天津市高等学校科技发展基金计划项目(20110106)
- 作品数：5 被引量：8H指数：1
- 相关作者：宋君秋尚曼刘艳霞刘超张琦更多>>
- 相关机构：天津医科大学更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金天津市高等学校科技发展基金计划项目国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 心肌缺血预适应循环血中微囊泡对大鼠心肌I/R损伤的作用被引量：8
- 2016年
- 目的:研究心肌缺血预适应(IPC)大鼠循环血中微囊泡(MVs)对大鼠在体心肌缺血/再灌注(I/R)损伤的作用及相关机制。方法:反复短暂结扎/松开大鼠冠状动脉左前降支建立大鼠IPC模型,自腹主动脉取血,超速离心法分离循环血中的IPC-MVs,并对其进行流式鉴定。建立在体大鼠心肌I/R模型,股静脉注射IPC-MVs 7mg/kg。HE染色观察心肌形态学变化,TTC染色检测心肌梗死范围,TUNEL染色检测心肌细胞凋亡率。比色法测定血清乳酸脱氢酶(LDH)活力,分光光度法测定心肌组织caspase 3活力,Western blot法检测心肌组织Bcl-2、Bax蛋白表达水平。结果:流式细胞术检测IPC-MVs浓度为4380±745个/μl。与I/R组比较,IPC-MVs能够减轻I/R大鼠心肌组织损伤,缩小心肌梗死范围(P<0.01),减少心肌细胞凋亡数量(P<0.01),明显降低血清LDH活力(P<0.01),降低心肌组织caspase 3活力(P<0.01),升高Bcl-2蛋白表达(P<0.01),降低Bax蛋白表达(P<0.01),升高Bcl-2/Bax比值(P<0.01)。结论:IPC-MVs显著减轻大鼠在体心肌I/R损伤,通过上调心肌组织中Bcl-2的蛋白表达,下调Bax的蛋白表达,升高Bcl-2/Bax比值,降低caspase 3活力而发挥心肌保护作用。
- 王艺璐刘淼尚曼王瑶张琦王少勋韦苏张琨玮刘超吴艳娜宋君秋刘艳霞
- 关键词：心肌缺血预适应
- TSE-MVs诱导脂肪细胞炎症反应及抑制胰岛素信号通路的相关机制研究
- 研究目的:烟草危害是当今世界最严重的公共危害之一。越来越多的科学研究证实,吸烟与糖耐量异常、胰岛素抵抗、血脂紊乱以及脂肪分布异常等密切相关,是代谢综合征的主要危险因素。微囊泡(Microvesicles,MVs),作为在...
- 陈艳
- 关键词：高迁移率族蛋白1单核细胞趋化因子
- 文献传递
- 大鼠循环血中血小板和内皮细胞来源微囊泡的检测
- 2014年
- 目的建立流式细胞术对大鼠循环血中细胞微囊泡(MVs)的检测方法,并测定心肌缺血预适应(IPC)处理大鼠循环血中血小板来源的MVs(PMVs)及内皮细胞来源的MVs(EMVs)。方法大鼠经腹主动脉取血,枸橼酸钠抗凝,室温下经两步离心获得无血小板血浆(PFP)。PFP中分别加入FITC标记的血小板表面标志物CD61单抗或PE标记的内皮细胞表面标志物CD144单抗,采用1μm标准微球做粒径对照,2μm标准微球用于计数,流式细胞仪进行检测。结果 3.5%枸橼酸钠与血液按体积比1∶4混匀,离心后可得均匀、清亮的上清。PFP中1μm以下粒子信号占全部信号的99%以上。PMVs和EMVs分别为CD61阳性和CD144阳性的粒子,直径均小于1μm。IPC处理大鼠循环血中PMVs、EMVs水平分别为(4 053±1 987)个/μL、(4 870±825)个/μL。结论成功建立和优化了流式细胞术测定大鼠循环血中MVs的方法,并通过对IPC处理大鼠循环血中PMVs和EMVs的测定对MVs的检测方法进行了验证。
- 张梦晓尚曼张琦王瑶吴艳娜宋君秋刘艳霞
- 关键词：血小板缺血预适应
- 缺氧预适应诱导人脐静脉内皮细胞释放的微囊泡对正常H9c2细胞的作用
- 2018年
