国家自然科学基金(81070157) 作品数:33 被引量:96 H指数:9 相关作者: 王如兴 钱玲玲 李肖蓉 李库林 郑杰 更多>> 相关机构: 南京医科大学 山东省医学科学院 无锡市人民医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏省自然科学基金 江苏省医学重点人才培养基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 轻工技术与工程 更多>>
糖尿病对冠状动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道的影响 被引量:18 2010年 目的 探讨糖尿病对冠状动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道(BK通道)的影响变化,阐明糖尿病冠状动脉损伤的分子机制.方法 采用链脲霉素腹腔内注射建立大鼠糖尿病动物模型,酶消化法分离冠状动脉平滑肌细胞,全细胞膜片钳实验技术和Western blot分别记录和测定正常和糖尿病大鼠冠状动脉平滑肌细胞BK通道电流和亚基的表达;采用荧光测定方法测定正常和糖尿病大鼠冠状动脉平滑肌细胞内钙离子浓度.结果 当刺激电压>100 mV时,糖尿病冠状动脉平滑肌细胞BK通道电流密度明显低于正常冠状动脉平滑肌细胞BK通道电流密度(P<0.05),在刺激电压为150 mV时,电流密度分别为(275±40)pA/pF(n=8)和(70±10)pA/pF(n=6);与正常组比较,糖尿病组BK通道α亚基蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05),但β1亚基蛋白表达较低(P<0.05);正常组和糖尿病组冠状动脉平滑肌细胞内钙离于浓度分别为(92±7)nmol/L(n=5)和(151±18)nmol/L(n=6),差异有统计学意义(P<0.05).结论 糖尿病冠状动脉平滑肌细胞BK通道β1亚基表达下调、BK通道电流密度下降及细胞内钙离子浓度升高可能是糖尿病冠状动脉功能损伤的重要原因. 王如兴 李肖蓉 羊镇宇 郑杰 李库林 张常莹 郭素峡 孙莉萍 陆彤关键词:糖尿病 冠状血管 糖尿病大鼠冠状动脉平滑肌细胞中大电导钙离子激活钾通道电流和钙离子浓度变化 被引量:2 2012年 目的探讨糖尿病大鼠冠状动脉平滑肌细胞中大电导钙离子激活钾通道(BK通道)电流及钙离子浓度的变化。方法 40只SD大鼠随机均分为正常对照组(A组)和糖尿病组(B组)。采用链脲霉素腹腔内注射建立糖尿病大鼠模型,酶消化法分离冠状动脉平滑肌细胞,全细胞膜片钳实验和荧光测定方法分别检测冠状动脉平滑肌细胞BK通道电流和钙离子浓度。结果与A组相比,当刺激电压大于60mV时,B组冠状动脉平滑肌细胞BK通道电流密度明显下降(P<0.05);A组冠状动脉平滑肌细胞内钙离子浓度明显低于B组[(103±23)nmol/L vs.(193±22)nmol/L](P<0.05)。结论冠状动脉平滑肌细胞中BK通道电流下降及细胞内钙离子浓度升高可能是糖尿病冠状动脉功能损伤的重要原因。 吴莹 王如兴 郑杰 李库林 张常莹 郭素峡 刘晓宇 李肖蓉关键词:糖尿病 二十二碳六烯酸对糖尿病大鼠冠状动脉平滑肌细胞BK通道开放概率的影响 被引量:2 2015年 目的:探讨二十二碳六烯酸(DHA)对糖尿病大鼠冠状动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道(BK通道)开放概率(NP0)的影响。方法选取体重(200±20)g,年龄6-8周的雄性SD大鼠20只为研究对象,采用随机数字表法分为糖尿病组(10只)和正常对照组(10只)。糖尿病组采用链脲霉素腹腔内注射,2周后测定大鼠血糖浓度,如血糖浓度低于300 mg/dl,则用等剂量链脲霉素再次腹腔内注射,当血糖浓度持续8周高于300 mg/dl视为造模成功。正常对照组大鼠腹腔内注射生理盐水。酶消化法急性分离正常和糖尿病大鼠冠状动脉平滑肌细胞,单通道膜片钳实验技术记录正常和糖尿病大鼠冠状动脉平滑肌细胞BK通道电流并比较不同浓度DHA作用下正常和糖尿病大鼠冠状动脉平滑肌细胞BK通道NP0。两两比较采用t检验,组间比较采用单因素方差分析。结果当刺激电压为0、20、40、60、80、100、120 mV时,随着刺激电压增加,正常对照组和糖尿病组BK通道NP0均增加(F=15.28、9.72,均P〈0.05)。与正常对照组相比,当刺激电压〉60 mV后,糖尿病组BK通道NP0明显降低(分别为0.56±0.05比0.22±0.02,1.11±0.09比0.33±0.09,2.85±0.10比0.86±0.12,3.05±0.15比1.01±0.13, t=3.62、4.27、6.32、8.14,均P〈0.05)。