国家自然科学基金(30671784)
- 作品数：21 被引量：47H指数：4
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- 相关机构：苏州大学苏州大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省普通高校研究生科研创新计划项目国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 吸烟与氡暴露致肺癌的流行病学和生物学差异被引量：8
- 2007年
- 吸烟和氡暴露是导致肺癌的两个主要危险因素。本文从流行病学和生物学分子效应两个方面,总结了吸烟和氡暴露致肺癌的近期研究结果,比较了二者的人群和生物学差异,并提出了今后的研究建议。
- 童建
- 关键词：吸烟氡暴露肺癌
- 氡染毒大鼠支气管肺泡灌洗液蛋白质的双向电泳分析被引量：2
- 2007年
- 观察氡染毒后大鼠支气管肺泡灌洗液(Bronchoalveolar lavage fluid,BALF)蛋白质表达谱的变化。雄性Wistar大鼠吸入氡的累积剂量达200工作水平月(Working level month,WLM)后,收集大鼠BALF,提取BALF细胞总蛋白,采用双向电泳技术(Two-dimensionalel ectrophoresis,2-DE)分离总蛋白质,银染显色,进行差异蛋白质的分析。ImageMaster 2D Platinum软件分析结果显示正常组和氡染毒组大鼠BALF细胞总蛋白双向电泳图谱上分别可见到645和554个蛋白点,共获得48个显著的蛋白质差异点,其中23个点在正常大鼠BALF中表达或表达明显增强,25个点在染毒大鼠BALF中表达或表达明显增强。结果提示,正常大鼠与氡染毒大鼠BALF细胞的蛋白质表达谱存在差异。
- 徐乃玉张素萍聂继华丁建松童建
- 关键词：双向电泳氡肺泡灌洗液蛋白质组
- 香烟烟雾吸入致大鼠肺与气管上皮细胞RAGE和S100A6表达增加被引量：2
- 2010年
- 目的观察香烟烟雾长期染毒大鼠肺组织、气管上皮细胞中晚期糖基化终产物受体(RAGE)和钙结合蛋白(S100A6)的表达。方法健康雄性Wistar大鼠18只,随机分为对照组、低(烟雾浓度20%)和高(烟雾浓度60%)浓度组,每组6只。动式气体染毒装置每天染毒2次,每次30min,一周5d,共染毒43周。分离大鼠气管和肺组织,分离原代上皮细胞,收集并提取总蛋白;Westernblot方法检测RAGE和S100A6蛋白的表达。同时测定正常的人支气管上皮细胞株BEAS-2B和肺癌细胞株A549中2种蛋白的表达情况。结果气管组织贴块培养法分离出的上皮细胞纯度为(93.56±1.48)%;烟雾染毒组大鼠肺组织及气管上皮细胞中RAGE和S100A6蛋白的表达均显著增高。同时,肺癌细胞A549中RAGE及S100A6蛋白的表达量明显高于正常人支气管上皮细胞BEAS-2B。结论RAGE和S100A6有望作为香烟烟雾暴露致肺损伤的生物学标志。
- 吴昭昭张素萍武彦文刘海云聂继华童建
- 关键词：RAGES100A6WISTAR
- 吸烟致大鼠肺组织蛋白质电泳图谱的改变
- 2007年
