国家自然科学基金(30371527)
- 作品数：5 被引量：21H指数：4
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- 相关机构：第四军医大学西京医院第四军医大学西安第四军医大学口腔医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 三种组织工程鼓膜的构建被引量：1
- 2008年
- 目的构建3种不同材料的组织工程鼓膜,并对其进行生物学特性检测。方法体重30kg健康雄性小白猪1只,制备脱细胞硬脑膜及脱细胞真皮,并从牛皮中提取液态胶原,将第3代豚鼠鼓膜成纤维细胞1×106个/mL,各0.2mL种于3种材料表面进行培养,倒置相差显微镜下观察成纤维细胞的生长状态。培养1周后,将3种材料分别进行扫描电镜及HE染色观察,测定材料厚度及其张力。结果成纤维细胞在3种材料表面生长良好,呈束状平行排列,其中以胶原与脱细胞真皮表面成纤维细胞生长情况较佳。HE染色及扫描电镜下可见成纤维细胞呈单层于3种材料表面连续生长。胶原膜、脱细胞真皮及脱细胞硬脑膜的平均厚度分别为9.4、10.0及10.4μm。张力强度测定,复合成纤维细胞的胶原组织工程鼓膜张力(1.417±0.030)N/mm2,复合成纤维细胞的脱细胞真皮张力为(24.500±2.040)N/mm2,复合成纤维细胞的脱细胞硬脑膜张力为(53.300±2.600)N/mm2;复合成纤维细胞的脱细胞真皮张力与正常豚鼠鼓膜张力26.700N/mm2最接近。结论脱细胞猪真皮为支架复合成纤维细胞构建的组织工程鼓膜,其张力与厚度均与正常豚鼠鼓膜相接近,是构建组织工程鼓膜的理想材料。
- 邓志宏田勇胜王锦玲邱建华刘源赵宇金岩
- 关键词：体外培养
- 三种组织工程鼓膜支架材料的生物相容性被引量：4
- 2008年
- 背景:自体组织修复鼓膜穿孔存在增加手术创伤、取材有限等缺点,构建组织工程鼓膜是鼓膜穿孔治疗的发展方向。目的:构建3种不同材料的组织工程鼓膜支架材料,并评价其生物相容性。设计、时间及地点:随机对照动物实验,细胞学体内观察,于2004-08/2005-02在解放军第四军医大学组织工程中心完成。材料:将健康小猪的硬脑膜、真皮及人羊膜进行脱细胞处理。方法:将预先培养的豚鼠鼓膜成纤维细胞种植于3种材料表面,观察成纤维细胞的生长状态;18只豚鼠随机分为3组,于右侧背皮下分别埋植制备的脱细胞硬脑膜、真皮及人羊膜。主要观察指标:3种脱细胞生物支架材料的显微结构及组织相容性。结果:3种脱细胞材料均为网状结构,无任何细胞及细胞残核存在;豚鼠鼓膜成纤维细胞能够很好地贴附于3种脱细胞材料生长,无细胞毒性;将3种组织材料分别埋植于豚鼠皮下后,无埋植材料排出现象,1周时植入材料周围有较明显炎症反应,其中以脱细胞真皮周围组织反应较轻,4周时炎症反应消失。结论:通过脱细胞方法可以成功建立具有良好生物相容性的组织工程鼓膜支架材料;3种材料中以脱细胞猪真皮的生物相容性最佳。
- 邓志宏田勇胜金岩王锦玲邱建华刘源赵宇
- 关键词：鼓膜脱细胞基质硬脑膜真皮人羊膜生物相容性
- 慢性鼓膜穿孔动物模型的构建被引量：4
- 2005年
- 目的 建立慢性鼓膜穿孔的动物模型。方法 将 10只豚鼠于麻醉后在显微镜下以虹膜切开刀将豚鼠鼓膜双侧紧张部前方部分切除 ,以耳显微刮匙刮除鼓膜穿孔边缘鼓室侧黏膜上皮 ,于穿孔四角放射性切开 1mm后将创缘内翻。术后每日于麻醉后在显微镜下观察鼓膜愈合情况。 8周后于光镜下观察穿孔鼓膜结构。结果 10只豚鼠共 2 0耳鼓膜中 16耳鼓膜经 2个月未能愈合 (80 % )。所有穿孔均占紧张部面积约 4 0 %左右。 3耳鼓膜感染。1耳鼓膜经 10次手术后仍自行愈合。结论 通过鼓膜部分切除加边缘内翻的方法可以成功地建立慢性鼓膜穿孔的动物模型。
- 田永胜邓志宏王锦玲金岩
- 关键词：动物模型
- 脱细胞真皮组织工程鼓膜在豚鼠鼓膜修补术中的应用被引量：5
- 2008年
- 目的观察脱细胞真皮组织工程鼓膜在鼓膜修补术动物实验中的效果。方法建立豚鼠慢性鼓膜穿孔模型30只,同时构建复合成纤维细胞的脱细胞真皮组织工程鼓膜。将每只豚鼠左耳作为手术耳,施行内植法植入组织工程鼓膜,右耳作为空白对照。每周观察鼓膜愈合情况、听阈变化,同时观察组织学结构改变。结果鼓膜修补手术30耳中,2耳因感染而未愈合,愈合率为93.3%;对照耳仅4耳愈合,愈合率为(13.3%);愈合鼓膜外观与正常鼓膜相似,听性脑干反应测试示术耳听力恢复正常。苏木精-伊红染色结果表明采用组织工程鼓膜修复的的鼓膜有着正常鼓膜的三层结构,即鳞状上皮层、中间纤维层及粘膜层,而空白对照耳自行修复的鼓膜中缺少纤维层结构。结论组织工程鼓膜可以作为良好的鼓膜移植材料。
- 邓志宏田勇胜王锦玲邱建华刘源赵宇金岩
- 关键词：鼓膜穿孔鼓膜成形术
- 鼓膜上皮细胞和成纤维细胞的培养与鉴定被引量：7
- 2005年
- 目的:探讨如何以简便快速的方法获得可以用于组织工程鼓膜构建的高纯度的鼓膜上皮细胞和成纤维细胞.方法: 分离新生豚鼠的鼓膜组织,利用本实验建立的两步组织块培养法获得纯化的鼓膜上皮细胞和成纤维细胞,倒置显微镜观察细胞生长状态,免疫组织化学染色鉴定细胞来源.结果: 用该方法可以获得纯化的鼓膜上皮细胞和成纤维细胞,细胞产量大,纯度高,鼓膜上皮细胞细胞具有典型的铺路石样形态,成纤维细胞呈梭形生长. 结论: 本实验所建立的两步组织块培养法可以获得大量高纯度的鼓膜上皮细胞和成纤维细胞以用于组织工程鼓膜的构建.
- 田永胜邓志宏王锦玲金岩刘源赵宇雷娟
- 关键词：鼓膜上皮细胞成纤维细胞
