国家自然科学基金(30471919) 作品数:5 被引量:6 H指数:2 相关作者: 李震中 李春岩 刘慧 李鑫 赵子春 更多>> 相关机构: 河北医科大学第二医院 北京协和医院 江苏出入境检验检疫局 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
空肠弯曲菌Cj1136、Cj1138、Cj1139基因对比研究 被引量:2 2009年 目的了解吉兰-巴雷综合征(GBS)相关空肠弯曲菌(C.jejuni)的Cj1136、Cj1138、Cj1139基因序列特征,并同GenBank中的非GBS相关C.jejuni菌株对应序列进行比较,找出可能使C.jejuni菌株具有致GBS能力的碱基突变。方法选取分离自GBS患者粪便并经动物模型证实为致GBS的AMAN型C.jejuni 3株进行培养并提取基因组DNA测序。将基因测序结果与NCTC11168菌株进行对照比较,寻找此3株C.jejuni的Cj1136、Cj1138、Cj1139基因突变位点,并计算此3株致GBS C. jejuni的Cj1136、Cj1138、Cj1139基因序列间的遗传距离。结果3株致GBS C.jejuni菌株的Cj1136基因由1173个碱基构成;Cj1138基因由1170个碱基构成;Cj1139基因由912个碱基构成,与NCTC11168的Cj1136、Cj1138、Cj1139基因序列相比,此3株致GBS C. jejuni中只有Cj1138存在2个相同的碱基突变。遗传距离计算,3株致GBS C.jejuni的Cj1136、Cj1138、Cj1139基因之间最大遗传距离为2.1%。结论与NCTC11168相比GBS相关C.jejuni中Cj1138基因序列存在相同碱基突变,这些碱基突变可能与C.jejuni致GBS能力的改变相关。该3株致GBS C.jejuni的Cj1136、Cj1138、Cj1139基因遗传距离较小,反映河北地区致GBS的C.jejuni在进化上存在聚类现象,具有一定的区域特征。 李鑫 李震中 白欣立 刘慧 赵子春 刘卫卫 高爱民 邢丛丛 李春岩关键词:吉兰-巴雷综合征 空肠弯曲菌 基因 吉兰-巴雷综合征相关空肠弯曲菌waaF基因序列对比研究 被引量:1 2011年 目的了解吉兰-巴雷综合征(GBS)相关空肠弯曲菌(C.jejuni)waaF基因核酸及氨基酸序列特征,分析其遗传进化关系。方法选取3株致GBS C.jejuni菌株,提取其基因组测序。应用生物信息学软件,以NCTC11168序列为参照进行比对,分析waaF基因碱基及相应氨基酸突变、二级结构变化,计算遗传距离。结果 3株致GBS C.jejuni waaF基因均由960个碱基构成,相同碱基突变位点有5个,1081462位zhanxingT→A,lulei、qiaoyuntaoT→G导致相同氨基酸改变:185位D→E,该位点导致α螺旋结构的改变。3株致GBS C.jejuni waaF基因遗传距离较小。结论 GBS相关C.jejuni菌株waaF基因序列存在相同碱基及氨基酸突变及二级结构变化,这可能与C.jejuni致GBS能力的改变相关。河北地区致GBS的C.jejuni在进化上存在聚类现象。 陈娟 李震中 白欣立 刘慧 李鑫 赵子春 刘卫卫 郭医杰 邢丛丛 李春岩关键词:吉兰-巴雷综合征 空肠弯曲菌 格林-巴利综合征相关空肠弯曲菌galE基因序列对比研究 被引量:2 2009年 目的测定3株格林-巴利综合征(Guillain-Barre syndrome,GBS)相关空肠弯曲菌的galE基因序列,并同GenBank中的空肠弯曲菌菌株相应序列进行比较,了解致GBS的序列特征并分析其遗传进化关系。方法选取分离自GBS患者粪便并经动物模型证实为致GBS的3株AMAN型空肠弯曲菌菌株进行培养并提取基因组DNA测序。将基因测序结果通过与NCTC11168菌株进行对照比较寻找galE基因突变位点并对galE基因片段进行遗传距离计算。