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脑缺血再灌注损伤后小分子RNA的分析被引量：4: 2011年; 目的检测假手术和脑缺血再灌注大鼠脑组织小分子RNA的差异表达。方法选取假手术组(F)和脑缺血再灌注组(B)大鼠海马脑组织,提取小分子RNA,应用Solexa高通量测序技术进行深度测序,通过信息分析获得miRNA的表达情况。结果 F组和B组分别获得6 833 331和6 407 399个序列,平均长度均为22 nt。将原始数据与mjRbase、Genbank和Rfam(9.1)数据库进行比对和分类注释。在F组和B组,miRNA总数分别占小分子RNA总数的76.77%和75.22%,两组间共有32种差异表达的mjRNA,预测出新的候选miRNA 130条。结论 Solexa测序是一种快速、全面地研究和发现小分子RNA的重要手段,筛选出的差异表达及候选miRNA可能参与脑缺血再灌注的发展。; 高蕊甘尚权; 关键词：高通量测序脑缺血再灌注小分子RNA

脂质体及电穿孔法对大鼠雪旺细胞转染效率的比较与分析被引量：3: 2013年; 目的对比脂质体与电穿孔法及不同载体对大鼠雪旺细胞的转染效率,为进一步研究神经胶质细胞奠定实验基础。方法以大鼠雪旺细胞为研究对象,采用脂质体法和电穿孔法分别转染绿色荧光蛋白(GFP)载体和羧基荧光素(FAM)标记的miRNA mimics,比较和分析两者的转染效率。结果脂质体转染法成功转染GFP质粒大鼠雪旺细胞的效率为(15.6±2.3)%,转染miRNA mimics的效率为(36.8±3.5)%;采用电穿孔法转染GFP质粒的效率高达(40.6±3.3)%,而该法转染miRNA mimics的效率则非常低。结论大鼠雪旺细胞的转染效率可能与转染方式、被转染物的大小和形式有关。; 菅辉玲黄瑾程江高蕊; 关键词：电穿孔法脂质体转染法

大鼠脑缺血再灌注损伤后脑皮层神经突起生长素(neuritin)表达变化的研究被引量：5: 2012年; 本研究旨在探讨大鼠短暂性脑缺血损伤后不同时间点脑皮层中神经突起生长因子(neuritin)表达的变化规律,为研究neuritin在神经修复中的作用奠定基础数据。采用夹闭双侧颈总动脉的方法制作TGI大鼠模型,按伤后不同时间分为3、7、14、21d组,用免疫印迹及定量PCR的方法检测大鼠脑皮层neuritin蛋白质及mRNA的表达,并分析其表达变化特点。免疫印迹结果显示:3d、21d实验组皮层neuritin的表达与对照组相比无明显变化;7d和14d实验组Neuritin蛋白表达量,显著高于3、21d和对照组。Neuritin mRNA定量PCR结果表明:与对照组相比,各实验组无明显变化。基于Neuritin mRNA和蛋白质的表达特点,推测可能通过某种转录后调控机制调控Neuritin蛋白表达的变化。TGI后,机体启动神经修复机制,Neuritin蛋白表达迅速升高,并维持两周较高水平的表达。当修复完成后Neuritin又恢复到正常水平。这种变化规律提示neuritin在神经损伤中可能具有重要的修复作用。; 聂琨黄瑾高蕊

大鼠Neuritin mRNA鉴定、编码序列及蛋白结构分析: 2015年; 为探讨一种新型的神经营养因子,Neuritin在神经系统成熟及其损伤后的再生修复过程中发挥着重要的调节作用。为了获得大鼠Neuritin基因转录本及其蛋白结构的基础数据,本研究利用比较基因组学分别设计与小鼠2个转录本同源的引物,采用RT-PCR的方法钓取大鼠Neuritin基因。采用生物信息的方法对大鼠Neuritin的序列同源性及蛋白结构进行全方位分析。结果表明,大鼠只存在一个Neuritin转录本,编码142个氨基酸,与其他动物的编码序列高度同源;三级蛋白结构分析结果显示大鼠Neuritin蛋白富含有α螺旋,其结构和理化性质无异于人类Neuritin基因。由此可知,本研究首次厘定了大鼠Neuritin mRNA,其蛋白质结构的深入分析也为进一步理解大鼠Neuritin基因的生理功能奠定了基础数据。; 廖新华苟永慧黄瑾杨磊高蕊; 关键词：神经营养因子转录本蛋白结构

大鼠Nrn1基因3’UTR克隆及序列分析被引量：2: 2012年; 目的 neuritin(Nrn1/Cpg15)是一种神经突起生长因子,在神经修复过程中发挥着重要作用。本文旨在探讨miRNAs调控Nrn1基因表达的潜在性。方法采用PCR技术克隆大鼠Nrn1基因的3’UTR片段,同时利用MiRanda、DNAMAN软件对Nrn1基因序列及miRNA结合位点进行生物信息学分析。结果成功克隆了649bp的Nrn1 3’UTR核心区段;Nrn1基因在不同物种间的序列同源性呈高度保守。MiRanda靶标预测结果表明miR-204在3’UTR结合位点处高度保守,分值和能值较高,具有很强的潜在性。结论 Nrn1基因3’UTR在不同物种间序列保守性较高,miRanda软件预测miR-204结合位点处序列高度保守,进一步暗示Nrn1基因表达可能受到miR-204的调控。; 菅辉玲程江黄瑾高蕊; 关键词：序列同源性

全脑短暂性缺血后大鼠海马组织神经营养因子的时序性表达被引量：1: 2013年; 探讨大鼠脑短暂性缺血后内源性神经营养因子NGF、BDNF和NT-3在海马组织中的变化规律,为神经损伤的修复治疗提供参考数据。本研究采用夹闭双侧颈总动脉的方法制作TGI大鼠模型,将大鼠随机分为术后3、7、14、21d以及假手术组5组,采用RT-PCR法检测大鼠海马组织中NGF、BDNF和NT-3mRNA表达水平的变化。研究结果表明3种神经营养因子在全脑短暂性缺血海马组织中出现表达下降趋势,其中以NGF mRNA的表达量下降最为显著(P<0.01)且具有快速恢复趋势,到损伤后21dNGF已上升至伤后3d水平。结果显示,这种变化规律提示短暂性脑缺血后3种神经营养因子表达水平的下降加剧了缺血再灌注对神经元的损害,其中NGF可能是脑缺血后发挥神经损伤修复的主要因子,有助于神经损伤的修复作用。; 高蕊菅辉玲聂琨黄瑾; 关键词：神经营养因子时序性表达海马

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国家自然科学基金(30960173)