国家自然科学基金(30671741) 作品数:14 被引量:76 H指数:5 相关作者: 姚三巧 白玉萍 陈志远 陈刚 张春民 更多>> 相关机构: 中国煤矿工人北戴河疗养院 河北省煤矿卫生与安全实验室 华北煤炭医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 河北省科技支撑计划项目 美国国立卫生研究院基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 更多>>
细胞因子在矽肺患者肺泡巨噬细胞培养上清液中的表达及其意义 被引量:19 2013年 目的探讨肺泡巨噬细胞(alveolar macrophage,AM)分泌的6种与肺纤维化有关的细胞因子与矽肺发生发展的关系。方法以29例矽肺患者和3例异物吸入者及3例接尘时间不超过3个月的接矽尘工人为调查对象,收集其肺灌洗回收液,AM分离纯化后37℃培养24h,收集培养上清液,采用人的ELISA试剂盒检测培养上清液中的肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)、白细胞介素1β(interlukin,IL-1β)、IL-8、转化生长因子-β1(transforming growth factor beta,TGF-β1)、巨噬细胞炎症蛋白-1α(macrophage inflammatory protein 1α,MIP-1α)及单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)的表达水平,分析其与矽肺的关系。结果矽肺患者AM培养上清液中IL-1β、TNF-α、TGF-β1、IL-8及MCP-1水平均高于对照组(P<0.05),贰期以上患者TNF-α、MCP-1的表达水平高于壹期,TGF-β1则低于壹期患者(P<0.05);持续接触矽尘者IL-1β、TGF-β1和MIP-1α的表达水平高于脱尘者,TNF-α则呈相反的趋势;发病工龄<15a者IL-1β表达水平低于发病工龄≥15a者,MCP-1的表达水平则呈相反的趋势;IL-1β、TNF-α及MCP-1表达水平均与脱尘年限呈负相关。结论矽尘诱发的纤维化有关的炎性细胞因子的差异表达在矽肺发病及进展中起重要作用。 姚三巧 陈志远 白玉萍 张春民 陈刚 余艳琴 张志浩 张喜英 袁扬 范雪云 袁聚祥 关维俊 黄京慧 马国宣 车审言关键词:矽肺 超氧化物歧化酶复合酶对尘肺患者肺泡巨噬细胞Fas/FasL信号转导及细胞凋亡的调控作用 被引量:3 2008年 目的探讨超氧化物歧化酶(SOD)复合酶对尘肺患者肺泡巨噬细胞(AM)Fas/FasL信号转导及细胞凋亡的调控作用,为尘肺的早期防治提供依据。方法收集在某专科医院进行大容量双肺灌洗治疗的0^+接尘工人、Ⅰ期、Ⅱ期尘肺患者(共50例)的肺泡灌洗液中的细胞成分,将每例的AM分为非处理组、SOD组、Fas,FasL组。分别取5×10^6个细胞于DMEM中纯化培养2h,3组均换新的DMEM,SOD组加SOD复合酶200U/ml、Fas,FasL组加抗肿瘤坏死因子α(TNF—α)抗体50ng/ml、抗-TRAIL抗体200ng/ml后继续培养24h。取1×10^6个AM进行细胞裂解,用western blot方法检测Fas、FasL、Caspases-8、Caspases-3蛋白表达,用quantity one 7.0图像分析软件测定各蛋白的相对含量。采用末端脱氧核酸转移酶(TdT)介导的duTP缺口末端标记技术(TUNEL)检测AM凋亡情况;琼脂糖凝胶电泳法定性检测AM DNA片断化。结果SOD组、Fas/FasL组凋亡指数分别为(9.50±2.76)%和(14.01±2.56)%,均低于未处理组[(19.18±2.83)%],差异有统计学意义(P〈0.05);未处理组呈现细胞凋亡的特征性DNA梯状带,Fas/FasL组梯状带隐约可见,SOD组未见特征性梯状带。