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排序方式：

优化的VHb基因和GFMcryIA基因构建的双价基因在烟草中的表达被引量：3: 2006年; 利用人工合成的、密码子优化后的透明颤菌血红蛋白(VHb)基因与人工合成的GFMcryIA基因构建成双价基因植物高效表达载体。通过根癌农杆菌介导转化烟草,获得了36株卡那霉素抗性植株。经转基因植株的PCR及Southernblot检测,证实了双价基因在35株烟草基因组中的整合。Westernblot检测证实了VHb基因的表达,杀虫实验证实GFMcryIA基因也表达出活性毒蛋白。且转基因烟草平均每株干重比非转基因烟草植株高7%。本研究结果表明转基因育种技术在培育出既高产又具抗虫性的作物或经济作物新品种方面具有良好的应用前景。; 王友如崔洪志郭三堆; 关键词：双价基因烟草抗虫性活性蛋白

草甘膦诱导表达的大豆与棉花EST序列的分离被引量：1: 2005年; 利用差异显示PCR方法分离了63个草甘膦诱导后在大豆和棉花中差异表达的片段,测序分析结果表明属于33个草甘膦诱导的大豆和棉花EST序列。通过在GenBank中进一步比时研究发现:约85%的EST序列与水杨酸、冷、创伤、氧化等非生物胁迫诱导后表达库中的EST序列有高达95%以上的同源性,由此可推测这些基因参与了植物对非生物胁迫的反应过程。草甘膦诱导后高表达EST、序列的获得将有利于进一步分离相关非生物胁迫诱导表达基因及启动子,研究其转录调控的机理,有望建立草甘膦诱导系统。从而解决组成型表达造成外源基因在植物体所有发育阶段和所有组织部位表达,造成植物体能量浪费。; 尉万聪张锐郭三堆; 关键词：EST序列草甘膦棉花大豆 GENBANK 组成型表达

一个棉花生殖器官优势表达基因的启动子功能分析被引量：6: 2005年; 用棉花生殖器官优势表达启动子替代CaMV35S启动子是解决目前转基因抗虫棉存在“前期抗虫性强,后期抗虫性弱”这一生产实践问题的关键.运用反向PCR技术从陆地棉中分离到一个棉花生殖器官优势表达基因——腺苷酸核糖基化作用因子-1(Arf1)基因的启动子序列.该启动子具有独特的结构特征,不仅同时包含有转录起始子(initiator),TATA box,CAAT box和GC box这四种特异元件,而且还包含有一个5’非翻译区的内含子.通过构建四个启动子缺失突变体, 定向替换植物表达载体pBI121上的CaMV35S启动子,并与GUS基因融合,构建了4个植物表达载体.用花粉管通道技术将它们导入到棉花中,转基因棉花后代的GUS染色和荧光定量分析结果表明:Arf1启动子是一个典型的棉花生殖器官优势表达启动子,它为棉花生殖器官性状的分子设计和抗虫棉的再创新提供了有用的工具.; 任茂智陈全家李丽张锐郭三堆; 关键词：棉花生殖器官抗虫性 GUS基因花粉管通道技术 MV

胆固醇氧化酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量：3: 2003年; 采用PCR方法从来源于蒙古野驴的马红球菌(Rhodococcus equi)4-2G2菌株中分离出编码胆固醇氧化酶的新基因(choEW),其与已知的胆固醇氧化酶基因choE和choB同源性均达99％;按其推断的氨基酸序列与choE和choB相比在485位缺少一个氨基酸,分析认为choEW与choB和choE属于同一基因家族。将choEW插入到原核表达载体pET-His中,构建出重组质粒pETW,并转化Escherichia coli BL21(DE3)plysS获得工程菌。经IPTG诱导后表达出分子量约为56 kD的蛋白质,与核苷酸序列推断的蛋白大小相符。目的蛋白表达量约占细胞总蛋白的11.9％。; 银国利张锐郭三堆陈毓荃牛天贵; 关键词：克隆大肠杆菌

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国家高技术研究发展计划(2001AA222101)