在刺激电压60 mV和钙离子浓度1mmol/L条件下,当电极外液DHA浓度为0、0.01、0.10、0.30、1.00mmol/L时,正常对照组和糖尿病组BK通道NP0均无明显增加(F=3.01、2.61,均P〉0.05);继续增加DHA的浓度,当DHA浓度为3、5、10mmol/L时,对照组BK通道NP0呈浓度依赖性增加,糖尿病组NP0呈浓度依赖性增加(F=10.21、7.32,均P〈0.05)。在DHA浓度相同情况下,糖尿病组BK通道NP0均低于对照组(t=2.71-8.54,均P〈0.05)。结论糖尿病大鼠冠状动脉平滑肌细胞BK通道功能受损,但DHA仍可激活BK通道,增加NP0,从而扩张冠状动脉而� 季圆 王如兴 钱玲玲 党时鹏 吴莹 王萌 徐凤 王湘芸 汤徐 孙曼青 李肖蓉关键词:二十二碳六烯酸 糖尿病 冠状动脉 膜片钳 心脏钠离子通道基因SCN5A与扩张型心肌病 被引量:3 2011年 扩张型心肌病(dilated cardiomyopathy,DCM)以无特定原因的心腔[左心室和(或)右心室]扩大、心肌收缩功能障碍为主要特征,发病率为(5~10)/10万。Karkkainen和Peuhkufinen^[1]报道至少30%~50%的特发性DCM患者与家族(遗传性)因素有关。业已发现30个基因的突变与DCM发病有关,其中电压门控型(VGSC)钠通道基因(SCN5A)是DCM的重要致病基因之一。 孙莉萍 王如兴关键词:扩张型心肌病 收缩功能障碍 钠通道基因 DCM 致病基因 电压门控 大电导钙激活钾通道在缺血再灌注损伤中的作用及其机制 被引量:2 2016年 缺血再灌注损伤(ischemia repeffusion injury,IRI)指经过一定时间缺血的组织器官再恢复血液灌注后其代谢、功能及结构的损伤反而加重,甚至出现不可逆性损伤的现象”一。IRI发生较为常见,在心肌梗死、脑梗死、肺和肾等移植手术后均可发生,因此研究IRI的病理生理及其发生机制具有重大临床意义。 夏大云 钱玲玲 王如兴关键词:缺血再灌注损伤 大电导钙激活钾通道 血液灌注 组织器官 不可逆性 心肌梗死 非持续性室性心动过速诊疗进展 被引量:1 2014年 非持续性室性心动过速(nonsustained ventricular tachycardia,NSVT)在健康个体和心脏病患者均可发生.无心脏病NSVT患者的预后尚不明确.在运动时,尤其是运动后恢复,检测到NSVT,预示几十年内心血管死亡率增加.经常训练的运动员,若停止训练,NSVT的预后一般良好.非ST段抬高急性冠脉综合征患者住院48 h后发作的NSVT,特别是缺血发作时出现,心脏性猝死风险增加.急性心肌梗死患者住院13~24 h后发生NSVT提示预后不良.接受再灌注治疗并服用β阻滞剂的心肌梗死患者,以左心室射血分数等因素进行多变量分析发现NSVT不是预测远期死亡率的独立因子.NSVT对肥厚型心肌病及大多数离子通道病患者具有预后判断价值,但对缺血性心力衰竭和扩张型心肌病的预后价值不明.治疗NSVT的重点是治疗基础心脏病. 高运来 王如兴关键词:室性心动过速 心脏病 心肌病 猝死 微小RNA-200家族对糖尿病及其并发症的影响 2015年 糖尿病并发症可引起人体心、脑和肾等重要组织和器官损害,严重危害人类健康,但其发病机制并不十分清楚。近年研究发现微小RNA(microRNA,miRNA)在糖尿病及其并发症的发生发展中起重要作用。miRNA是真核生物中一类长度约22~25个核苷酸的内源性非编码小分子RNA,通过转录后机制调控其下游靶基因的表达,进而影响疾病的病理生理学过程。其中miRNA-200(miR-200)家族对糖尿病及其并发症的调控研究较多。miR-200家族不仅对胰岛素相关信号通路具有调控作用,在糖尿病微血管及大血管并发症中也发挥重要调控作用。因此,探讨miR-200家族与糖尿病及其并发症之间的关系,可为糖尿病及其并发症的诊断及治疗提供新的思路。 钱玲玲 徐凤 王如兴关键词:微小RNA 糖尿病 并发症 糖尿病冠状动脉平滑肌细胞大电导钙离子激活钾通道开放概率及蛋白表达的变化 被引量:6 2013年 目的研究糖尿病对冠状动脉平滑肌细胞大电导钙离子激活钾通道(BK通道)开放概率(NP0)及蛋白表达的影响,探讨糖尿病冠状动脉损伤的分子机制。方法采用链脲霉素腹腔内注射建立糖尿病大鼠动物模型,成功建立20只糖尿病大鼠动物模型作为糖尿病组;对照组(n=20)相应注射生理盐水。酶消化法分离冠状动脉平滑肌细胞,单通道膜片钳实验技术记录大鼠冠状动脉平滑肌细胞BK通道电流;采用Western blot实验方法测定大鼠冠状动脉平滑肌细胞BK通道亚基的蛋白表达。结果在电极外液钙离子浓度为1μmol/L,刺激电位为0,20,40,60,80,100和120 mV条件下,糖尿病组冠状动脉平滑肌细胞BK通道NP0明显低于对照组(P<0.05)。