长江学者和创新团队发展计划(IRT0712)
- 作品数：29 被引量：78H指数：5
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- 相关领域：医药卫生化学工程自动化与计算机技术更多>>
- ERK和P38 MAPK升高MLC_(20)磷酸化调节大鼠平滑肌低氧反应性被引量：5
- 2011年
- 目的研究丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)亚类ERK、P38 MAPK和JNK在低氧血管平滑肌收缩反应性调节中的作用,并从肌球蛋白轻链(MLC20)磷酸化的钙敏感性调节途径上初步探讨其机制。方法用低氧培养血管平滑肌细胞(VSMC)模型和大鼠失血性休克模型,用荧光法检测VSMC收缩反应,用Western blot检测血管平滑肌MLC20磷酸化水平,用离体血管张力测定技术观察休克血管钙敏感性。结果低氧损伤使VSMC对去甲肾上腺素(NE)诱导的收缩反应性明显降低,同时休克血管平滑肌MLC20磷酸化水平和血管钙敏感性降低;给予具有MAPK激动作用的AngⅡ处理可恢复低氧VSMC的收缩反应性、升高休克血管MLC20磷酸化水平和钙敏感性。PD98059(ERK抑制剂)、SB203580(P38 MAPK抑制剂)和SP600125(JNK抑制剂)均可拮抗AngⅡ诱导低氧VSMC反应性升高的作用;同时ERK和P38 MAPK的抑制剂也拮抗了AngⅡ诱导的休克血管MLC20磷酸化水平和钙敏感性升高,而JNK抑制剂无明显作用。结论 ERK、P38 MAPK和JNK都参与了低氧VSMC收缩反应性的调节,其中ERK和P38MAPK的作用机制可能与MLC20磷酸化的钙敏感性调节途径有关,而JNK可能通过其他途径发挥调节低氧VSMC反应性的作用。
- 杨光明李涛徐竞唐婧刘良明
- 关键词：低氧ERKP38JNK
- Rho相关的卷曲蛋白激酶在多重细胞行为中的作用被引量：1
- 2012年
- Rho相关的卷曲蛋白激酶(ROCK)是一种属于AGC家族的蛋白激酶,主要通过诱导应力纤维形成、重构细胞骨架等方式参与细胞收缩、迁徙、分裂、形态变化等生物学行为,对调节细胞的多种功能发挥重要的作用。
- 刘冬陈星云周元国
- 关键词：细胞骨架细胞收缩细胞迁徙
- PI3K/Akt信号途径抑制烧伤后大鼠缺血缺氧心肌细胞凋亡被引量：16
- 2009年
- 目的探讨PI3K/Akt信号途径在烧伤后大鼠缺血缺氧心肌细胞凋亡中的作用及机制。方法首先建立模拟烧伤的动物模型,通过Western blot观察PI3K/Akt信号途径的活化规律,TUNEL实验观察烧伤大鼠心肌凋亡。然后建立离体培养的缺血缺氧心肌细胞模型,并分为对照组、单纯缺血缺氧组、LY294002处理组或IGF-1处理组,应用ELISA观察缺血缺氧心肌细胞凋亡。并通过DEVD荧光检测caspase-3酶活性,RT-PCR检测p53、Bax的转录活性。结果烧伤后大鼠心肌组织内PI3K和pAkt表达逐渐增加,伤后3h达高峰;烧伤3h后,大鼠心肌细胞凋亡率显著增加;应用LY294002特异性抑制PI3K/Akt通路后,大鼠心肌细胞凋亡率较对照组增加更为显著(P<0.05)。缺血缺氧导致体外培养心肌细胞凋亡增加,caspase-3活性逐渐增强,p53、Bax mRNA表达量逐渐升高;与单纯缺血缺氧组相比,应用LY294002阻断PI3K/Akt途径活化后,心肌细胞凋亡数量增加更显著(P<0.05),caspase-3活性增高更为明显(P<0.05),p53、Bax mRNA表达量均显著升高(P<0.05);用IGF-1预先激活PI3K/Akt途径后,与单纯缺血缺氧组比较,心肌细胞caspase-3活性明显降低(P<0.05)。结论PI3K/Akt信号途径在缺血缺氧心肌细胞中具有抗凋亡作用,该作用与PI3K/Akt调控促凋亡基因p53、Bax的表达,抑制caspase-3凋亡反应有关,并为心肌缺血缺氧损害的临床防治提供新思路及实验依据。