- [目的]用双向电泳法测定烟草烟雾染毒大鼠肺组织差异蛋白的表达。[方法]雄性Wistar大鼠20只,平均体重(150±10)g,随机分为4组,每组5只。其中,3组为吸烟组,分别暴露于动式气体染毒装置进行烟草烟雾染毒1个月、2个月和4个月,每天2次,每次30min;另1组为不吸烟对照组,按常规饲养于动物房。分离不同剂量组大鼠肺组织,提取总蛋白,进行双向电泳测定。用ImageMaster2D Platinum软件对获得的蛋白图谱加以分析,寻找差异表达的蛋白质。[结果]病理切片显示吸烟组大鼠肺气肿改变明显,支气管炎症反应逐渐加重。双向电泳结果显示吸烟组大鼠肺组织总蛋白数增加,与对照组相比,有28个差异表达的蛋白点数,其中16个表达上调,12个表达下调。表达上调的蛋白点中,6个仅在吸烟组表达;下调的点中5个仅在对照组表达。[结论]双向电泳是一种有效的分离肺组织总蛋白的方法,烟草烟雾染毒可致大鼠发生肺气肿和支气管炎症反应,并引起大鼠肺组织蛋白质双向电泳图谱的改变。
- 张素萍徐乃玉聂继华丁建松童建
- 关键词：双向电泳吸烟
- 氡染毒小鼠外周血细胞差异表达基因的筛选与鉴定
- 2009年
- 目的在建立氡染毒小鼠模型的基础上，筛选和鉴定氡染毒小鼠外周血细胞差异表达基因。方法采用HD-3型多功能氡室对BALB／c小鼠动态吸入染毒，建立实验动物模型。按照小鼠吸入氡及其子体的累积剂量分为实验组（累积剂量105WLM）和对照组（室内本底浓度，1WLM）。采用RNA转录物5’末端启动机制技术（SMART）和抑制性消减杂交技术（SSH）构建正、反向消减eDNA文库，选取含有插入eDNA片段的克隆进行反向Northern杂交筛选上调或下调的阳性克隆。克隆的测序结果进行同源性检索和生物信息学分析。结果在成功构建了消减cDNA文库基础上，挑取白斑390个，获得312个含有插入片段的单克隆，进行反向Northern杂交，分析基因的上调或下调水平。选取差异表达克隆41个进行测序及生物信息学分析，最终获得10条已知功能或有注释的差异基因片段和3条未知的表达序列标签（EST）。筛选出的差异表达基因涉及氧化损伤、细胞增殖和肿瘤发生等多方面的功能。结论氡染毒可引起一系列基因表达的上调或下调，利用SSH技术可以筛选到氡染毒的差异表达基因，为探讨氡损伤机制提供参考。
- 陈锐李建祥聂继华施敏骅胡华成童建
- 关键词：氡抑制消减杂交差异表达基因生物信息学
- 去甲斑蝥素处理肝癌细胞SMMC-7721蛋白质组的双向电泳分析被引量：3
- 2007年
- 目的分析去甲斑蝥素(NCTD)作用于肝癌细胞SMMC-7721前后蛋白质组表达的差异。方法采用四氮唑蓝还原法(MTT)测定细胞生长抑制率。20μg/ml的NCTD作用于肝癌细胞SMMC-772124h,分别收集处理组与对照组细胞,裂解并提取细胞内总蛋白;双向凝胶电泳(2-DE)分离蛋白质,凝胶银染,ImageMaster2D Platinum软件分析2-DE图谱,寻找差异表达蛋白点。结果NCTD能诱导肝癌细胞SMMC-7721的凋亡,具有时间和剂量依赖性,与对照组比较,处理组2-DE图谱中有5个蛋白点表达上调,6个蛋白点表达下调。结论抗癌药NCTD能诱导肝癌细胞SMMC-7721凋亡并引起细胞内蛋白质组表达的改变。
- 徐乃玉张素萍童建
- 关键词：去甲斑蝥素肝癌细胞SMMC-7721双向凝胶电泳蛋白质组
- 氡染毒大鼠肺组织病理改变与CcO活性的相关性研究被引量：1
- 2008年
