浙江省科技厅项目(2009C33140)
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
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- 壳聚糖及聚乙烯亚胺携载 pGL3质粒转染细胞的毒性及效率实验研究
- 2012年
- 目的通过对阳离子聚合物聚乙烯亚胺（PEI）以及 PEI 联合壳聚糖介导 pGL3质粒细胞内转染的效率及细胞毒性的观察,为其进一步携载目的基因转染细胞做好前期铺垫工作.方法培养 HaCaT 及 HUVEC 细胞,同时制备壳聚糖-PEI600Da （CP）以及 CP/DNA、PEI/DNA 纳米粒,采用 MTT 法观察壳聚糖、PEI600Da、PEI25kDa、CP 以及 CP/DNA、PEI/DNA 纳米粒对上述细胞的毒性作用,采用虫荧光素酶检测法观察 CP/DNA、PEI/DNA 纳米粒的转染效率.结果 CP/DNA、PEI600Da/DNA 纳米粒的细胞毒性明显低于 PEI25kDa/DNA 纳米粒的细胞毒性;CP/DNA、PEI600Da/DNA 纳米粒明显提高 DNA 转染 HaCaT、HUVEC 细胞的效率.结论 CP/DNA、PEI600Da/DNA 纳米粒有效转染 HaCaT、HUVEC 细胞,且细胞毒性低;阳离子聚合物 CP、PEI600Da 作为转染基因转染的载体具有广阔的应用前景.
- 曹毅刘改荣王莉陈微李园园杨晓红陶茂灿罗宏宾
- 关键词：聚乙烯亚胺壳聚糖质粒HACATHUVEC
- pcDNA3.1(+)-NRP1真核表达载体的构建与鉴定
- 2012年
- [目的]从人角质形成细胞系HaCaT中克隆NRP1(Neuropilin-1)基因全长cDNA,构建含NRP1基因的重组真核表达载体,为下一步的NRP1基因功能研究奠定基础。[方法]采用RT-PCR法从人角质形成细胞系HaCaT中扩增NRP1基因全长cDNA,扩增产物通过TA克隆连接到pMD18-T载体进行测序鉴定,然后通过双酶切将全长cDNA克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+),最后得到pcDNA3.1(+)-NRP1重组质粒。[结果]成功克隆NRP1基因全长cDNA,并成功构建了pcDNA3.1(+)-NRP1真核表达载体。[结论]pcDNA3.1(+)-NRP1真核表达载体的成功构建可以为NRP1基因功能的进一步研究及其临床基因治疗奠定实验基础。
- 刘培曹毅陈微刘改荣杨晓红陶茂灿罗宏宾
- 关键词：HACAT细胞NRP1真核表达载体
- 壳聚糖以及聚乙烯亚胺携载pGL3质粒转染细胞的毒性及效率实验研究
- 目的:通过对阳离子聚合物聚乙烯亚胺(PEI)以及PEI联合壳聚糖介导pGL3质粒细胞内转染的效率及细胞毒性的观察,为其进一步携载目的基因转染细胞做好前期铺垫工作。方法:培养HaCaT及HUVEC细胞,同时制备壳聚糖-PE...
- 曹毅刘改荣王莉陈微李园园杨晓红陶茂灿罗宏宾
- 关键词：聚乙烯亚胺壳聚糖质粒HACATHUVEC
- 文献传递
