国家自然科学基金(30960160)
- 作品数:2 被引量:9H指数:1
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- 发文基金:国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项海南省自然科学基金更多>>
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- 巴西橡胶树法尼基焦磷酸合酶基因5'调控序列的克隆及功能初步鉴定被引量:8
- 2010年
- 法尼基焦磷酸合酶是异戊二烯生物合成途径中的一个关键酶,根据NCBI数据库中巴西橡胶树法尼基焦磷酸合酶基因HbFPS序列设计引物,克隆了HbFPS起始密码子上游1066bp的5'调控序列。序列分析表明,该序列A/T含量为77.39%,含有典型的真核生物核心启动子区域,在该序列中发现了一些与真核生物典型的顺式调控元件相似的TATA-box、增强子元件、CAAT-box和GATA-box以及一些与激素、胁迫诱导、转录因子相关的顺式作用元件。构建了含有该序列的植物表达载体并转化烟草,对获得的转基因烟草T0代植株GUS染色发现转基因植株呈现蓝色,表明HbFPS的5'调控序列可以驱动GUS基因的表达,具有启动子的活性。
- 郭冬李辉亮彭世清
- 关键词:巴西橡胶树顺式作用元件
- 巴西橡胶树小橡胶粒子蛋白基因5'调控序列的克隆及功能初步鉴定被引量:1
- 2010年
- 在橡胶树中小橡胶粒子蛋白是催化和调控天然橡胶生物合成的重要蛋白因子。根据小橡胶粒子蛋白基因(HbSRPP)的mRNA序列(GenBank登陆号:AF051317)设计引物,利用Genome Walking方法克隆了HbSRPP起始密码子上游1159bp的5′调控序列。序列分析表明,该序列A/T含量为68.25%,含有典型的真核生物核心启动子区域(-141bp-99bp),一些与真核生物典型的顺式调控元件相似的TATA-box、增强子元件、CAAT-box、GATA-box也存在序列中,此外还发现一些与激素、转录因子、光调节和胁迫诱导相关的顺式作用元件。构建了含有该序列的植物表达载体并转化烟草,通过PCR和GUS染色对转化植株进行了鉴定。对获得的转基因烟草T0代植株GUS染色发现,在转基因植株的茎、叶和根呈现蓝色,表明HbSRPP的5′调控序列可以启动GUS基因的表达,具有启动子的活性。
- 郭冬李辉亮彭世清
- 关键词:巴西橡胶树顺式作用元件