国家教育部博士点基金(20050226008)
- 作品数:2 被引量:4H指数:1
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- 三氧化二砷对不同p53表型胶质瘤细胞程序性死亡相关基因表达的影响被引量:1
- 2007年
- 目的探讨三氧化二砷(As_2O_3)对两种不同p53表型胶质瘤细胞U87MG、T98G作用后细胞程序性死亡相关基因表达的影响。方法应用基因芯片技术筛选出As_2O_3作用于两种胶质瘤细胞U87MG、T98G前、后与细胞程序性死亡有关的表达差异有统计学意义的基因;用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞生长抑制率;用电镜和原位凋亡检测(TUNEL)法及及吖啶噔/溴乙啶双荧光染色进行细胞形态观察、流式细胞仪等方法检测细胞程序性死亡改变。结果两种胶质瘤细胞应用As_2O_3后,透射电镜下T98G中频繁地观察到细胞自噬现象;筛选出U87MG细胞在As_2O_3作用前后差异表达且与程序性死亡相关基因共46条(上调33条,下调13条)。T98G细胞在As_2O_3作用前后差异表达且与程序性死亡相关基因共54条(上调34条,下调20条)。结论A_s2O_3以剂量依赖的方式通过细胞程序性死亡来抑制U87MG和198 G细胞的增殖;As2 03诱导下的两种不同P53表型的细胞系中还存在非凋亡调控的细胞程序性死亡(自噬);P53/ATM通路的基因、Bcl-2家族、TNF配体家族、TNF受体家族基因参与A_s2O_3诱导胶质瘤细胞程序性死亡的发生机制。
- 张健赵世光
- 关键词:三氧化二砷胶质瘤基因芯片
- 砷对人胶质瘤细胞周期调控相关基因表达的影响被引量:3
- 2007年
- 目的比较三氧化二砷(As_2O_3)对两种不同p53表型胶质瘤细胞U87MG、T98G细胞周期调控相关基因表达的影响。方法应用功能分类细胞周期基因芯片技术,筛选出As_2O_3作用于两种胶质瘤细胞U87MG、T98G后与细胞周期调控表达有差异的基因。并对3条有共性表达的基因进行Western印迹分析;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞生长抑制率;流式细胞仪分析细胞周期改变。结果MTT分析表明:As_2O_3对2个细胞系的生长有抑制作用,且抑制率具有浓度和时间的依赖性,砷作用72h后,U87MG和T98G细胞系的生长抑制率为50%(IC_(50))时,其浓度分别为1.78、3.55μmoL/L。As_2O_3可以将U87MG和T98G细胞周期阻滞于G_0/G_1和G_2/M期。U87MG细胞在加入As_2O_3后,差异表达2倍以上的基因共11条,表达上调的有5条,下调的有6条。T98G细胞在加入As_2O_3后。差异表达的基因共13条,表达上调的有9条,下调的有4条。Western分析显示,As_2O_3能上调2个胶质瘤细胞系的P53蛋白水平,同时降低细胞周期蛋白B1、D1表达。结论As_2O_3通过将细胞周期阻滞于G_0/G_1和G_2/M期来抑制U87MG和T98G细胞的增殖;p53、Cyclin B、Cylin D等基因表达与As_2O_3诱导胶质瘤细胞周期阻滞的发生有关。
- 张健赵世光
- 关键词:砷胶质瘤基因芯片基因表达慢性砷中毒