- 目的观察氡染毒对大鼠肺组织的病理改变以及线粒体细胞色素C氧化酶(CcO)活性的影响。方法多功能生态氡室对Wistar大鼠进行氡及其子体染毒,累积染毒剂量分别达100、200、400WLM,染毒后观察各组大鼠的肺组织损伤程度,提取大鼠肺组织线粒体进行CcO活性的测定。结果染毒后肺组织主要病理变化为肺间质充血水肿,炎症细胞浸润,纤维化变性,肺泡腔萎缩消失。线粒体CcO的活性随着染氡剂量的增加逐渐降低,并且与肺泡间隔厚度成负相关,与肺泡腔面积成正相关。结论氡染毒后肺组织的病理改变与CcO的活性相关。
- 张素萍徐乃玉吴昭昭董亮童建
- 关键词：肺组织
- 氡与香烟烟雾染毒诱发BEAS-2B细胞的体外转化被引量：1
- 2010年
- 目的 通过氡与香烟烟雾体外染毒诱发细胞恶性转化,建立氡与吸烟致肺癌发生的细胞模型.方法 将永生化人支气管上皮细胞系BEAS-2B分为对照组（C组）、氡染毒组（Rn组）、烟雾染毒组（Sm组）、联合染毒组（Rn＋Sm组）,细胞以每孔1 × 105个接种于Transwell培养皿,氡或香烟烟雾持续泵入直接对细胞染毒.检测细胞恶性转化情况.结果 BEAS-2B细胞经氡及香烟烟雾和联合染毒后发生形态学改变,细胞生长失去接触抑制,染氡组、烟雾染毒组、联合染毒组第5染毒代细胞传代20代后获得对血清诱导末端分化的抗性,克隆形成率相对值由0.31±0.18上升至1.92±0.27、2.03±0.14、2.95±0.60,同时该代细胞锚着独立性生长能力也由（0.01±0.02）%上升至（4.89±0.30）%、（8.36±0.50）%、（11.74±0.69）%.染氡组、烟雾染毒组、联合染毒组第5染毒代细胞传代20代后凋亡率由（11.76±0.17）%降低至（4.62±0.42）%、（8.63±0.15）%、（3.68±0.33）%.结论 氡与香烟烟雾单独及联合染毒均能诱发BEAS-2B细胞体外转化,且联合染毒导致损伤效应更加显著,可作为研究氡及吸烟致肺癌的细胞模型.
- 杜厚兵童建聂继华刘海云张素萍吴昭昭李建祥
- 关键词：氡BEAS-2B细胞恶性转化
- 顺铂作用HeLa细胞的蛋白质组学研究被引量：4
- 2008年
- 目的:用双向电泳--质谱法分析顺铂作用于人宫颈癌HeLa细胞后蛋白质组的变化。方法:体外培养HeLa细胞,用MTT法观察不同时间、不同浓度顺铂对细胞的增殖抑制作用。加入10μg/mL顺铂作用于细胞24h,提取总蛋白,进行双向电泳测定,凝胶考染显色,用Image Master2D Platium5.0软件对获得的蛋白图谱加以分析,寻找差异表达的蛋白质。切取差异点,胶内酶切后进行MALDI-TO-F-MS分析和数据库搜索,实现对蛋白点的定性鉴定。结果:顺铂可显著抑制HeLa细胞的生长,且具有一定的时效和量效关系。经双向电泳和质谱后,成功鉴定了7个蛋白质,包括原肌球蛋白、肌动蛋白、磷酸丙糖异构酶,磷酸甘油酸激酶和亲环蛋白A等。结论:顺铂可显著抑制HeLa细胞的生长,并引起HeLa细胞蛋白质组的改变,可能与顺铂的抗肿瘤作用有关。
- 张素萍徐乃玉童建
- 关键词：顺铂HELA细胞蛋白质组学光谱分析
- 氡染毒大鼠气管-支气管上皮细胞的基因差异表达被引量：3
- 2008年
- 氡（Radon）及其子体的致癌效应已引起广泛的关注，被国际癌症研究机构列入室内重要的致癌物质。Meta分析结果提示，氡暴露使矿工发生肺癌的危险陛增高。本研究通过抑制性消减杂交（supprssion subtractive hybridization，SSH）方法，筛选氡染毒大鼠模型的气管．支气管上皮细胞差异表达基因，为探讨氡及其子体致肺癌的早期分子机制提供依据。
- 陈锐李建祥聂继华施敏骅胡华成童建
- 关键词：染毒大鼠氡暴露基因差异表达抑制性消减杂交致癌效应