- 宋华培黄跃生党永明张东霞褚志刚张琼
- 关键词：P13K/AKT心肌细胞凋亡CASPASE-3BAX
- 具有降阶模型的多模型鲁棒自适应控制
- 2010年
- 传统鲁棒自适应控制由于考虑了实际系统存在的不确定性,在一定程度上扩大了常规自适应控制的应用范围,但是传统鲁棒自适应控制大多只是从系统全局稳定性的角度出发来设计控制器而忽略系统动态和稳态性能,导致其无法在工况多变的实际被控系统中取得令人满意的效果。针对传统鲁棒自适应控制的不足,本文对由ARMA模型描述并包含未建模动态的系统设计了多模型鲁棒自适应控制器。首先采用正则化技术将系统未建模动态转化为系统有界扰动,并在系统降阶模型的基础上根据系统工况的变化设计了多个固定控制器和2个鲁棒自适应控制器,并根据性能指标函数选择最佳控制器作为当前系统控制器以提高系统性能。仿真实验说明当系统存在未建模动态以及系统工况发生变化时,本文设计的控制器能获得较好的控制效果。
- 刘家振王昕王振雷钱锋
- 关键词：多模型控制模型降阶鲁棒自适应控制
- 评价携氧抗休克液体的动物模型建立
- 2009年
- 目的 探讨一种可评价具有携氧功能的抗休克液体的实验动物模型。方法SD大鼠在麻醉状态下做35%、45%、55%和65%放血失血性休克模型，以乳酸林格液（LR）、全血进行复苏，观察其对失血性休克大鼠平均动脉血压（mean arterial blood pressure,MAP）、左心室收缩压（ldft intraventricular systolic pressure,LVSP）、左心室压力上升或下降的最大速率（the maximal change rate of left intraventricular pressure,±dp/dtmax）的影响，同时观察血气指标变化 和存活率的变化。结果 35%失血性休克后，输注LR和全血均可使MAP恢复到90-100mmHg水平，同时LR和全血对恢复休克后动物血流动力学指标、血气指标以及对存活率的影响无显著性差异；45%和55%失血性休克后，单纯LR输注不能使MAP恢复到90-100mmHg水平，且对休克动物的血流动力学指标和血气指标以及存活率的影响明显不及输注全血以后效果好，在55%失血性休克时差异更大。65%放血后动物很快死亡，休克程度太重，不能作为评价模型。结论 55%失血性休克大鼠可作为评价具有携氧液体抗休克作用的实验动物模型。
- 李涛刘良明刁有芳范小青廖自福陈凤
- 关键词：失血性休克乳酸林格液全血
- 精氨加压素对失血性休克大鼠心肌收缩力的影响及与Rho激酶的关系
- 2011年
- 目的探讨精氨加压素(AVP)对失血性休克大鼠心肌收缩力的影响及与Rho激酶的关系。方法失血性休克大鼠的离体乳头肌分别用AVP 0.1μmo.lL-1和Y-27632 10μmol.L-1预孵育,或Y-27632+AVP合用时,先用Y-27632孵育10 min后,再加入AVP作用10 min。平衡30 min后依次用含异丙肾上腺素(Iso)1和10μmol.L-1,0.1,1,10 mmo.lL-1的H-K液灌流乳头肌,观察加入Iso前后收缩力变化。制备离体心脏,稳定后,进行相应再灌流30 min,检测左心室收缩压(LVSP)和左心室压力上升或下降的最大速率(±dp/dtmax)。结果失血性休克2 h,经Iso0.1,1及10 mmol.L-1灌流后,离体乳头肌收缩力显著低于假手术组(P<0.05),AVP 0.1μmol.L-1预孵育可明显升高乳头肌对心肌的收缩力;与休克模型组相比,在Iso 1和10 mmol.L-1灌流后,乳头肌收缩力明显升高(P<0.05);Y-27632 10μmol.L-1离体乳头肌收缩力无明显影响,但Y-27632+AVP可明显降低由AVP引起的乳头肌收缩力的增加。失血性休克2 h后,离体心脏血流动力学指标明显降低,AVP可明显改善休克模型大鼠离体心脏的血流动力学指标,同时Y-27632可明显拮抗由AVP引起休克大鼠离体心脏血流动力学指标的增加。结论 AVP可改善失血性休克所致的心肌收缩力的降低,其机制与其激活Rho激酶有关。