- 目的:分离提取缺氧预适应(HPC)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)分泌的微囊泡(MVs),探讨HPC-EMVs对正常H9c2心肌细胞的作用和其Caspase 3、Bcl-2和Bax表达的影响。方法:采用HPC方法诱导HUVECs释放MVs,将其和正常培养的大鼠H9c2心肌细胞孵育,通过MTT法检测细胞存活率和比色法测定细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性;通过Hoechst 33258染色观察细胞核的形态变化;比色法测定培养液中Caspase 3活性以及Western blot法检测H9c2细胞中Bcl-2和Bax的表达。结果:HPC模型构建过程中,与缺氧/复氧(H/R)组相比,HPC组细胞存活率显著升高(P<0.01),即成功构建HUVECs的HPC模型;HPC-EMVs处理H9c2细胞结果发现,与对照组H9c2细胞相比,HPC-EMVs 30、60μg/m L组细胞存活率显著降低(P<0.001),且LDH活性和Caspase 3活性显著升高(P<0.01或P<0.001),凋亡细胞量增加,Bcl-2/Bax比值显著降低(P<0.001)。结论:成功采用HPC的方法诱导HUVECs释放MVs,HPC-EMVs通过影响正常H9c2细胞Caspase 3、Bcl-2和Bax蛋白的表达发挥促凋亡作用。
- 刘超韦苏张琨玮祝倩李烨仪荣玉美赵俊玉李无为尚曼宋君秋吴燕娜刘艳霞
- 关键词：缺氧预适应H9C2细胞
- 黄芪苷Ⅳ对微囊泡损伤的大鼠胸主动脉环舒张功能的保护作用
- 2018年
- 目的:以缺氧/复氧诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)释放的微囊泡(H/R-EMVs)处理大鼠胸主动脉环,造成其舒张功能损伤,探究黄芪苷Ⅳ(AST)对大鼠胸主动脉环舒张功能的影响及相关机制。方法:采用缺氧12h/复氧4 h的方法诱导体外培养的HUVECs产生MVs,H/R-EMVs保存于D-Hank’s液中备用。雄性Wistar大鼠开胸取出胸主动脉,制备3~4 mm宽、内皮完整的胸主动脉环。实验分为6组:H/R-EMVs组,在孵育胸主动脉环的培养基中加入H/R-EMVs,使其终浓度为10μg/ml;不同剂量AST组分别采用10、20、40、60 mg/L AST与10μg/ml H/R-EMVs共同孵育胸主动脉环;对照组给予等体积的D-Hank’s溶液。孵育时间为4 h,每组各测定5个血管环。观察AST对舒张功能的影响,检测一氧化氮(NO)含量及t-eNOS、p-eNOS、t-Akt、p-Akt、ERK1/2和p-ERK1/2蛋白质水平。结果:H/R-EMVs对大鼠胸主动脉环舒张功能有明显的抑制作用(P<0.01)。与H/R-EMVs组相比,AST20、40和60 mg/L组剂量依赖性地提高大鼠胸主动脉环的舒张率(P<0.01),使NO含量增加(P<0.05,P<0.01);t-eNOS、t-Akt和ERK1/2蛋白质水平不变,p-eNOS、p-Akt和p-ERK1/2蛋白质水平增高(P<0.01)。结论:AST可显著改善H/R-EMVs损伤的大鼠胸主动脉环的舒张功能,其机制与提高NO含量及增加p-eNOS、p-Akt和pERK1/2蛋白质水平有关。
- 李烨仪尚曼张琨玮韦苏刘超祝倩赵俊玉吴艳娜宋君秋刘艳霞
- 关键词：人脐静脉内皮细胞胸主动脉环
- 心肌缺血预适应大鼠循环血微囊泡中miRNAs表达谱分析
- 2022年
- 目的:分离提取心肌缺血预适应(IPC)模型大鼠循环血中的细胞微囊泡(MVs),探究IPC处理对循环血MVs中microRNAs(miRNAs)表达的影响。方法:健康雄性Wistar大鼠8只,随机分为IPC-MVs组和假手术对照(Sham-MVs)组,每组4只。建立大鼠心肌IPC模型,提取循环血IPC-MVs,采用Microarray分析两组循环血MVs中的miRNAs,利用生物信息学进行靶基因预测及功能分析。结果:与Sham-MVs组比较,IPC-MVs组中循环血差异表达显著上调的miRNAs共3个(P<0.01,FER<0.05):miR-1-3p、miR-133a-3p和miR-133b-3p(t=3.194、3.002、3.389,均P<0.05)。基因本体研究会数据库(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析显示,这些miRNAs可能通过调节心肌细胞中丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路和Ras信号通路,发挥抗心肌缺血/再灌注(I/R)损伤的保护作用,可能参与调控的核心靶基因包括Ntrk2、Igf1、Gnai3和Bcl2l1。结论:IPC处理可使大鼠循环血MVs中miR-1-3p、miR-133a-3p和miR-133b-3p表达显著上调。
- 赵俊玉祝倩尚曼李烨仪刘淼王艺璐吴艳娜刘艳霞宋君秋
- 关键词：缺血预适应MIRNAS