SOD组Ⅰ期、Ⅱ期尘肺患者的Fas、FasL、Caspase-8、Caspase-3蛋白表达水平均低于未处理组和Fas/FasL组,差异有统计学意义(P〈0.05)。不同处理组各期尘肺的AM Fas、FasL、Caspase-8、Caspase-3的蛋白表达水平差异均无统计学意义(P〉0.05)。结论SOD复合酶可下调Fas,FasL系统的Fas、FasL、Caspase-8、Caspase-3的蛋白表达水平,抑制AM的凋亡。 姚三巧 张喜英 陈志远 白玉萍 陈刚 沈福海 张志浩 徐应军 李君关键词:尘肺 超氧化物歧化酶 不同倾斜角度对应力木生长应力、木材密度和干缩性质的影响 2009年 通过在安徽农业大学人工林场选取3年生马尾松实生苗和1年生杨树扦插苗进行栽培(其中马尾松杨树各60株,每12株为1组,共5组,每组对应1个角度,共5个角度0°、15°、30°、45°和60°),跟踪测定其生长应力指示值(growth stress indicator,简称GSI)、基本密度、干缩性质,并对它们的关系进行研究。结果表明:(1)杨树、马尾松GSI绝对值大小和倾斜角度呈显著正相关关系;(2)杨树、马尾松的基本密度和倾斜角度都呈显著正相关关系;(3)杨树、马尾松径向干缩率和倾斜角度关系不显著,杨树、马尾松轴向干缩和倾斜角度呈正相关关系,杨树弦向干缩和倾斜角度呈正相关关系,马尾松弦向干缩和倾斜角度呈负相关关系;(4)杨树应拉木区的弦向干缩大于对应拉木区,径向干缩变化不大;马尾松应压木区的弦向和径向干缩均小于对应压木区,应力木区的轴向干缩远大于对应力木区。 刘倩 刘盛全 刘亚梅关键词:应力木 生长应力 基本密度 TRAIL及其受体对煤工尘肺患者肺泡巨噬细胞凋亡调控作用 被引量:5 2015年 目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)及其受体(TRAILR)信号转导通路在煤工尘肺(CWP)患者肺泡巨噬细胞(AM)凋亡中的作用机制。方法以接触煤尘及煤矽尘的24例观察对象和CWP壹期、贰期患者各22例为研究对象,收集大容量肺灌洗回收液,分离、纯化AM后,分为对照组、超氧化物歧化酶(SOD)组、TRAIL组、抗-TRAIL抗体组、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-8抑制组、核转录因子(NF)-κB抑制剂组,给予相应处理后进行培养。收获细胞后,检测细胞凋亡情况,并提取蛋白采用免疫印迹法检测TRAIL/TRAILR信号转导通路Caspase-3、Caspase-8和死亡受体5(DR5)蛋白相对表达水平。结果 5个处理组AM凋亡指数均低于对照组(P<0.05),TRAIL组AM凋亡指数分别高于SOD组、抗-TRAIL抗体组、Caspase-8抑制剂组和NF-κB抑制剂组(P<0.05);CWP壹期和贰期患者AM凋亡指数均高于观察对象(P<0.05),CWP贰期患者AM凋亡指数高于CWP壹期患者(P<0.05);不同处理和不同程度患者AM凋亡指数的交互作用有统计学意义(P<0.01)。5个处理组Caspase-3、Caspase-8和DR5的蛋白相对表达水平分别低于对照组(P<0.05),TRAIL组Caspase-3和Caspase-8的蛋白相对表达水平分别高于SOD组、抗-TRAIL抗体组、Caspase-8抑制剂组和NF-κB抑制剂组(P<0.05),SOD组DR5蛋白相对表达水平分别低于TRAIL组、抗-TRAIL抗体组、Caspase-8抑制剂组和NF-κB抑制剂组(P<0.05);CWP壹期和贰期患者Caspase-3、Caspase-8和DR5的蛋白相对表达水平均高于观察对象(P<0.05);不同处理和不同程度患者Caspase-3的蛋白相对表达水平的交互作用有统计学意义(P<0.01),不同处理和不同程度患者Caspase-8和DR5的蛋白相对表达水平的交互作用均无统计学意义(P>0.05)。