国家自然科学基金(31271936)
- 作品数：4 被引量：18H指数：3
- 相关作者：陆兆新吕凤霞别小妹贾锐张充更多>>
- 相关机构：南京农业大学徐州工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金徐州市科技计划项目河北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学更多>>
- 广谱抗菌芽孢杆菌的筛选及其抗酵母物质的纯化和鉴定被引量：6
- 2017年
- 从不同来源的2种野生蜂蜜中筛选出一株产广谱抗菌活性物质的芽孢杆菌LZ-5,其发酵产物对短小芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、酿酒酵母及米曲霉等多种食品腐败微生物均有抑制作用。通过形态观察、生理生化实验、16S r DNA分析等手段初步确定LZ-5在细菌发育分类学上属于淀粉液化芽孢杆菌。利用有机溶剂萃取、Sephdex LH-20凝胶柱层析、高效液相色谱等方法对其发酵产物中对酵母菌有抑菌活性的物质进行分离纯化,利用液相色谱-质谱法测定分子质量,并与标准品进行比较,初步确定该物质为iturin A2、iturin A3和iturin A6的混合物。
- 石举然别小妹吕凤霞陆兆新
- 关键词：解淀粉芽孢杆菌抗菌物质
- 启动子P_(43)表达关键酶基因对subtilosin A合成的调控作用被引量：1
- 2013年
- 为提高枯草芽孢杆菌168(Bacillus subtilis 168)细菌素subtilosin A的产量使其能够应用到食品防腐、医药卫生等行业。采用重叠延伸PCR将强启动子P43分别和subtilosin A合成酶基因簇中关键酶基因sbo-albA、albB-albC连接到一起,构建了高表达载体。采用改进的电击法将重组载体转化到Bacillus subtilis 168中,通过高效液相色谱(HPLC)检测,确定subtilosin A产量得到了提高,进一步通过抑菌实验证明其抑菌活性也获得了提高。该方法为提高subtilosin A产量,进而应用到生产实践中提供了理论参考。
- 孙会刚张充吕凤霞别小妹陆兆新
- 关键词：启动子关键酶
- 基因改组选育高产杆菌肽地衣芽孢杆菌及改组菌株差异分析被引量：5
- 2016年
- 为了提高地衣芽孢杆菌肽产量,采用全基因组改组技术进行菌株选育。以地衣芽孢杆菌TJ12为原始菌株,通过紫外诱变、亚硝基胍诱变、常压室温等离子体诱变构建了TJ12菌的突变体库。在优化其原生质体制备和再生条件的基础上,以其中4株诱变菌株(U11、U23、H1、L71)作为亲本,采用聚乙二醇介导的方法进行3轮多亲本的全基因组改组,同时,结合双亲灭活的筛选方法,最终选出1株杆菌肽产量提高并能稳定遗传的优良菌株F3,对其摇瓶发酵36 h,杆菌肽A产量达760 mg/L,为野生菌株TJ12的1.7倍。与野生菌株TJ12相比,改组菌株提前进入生长稳定期,两者发酵过程pH值几乎无差异;最终改组菌生长量虽低于野生菌,但菌株单位细胞还原糖产量及杆菌肽产量都高于野生菌株;其合成基因和调控基因表达量相对野生菌株都上调,其中合成基因上调幅度较大。推测改组菌株自身有了更强大的杆菌肽耐受机制,且合成基因相关部位可能发生了改变。
- 贾锐张充吕凤霞别小妹赵海珍陆兆新
- 关键词：地衣芽孢杆菌基因组改组诱变原生质体
- 原桃胶中1株芽孢杆菌的分离鉴定及其主要抗菌物质被引量：6
- 2016年
- 从天然原桃胶分离到1株产抑菌活性物质的芽孢杆菌TJ12。其发酵产物对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、藤黄微球菌(Micrococcus luteus)、蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)和串珠镰刀菌(Fusarium moniliforme)有抑菌活性。结合菌落形态、生理生化指标、16S rRNA序列和gyr B序列将TJ12菌株鉴定为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)。通过硫铵沉淀、有机溶剂萃取、羟丙基葡聚糖凝胶、高效液相色谱分离纯化,得到其主要活性物质。该物质对pH值、温度和3种蛋白酶(胰蛋白酶、蛋白酶K、胃蛋白酶)有较好的稳定性。经电喷雾电离质谱分析,初步鉴定该株地衣芽孢杆菌TJ12的主要抗菌物质为杆菌肽A。
- 贾锐陆兆新
- 关键词：地衣芽孢杆菌抗菌物质分离纯化
