒酶B在其免疫调节中的作用。结果:人羊水来源间质干细胞具有多向分化能力和免疫调节活性,并通过表达颗粒酶B的方式参与其免疫调节功能。结论:体外培养获得了具有免疫调节功能的人羊水来源的间质干细胞,颗粒酶B途径可能是一种新发现的间质干细胞免疫调节方法。
- 杜晶春朱蕊徐霞
- 关键词：体外分化颗粒酶B免疫调节
- 携带跨膜信号的凋亡蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备被引量：2
- 2013年
- 目的构建携带跨膜信号序列的凋亡蛋白(apoptin)的原核表达载体PET-28a(+)-apoptin,诱导表达并纯化重组apoptin蛋白,制备多克隆抗体。方法用多重PCR的方法扩增跨膜信号序列(PTD)及apoptin的编码序列,构建原核表达载体PET-28a(+)-PTD-apoptin,转化大肠杆菌BL21(DE3),低温条件下IPTG诱导目的基因表达,SDS-PAGE方法鉴定蛋白表达,经镍亲和层析方法纯化目的蛋白后,免疫BALB/c小鼠,制备多克隆抗体。结果 DNA测序鉴定表明成功构建了原核表达载体PET-28a(+)-PTD-apoptin,该重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经低温和IPTG诱导后,获得重组apoptin蛋白,制备的多克隆抗体经ELISA方法和免疫印迹法证实能特异性地识别apoptin。结论成功获得了携带跨膜信号序列的重组蛋白apoptin及其多克隆抗体,为进一步研究其特异性诱导肿瘤细胞凋亡功能及相关机制奠定了基础。
- 杜晶春吴玉李雪燕
- 关键词：凋亡蛋白原核表达多克隆抗体
- 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体修饰的人羊水间充质干细胞
- 2013年
- 背景:以间充质干细胞为载体的基因治疗新方法具有广阔的应用价值。目的:利用慢病毒感染方法将肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体导入人羊水来源的间充质干细胞,以期获得稳定表达肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的人羊水间充质干细胞。方法:首先利用多位点Gateway技术构建慢病毒表达载体pLVpuro/EF1α-肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体,将该表达载体与慢病毒包装质粒同时转染293FT细胞,从而获得携带肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因的慢病毒颗粒。利用重组慢病毒颗粒感染人羊水间充质干细胞,并通过抗生素筛选的方法获得稳定表达目的基因-肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的羊水间充质干细胞,并对其稳定性进行鉴定。结果与结论:酶联免疫吸附法和Westernblot检测结果表明,肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体蛋白在感染的人羊水间充质干细胞内呈高表达,其表达量可达到72μg/L。说明实验成功制备了肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体修饰的人羊水间充质干细胞。
- 杜晶春朱蕊范婷婷王鹏鲲林勇平徐霞
- 关键词：干细胞肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因修饰慢病毒载体目的基因国家自然科学基金
- CD73在人骨髓间充质干细胞免疫调节功能中的作用被引量：2
- 2012年
- 目的探讨CD73在人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)免疫调节功能中的作用。方法分离、培养hBMSCs,利用流式细胞分析技术检测hBMSCs上CD73分子的表达情况,同时检测CD73水解腺苷一磷酸(AMP)的能力。利用体外植物凝集素(PHA)刺激淋巴细胞增殖的方法检测CD73是否参与hBMSCs的免疫调节功能。结果 hBMSCs高表达CD73分子,并具有水解AMP的活力,特异性抑制剂APCP能够阻断CD73的水解酶活性并降低hBMSCs的免疫调节活性。体外混合培养实验结果显示CD73参与hBMSCs介导的抑制淋巴细胞增殖作用。结论 hBMSCs表达的CD73分子具有水解酶活性并参与hBMSCs的免疫调节功能。
- 杜晶春吴玉李雪燕
- 关键词：人骨髓间充质干细胞免疫调节
- 活化的淋巴细胞对人骨髓间质干细胞的细胞毒性研究
- 2012年
- 目的利用体外混合培养方法深入研究间质干细胞和免疫细胞的相互作用,为间质干细胞的合理应用提供理论依据。方法分别利用贴壁培养和密度梯度离心的方法获得人骨髓间质干细胞和外周血单核细胞,利用体外混合培养的方法研究间质干细胞和淋巴细胞的相互作用。结果人骨髓来源的间质干细胞能够抑制淋巴细胞的增殖,但是也很容易遭到活化淋巴细胞的毒性攻击。活化淋巴细胞分泌的炎症因子能够驱使淋巴细胞向间质干细胞周围移动从而加强彼此间的相互作用。作为一种反应机制,间质干细胞在炎症因子刺激后能够获得一定程度上的对活化淋巴细胞的细胞毒性抗性。间质干细胞最终能否发挥免疫调节作用将取决于双方力量的平衡。结论体外研究结果提示人骨髓间质干细胞对活化淋巴细胞的细胞毒性敏感,该结果可能反映了间质干细胞输入体内后的情况,为间质干细胞的临床应用提供了新的思考和借鉴。
- 杜晶春李雪燕吴玉徐霞
- 关键词：淋巴细胞免疫调节细胞毒性