结论 TRAIL/TRAILR信号转导通路介导的AM凋亡可能在CWP发病中发挥一定作用;在不同环节对TRAIL/TRAILR信号转导通路进行抑制或阻断,可有效抑制CWP患者AM凋亡的发生 张春民 白玉萍 余艳琴 陈志远 张志浩 陈刚 徐应军 沈福海 姚三巧关键词:煤工尘肺 肺泡巨噬细胞 凋亡蛋白 天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶 死亡受体 TNF-α/TNFR/NF-κB通路对煤工尘肺患者肺泡巨噬细胞凋亡调控机制 被引量:7 2017年 目的探讨煤工尘肺(CWP)患者肺泡巨噬细胞(AM)凋亡的肿瘤坏死因子(TNF)-α及其受体(TNFR)信号转导通路调控作用机制。方法采用单纯随机抽样方法,以24例CWP壹期患者为CWP组,以4例煤矿粉尘作业观察对象人员为观察对象组,收集2组人员的支气管肺泡灌洗液分离、纯化AMs,分为对照组、超氧化物歧化酶(SOD)组、TNF/TNFR组、抗-TNF-α抗体组、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-8抑制组和核转录因子(NF)-κB抑制组,进行相应处理后培养24 h,收获细胞,提取蛋白采用免疫印迹法检测信号蛋白TNF-α、TNFR1、TNFR2、Caspase-8、Caspase-3、NF-κB P50及NF-κB P65的表达情况。结果 CWP组AMs的TNF-α、TNFR2、Caspase-8、Caspase-3、NF-κB P50及NF-κB P65的蛋白相对表达水平均高于观察对象组(P<0.05)。TNF/TNFR组和抗-TNF-α抗体组AMs的TNF-α、TNFR1、Caspase-8、Caspase-3、NF-κB P50的蛋白相对表达水平均低于对照组(P<0.05);抗-TNF-α抗体组AMs的上述5个指标均低于NF-κB抑制组(P<0.05)。TNF/TNFR组AMs的TNFR1、Caspase-8和Caspase-3的蛋白相对表达水平均高于SOD组和Caspase-8抑制组(P<0.05),TNFR1、Caspase-8和NF-κB P50的蛋白相对表达水平均低于NF-κB抑制组(P<0.05)。对于CWP患者,TNF/TNFR组AMs的TNFR2和NF-κB P65的蛋白相对表达水平均低于对照组(P<0.05),高于SOD组(P<0.05)。结论 TNF/TNFR/NF-κB信号转导途径介导的AM凋亡在CWP的发病中起重要作用;对TNF/TNFR/NF-κB信号转导通路的不同环节进行抑制,可影响CWP患者凋亡蛋白的表达。 余艳琴 郝金奇 郝金奇 张春民 姚三巧 张春民 陈志远 白玉萍 陈刚 张志浩 沈福海 袁扬 黄京慧 马国宣 黄京慧 车审言关键词:煤工尘肺 肺泡巨噬细胞 凋亡蛋白 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 Fas配体对NIH3T3增殖和胶原表达的信号机制研究 被引量:2 2010年 目的探讨Fas配体(FasL)对小鼠成纤维细胞NIH3T3增殖和胶原表达的影响及其信号调控机制。方法采用鼠成纤维细胞系HIN3T3,以FasL为诱导剂,采用抑制剂技术和Western blot技术观察NIH3T3的增殖及胶原表达情况,同时探讨磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/Akt、有丝分裂原活化蛋白(MAPK)/P38、MAPK/ERK信号通路在NIH3T3增殖和胶原表达中的作用。