结果3株致GBS空肠弯曲菌菌株的galE基因均由987个碱基构成。与NCTC11168的galE基因序列相比,此3株空肠弯曲菌菌株gale基因核苷酸序列有4个相同碱基突变并导致了4个对应的相同氨基酸突变。遗传距离计算,zhanxing株与qiaoyuntao株距离为1.5%,zhanxing株与lulei株距离为1.6%,qiaoyuntao株与lulei株距离为0.5%。结论GBS相关空肠弯曲菌中galE基因核苷酸序列的确存在相同变异且发生变异概率较非GBS相关空肠弯曲菌明显增大,遗传距离反映了此3株致GBS的空肠弯曲菌具有一定的区域特征。 李鑫 李震中 白欣立 刘慧 赵子春 刘卫卫 方保峰 王红 郭医杰 李春岩关键词:格林-巴利综合征 空肠弯曲菌 Comparative gene sequence of wla gene cluster in Campylobacter jejuni strains causing Guillain-Barré Syndrome Objective To investigate the campylobacter jejuni risk factor for development of Guillain-Barré Syndrome,the w... 刘慧文献传递 格林-巴利综合征空肠弯曲菌的wla基因簇序列对比研究 被引量:2 2008年 格林一巴利综合征(Guillain—Barre syndrome,GBS)是发生于空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni)感染后的脱髓鞘性周围神经病,根据病理生理表现的不同,GBS可分为急性炎症性脱髓鞘性多发性神经病(acute demyelinating pattern,AIDP)、急性运动轴突型神经病(acute motor axonal neuropathy,AMAN)及Miller—Fisher综合征。我国常见的GBS类型为AMAN,其电生理改变及病理表现为轴突损害。大量研究表明,空肠弯曲菌感染后引起的细菌脂寡糖(lipooligosaccharides,LOS)与周围神经中神经节苷脂的交叉免疫反应可能与GBS的发病有关。LOS编码区的突变和变异极其活跃,这种突变和变异有利于细菌逃避宿主的免疫反应。但由于LOS结构的变化,同时也导致了菌株致GBS能力的改变。wla基因簇编码的多种蛋白质参与了细菌表面LOS的生物合成,本文对3株致AMAN型GBS空肠弯曲菌菌株的w/a基因簇进行扩增及测序,通过与已知空肠弯曲菌菌株的相应序列进行对比及分析,观察其序列特征及与致GBS的相关性。 刘慧 李震中 张军峰 田新英 王惠凌 岳月红 朱一飞 李春岩关键词:格林-巴利综合征 空肠弯曲菌 基因簇 脱髓鞘性周围神经病 FISHER综合征 PATTERN 空肠弯曲菌penner o:19 cjaA基因的克隆表达 2011年 目的克隆空肠弯曲菌penner o:19 cjaA基因,构建其原核表达载体,诱导表达及纯化蛋白,为基因工程疫苗的研制打下基础。方法扩增空肠弯曲菌penner o:19 cjaA基因,构建pGEM-T-cjaA克隆载体,以EcoRI和XhoI为酶切位点构建pGEX-4T-1-cjaA原核表达载体。表达载体转化E.coli BL21后诱导表达,SDS-PAGE鉴定表达产物,用Glutathione Sepharose4B纯化重组蛋白。结果成功构建pGEX-4T-1-cjaA表达载体,并获得浓度为10μg/μl的rGST-CjaA重组蛋白。结论成功构建pGEM-T-cjaA克隆载体及pGEX-4T-1-cjaA表达载体,获得重组蛋白rGST-CjaA,为研究空肠弯曲菌疫苗打下基础。 邢丛丛 李震中 白欣立 徐飞 简朔 李鑫 赵子春 高爱民 薛峰关键词:空肠弯曲菌 原核表达 蛋白纯化