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江苏省农业三新工程项目(SX-2011-051)
作品数:
1
被引量:3
H指数:1
相关作者:
杨青
徐健
李传明
刘琴
赵松
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相关机构:
中国科学院
江苏省血吸虫病防治研究所
江苏里下河地区农业科学研究所
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发文基金:
江苏省农业三新工程项目
江苏省自然科学基金
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相关领域:
生物学
农业科学
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中国科学院
作者
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赵松
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刘琴
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李传明
1篇
徐健
1篇
杨青
传媒
1篇
中国生物防治...
年份
1篇
2013
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转宿主粘虫颗粒体病毒(PuGV-Ps)增效蛋白基因的克隆表达及活性
被引量:3
2013年
以东方粘虫为转宿主增殖的颗粒体病毒(PuGV Ps)DNA为模板通过PCR反应扩增出一条2.7 kb的特异性基因片段,纯化的PCR产物克隆到载体质粒pET 15b中,构建重组质粒pET 15b En,重组质粒外源基因测序证明PCR扩增产物是粘虫颗粒体病毒转宿主病毒PuGV Ps增效蛋白的全长基因。与原始美洲粘虫颗粒体病毒(PuGV)增效蛋白基因的序列比较,两者同源性达99.59%。11个突变碱基中有7个集中在5′端下游500 bp,而3′端上游500 bp仅1个碱基发生突变。PuGV Ps增效蛋白基因重组质粒pET 15b En转化到大肠杆菌中构建重组菌,在IPTG诱导下表达了108 kD的表达产物,Ni2+柱纯化证明表达产物是目标增效蛋白。LB培养液中加入0.2%的葡萄糖后有利于增效蛋白基因的表达。生物测定结果表明,粗提的表达产物具有增效活性,可以提高Btδ内毒素对棉铃虫、甜菜夜蛾的敏感性。
徐健
赵松
刘琴
杨青
李传明
关键词:
增效蛋白
克隆表达
生物测定
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