结果研究发现低剂量的FasL可调节3T3的生长,表现为细胞数量和胶原表达水平均随FasL剂量的增加而增加,且存在剂量-效应和时间-效应;MAPK/P38及PI3K/Akt信号通路对NIH3T3的增殖具有调控作用,MAPK/P38及MAPK/ERK信号通路可调控NIH3T3胶原表达。结论Fas/FasL系统对成纤维细胞增殖和胶原表达起促进作用;FasL主要通过PI3K/Akt、MAPK/P38信号通路对成纤维细胞增殖起调控作用;通过MAPK/P38及MAPK/ERK信号通路调节成纤维细胞的胶原表达。 姚三巧 LU Yongju WANG Liying Rojanasakul Anand Iyer Neelam Azad Yon Rojanasakul关键词:FAS配体 NIH3T3 增殖 信号转导 矽肺病患者肺泡巨噬细胞死亡受体表达及意义 被引量:19 2013年 目的探讨矽肺病患者肺泡巨噬细胞(AM)死亡受体(DR)的表达水平及其与肺纤维化程度的关系。方法以61例进行肺灌洗的汉族男性观察对象及矽肺病患者为观察组,以13例肺部X射线表现完全正常的汉族男性为对照组,分离、纯化及培养各研究对象的AM,检测3种DR[凋亡蛋白-1(Fas)、肿瘤坏死因子受体-1(TNFR1)和肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体-2]的表达水平,采用酶联免疫吸附试验检测AM培养上清中的可溶性DR(sDR)水平,采用免疫印迹法检测AM裂解液中3种膜结合型DR(mDR)水平,分析DR表达水平与粉尘接触各因素的关系。结果矽肺病患者膜结合型Fas(mFas)及膜结合型TNFR1(mTNFR1)的相对水平均高于对照组及观察对象(P<0.05),且随着肺部病变的加重而升高;矽肺病患者可溶性Fas(sFas)及可溶性TNFR1(sTNFR1)水平均低于观察对象(P<0.05),且sFas随着肺部病变的加重而下降。结论矽尘诱导的mFas和mTNFR1表达上调、sFas表达下调在矽肺病发病及进展中起重要作用,DR信号通路活化可能是矽肺病发病的重要机制之一。 姚三巧 陈志远 卢遥 白玉萍 张春民 余艳琴 张喜英 陈刚 张志浩 车审言 徐应军 沈福海 金玉兰关键词:死亡受体 矽肺 尘肺患者肺泡巨噬细胞凋亡及其死亡信号调控机制研究 被引量:7 2010年 目的初步研究尘肺患者肺泡巨噬细胞(AM)的凋亡情况以及肿瘤坏死因子-α及其受体(TNF-α/TNFR)信号通路对AM凋亡的调控作用,为尘肺病的早期防治提供依据。方法选取30例尘肺患者为研究对象,收集其肺泡灌洗回收液,分离纯化AM,将实验分为5组,即未处理组、超氧化物歧化酶(SOD)组、TNF-α/TNFR组、抗-TNF-α组、半胱氨酰天冬氨酸特异蛋白(Caspase)-8抑制剂组。培养24h后,收获AM,分别用光学显微镜、透射电子显微镜、荧光共聚焦显微镜检测AM凋亡的情况。采用SAS8.2软件进行方差分析和2分析。结果光学显微镜、荧光共聚焦显微镜、透射电镜下均可见凋亡细胞染色质浓缩、边缘化、染色质分割成块状、核膜不完整和凋亡小体等典型的凋亡形态。SOD组、抗-TNF-α组、Caspase-8抑制剂组的AM凋亡指数均低于未处理组。结论尘肺患者AM存在一定程度的凋亡,表现为形态学的改变,凋亡程度与接尘性质有关,与尘肺期别、接尘工龄、脱尘年限无关。SOD复合酶、抗-TNF-α抗体、Caspase-8抑制剂可在信号通路的不同环节阻断信号转导,抑制AM凋亡的发生。 余艳琴 姚三巧 白玉萍 张春民 沈福海 徐应军 陈志远 陈刚 张志浩 马国宣 黄京慧 车审言关键词:尘肺 肺泡巨噬细胞 凋亡 TNF-α/TNFR信号蛋白在煤工尘肺患者肺泡巨噬细胞中的表达 被引量:4 2016年 [目的]研究肺泡巨噬细胞(alveolar macrophage,AM)凋亡信号通路中肿瘤坏死因子α(TNF-α)/肿瘤坏死因子受体(TNFR)信号蛋白的表达水平及其规律,探讨TNF-α/TNFR信号蛋白在煤工尘肺肺纤维化过程中的可能作用。