如刺激电位为120 mV时,对照组和糖尿病组大鼠冠状动脉平滑肌细胞BK通道NP0分别为1.210 5±0.048 1(n=5)和0.5217±0.1346(n=5);与对照组比较,糖尿病组BK通道α亚基蛋白表达无差异(P>0.05),但β1亚基蛋白表达下降了63%(P<0.05)。结论糖尿病冠状动脉平滑肌细胞BK通道β1亚基表达下调、BK通道NP0降低可能是糖尿病冠状动脉功能损伤的重要原因。 吴莹 王如兴 李肖蓉 季圆 郁志明 李库林 郑杰 张常莹 刘晓宇关键词:心血管病学 Β1亚基 冠状动脉 糖尿病 腺苷三磷酸对冠状动脉平滑肌细胞BK通道的激活作用及其机制 被引量:2 2015年 目的探讨腺苷三磷酸(ATP)对冠状动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道(BK通道)的激活作用及其机制。方法采用酶消化法急性分离正常大鼠冠状动脉平滑肌细胞;膜片钳实验技术记录全细胞状态下BK通道电流;钙离子成像技术记录ATP对细胞内钙离子浓度影响。结果膜片钳实验结果显示,加入1mmol/LATP前后,BK通道电流密度分别为(137±13)pA/pF和(179±15)pA/pF(P〈0.05);钙离子成像结果显示,加入0.5mmol/LATP前后,细胞内钙离子浓度荧光信号强度比值分别为2.46±0.08和4.04±0.21(P〈0.05)。分别采用嘌呤(P2Y1)受体阻滞剂MRS2179、磷脂酶C(PLC)受体阻滞剂1373122和三磷酸肌醇(IP3)受体阻滞剂2-APB孵育冠状动脉平滑肌细胞,再测定加入0.5mmol/LATP后3组细胞内钙离子浓度荧光信号强度比值,分别是2.70±0.06、2.65±0.12和2.69±0.13,与未加入3种阻滞剂相比,钙离子浓度荧光信号强度比值均明显降低(P〈0.05)。结论ATP可以通过P2Y1.PLC—IP3通路升高细胞内钙离子浓度,从而激活BK通道。 王湘芸 吴莹 钱玲玲 党时鹏 季圆 徐凤 王萌 汤徐 姚勇 王如兴关键词:腺苷三磷酸 大电导钙激活钾通道 钙离子 冠状动脉 平滑肌细胞 Role of BKCa channels in diabetic vascular complications 被引量:12 2014年 Objective This review focuses on the role of the large conductance calcium-activated potassium (BKCa) channels in diabetic vascular complications.Data sources Relevant articles published in English or Chinese from 1981 to present were selected from PubMed.The search terms were "BKCa channels" and "diabetes".Important references from selected articles were also retrieved.Study selection Articles regarding the role of BKCa channels in diabetic vascular complications and relevant mechanisms were selected.Results The BKCa channels are abundantly expressed in vascular smooth cells and play an important role in regulation of vascular tone.Multiple studies indicated that the expression and function of BKCa channels are altered by different mechanisms in diabetic vascular diseases such as coronary arterial disease,cerebral arterial disease,and diabetic retinopathy.Conclusion BKCa channels may play an important role in diabetic vascular complications and may be an effective therapeutic target for relieving and reducing the burden of diabetic vascular complications. Qian Lingling Liu Xiaoyu Wang Ruxing