[方法]以尘肺诊断中确定的观察对象(4例)及壹期煤工尘肺(CWP)患者(24例,其中脱尘及未脱尘各12例)为研究对象,收集大容量肺灌洗回收液,经分离、纯化、培养裂解肺泡巨噬细胞,AM用蛋白免疫印迹(Western blotting)检测信号蛋白β-actin、TNF-α、TNFR1、TNFR2、天冬半胱氨酸特异性蛋白酶8(Caspase-8)、天冬半胱氨酸特异性蛋白酶3(Caspase-3)、核因子-κB的受体65/50(NF-κB P65及P50),以β-actin为参比,用Flour Chem HD2软件分析各信号蛋白的相对含量。[结果]壹期CWP患者AM表达的TNF-α、TNFR1、Caspase-8、Caspase-3、NF-κB(P65、P50)、TNFR2水平分别为2.69±1.19、1.95±1.02、2.80±1.95、2.19±1.49、2.70±1.30、2.45±1.32、5.15±1.24,高于观察对象中其相应蛋白(分别为0.93±0.14、1.18±0.19、1.24±0.55、1.44±1.08、1.41±0.26、1.35±0.53、1.07±0.08)的表达,差异具有统计学意义(P<0.05);在未脱尘者中上述指标表达水平分别是3.544±1.278、2.508±0.925、3.274±2.183、3.079±1.304、3.332±1.062、2.865±1.024、5.817±1.089,高于脱尘者中的表达水平(分别为1.899±1.191、1.318±0.538、1.627±0.740、1.764±0.815、2.068±0.708、1.602±0.672、4.483±1.425),差异具有统计学意义(P<0.05)。[结论]CWP患者AM凋亡信号蛋白Caspase-8、Caspase-3、NF-κB(P65、P50)、TNFR、TNF-α的表达水平上升,脱尘后表达水平降低。表明TNF-α/TNFR信号通路在尘肺发病中可能起一定作用。 余艳琴 郝金奇 姚三巧 张春民 陈志远 白玉萍 徐应军 沈福海 车审言 范雪云 袁聚祥关键词:煤工尘肺 肺泡巨噬细胞 Role of Fas/FasL Pathway-mediated Alveolar Macrophages Releasing Inflammatory Cytokines in Human Silicosis 被引量:14 2013年 The role of Fas/Fas ligand (FasL) in mediating alveolar macrophage (AM)-derived inflammatory cytokines in 29 human lung silicosis patients and 6 controls was studied. It showed that the serum levels of IL-1β, TNF-a, IL-8, MIP-la, MCP-1, and TGF-β1 were higher in silicosis patients than in controls, and increased with the progression of silicosis except TGF-β1 and IL-8. TGF-β1, IL-8, MCP-1, YAO San Qiao HE Qin Cheng YUAN Ju Xiang CHEN Jie CHEN Gang LU Yao BAI Yu Ping ZHANG Chun Min YUAN Yang XU Ying Jun关键词:FASL AM