- 李涛朱娱刘良明
- 关键词：精氨加压素乳头肌RHO激酶
- 血管加压素1a与血管加压素2受体在精氨加压素调节缺氧血管平滑肌细胞蛋白激酶C表达中的作用被引量：1
- 2009年
- 目的观察血管加压素1a(V1a)受体与V2受体拮抗剂对精氨加压素(AVP)调节缺氧血管平滑肌细胞(VSMC)蛋白激酶C(PKC)α,δ和ε亚型表达的影响,以及磷脂酶C(PLC)、磷脂酶D(PLD)和磷脂酶A2(PLA2)活性的变化。方法缺氧培养大鼠肠系膜上动脉VSMC,采用Western蛋白印迹法检测PKCα,δ和ε亚型蛋白表达;采用酶偶联荧光分析法测定PLC和PLD的活性,酸碱滴定法检测PLA2的活性。结果缺氧处理1.5h,VSMC胞膜PKC-α和ε亚型蛋白表达量明显升高,AVP进一步升高胞膜PKC-α和ε的表达。V1a受体拮抗剂d(CH2)5[Tyr2(Me)]AVP预处理可明显拮抗AVP诱导的胞膜PKCα和ε亚型蛋白表达升高,同时也明显拮抗AVP诱导的缺氧VSMC中PLC和PLD活性升高。而V2受体拮抗剂d(CH2)[d-Ile2Abu4]AVP对缺氧诱导的胞膜PKC-α和ε表达增加和VSMC中PLC和PLD活性升高无明显作用。结论AVP诱导PKC激活的机制可能与V1a受体介导的PLC/PLD途径有关,而V2受体在这一信号传导途径中可能并不起主要作用。
- 杨光明徐竞李涛明佳陈玮刘良明
- 关键词：受体血管加压素血管平滑肌细胞缺氧加压素蛋白激酶C
- RNA干扰抑制缺氧诱导因子1α表达对缺氧内皮细胞通透性的影响被引量：3
- 2010年
- 目的 了解RNA干扰技术特异性抑制缺氧诱导因子1α（HIF-1α）表达对缺氧血管内皮细胞通透性的影响.方法 利用质粒pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR构建针对人HIF-1α基因的RNA干扰表达载体.将VE细胞分为正常对照组、缺氧组（置于含体积分数1%O_2的混合气体环境中缺氧处理6 h）、转染组、转染缺氧组（转染载体后再进行缺氧处理）.采用RT-PCR法检测正常对照组、转染组HIF-1αmRNA表达,采用蛋白质印迹法检测4组细胞HIF-1α蛋白表达.荧光分光光度计检测单层VE细胞的通透性.将上述缺氧处理替换为HIF-1α特异性诱导剂1 mmol/L二甲氧乙二酰甘氨酸（DMOG）,分为DMOG组、转染DMOG组、正常对照组、转染组,采用蛋白质印迹法观察各组HIF-1α蛋白表达.除通透性检测数据用荧光强度值表示外,其他数据用密度比值表示.实验结果进行组间两两t检验.结果 正常对照组细胞HIF-1α mRNA相对含量为0.765±0.069,转染组细胞HIF-1α mRNA相对含量为0.093±0.007,组间比较,差异有统计学意义（t=16.696,P〈0.05）.转染缺氧组细胞HIF-1α蛋白含量为0.591±0.029,显著低于缺氧组（2.612±0.259,t=13.415,P〈0.05）;转染DMOG组HIF-1α蛋白含量为0.566±0.008,显著低于DMOG组（3.243±0.551,t=6.975,P〈0.05）.缺氧组单层血管内皮细胞通透性（41.6±11.1）较正常对照组（9.4±1.5）显著升高（t=6.238,P〈0.05）,转染缺氧组单层血管内皮细胞通透性（13.3±4.5）显著低于缺氧组（t=5.430,P〈0.05）.结论 采用特异性针对HIF-1α基因的RNA干扰技术,能有效抑制内皮细胞HIF-1α表达,并明显抑制缺氧引起的血管内皮细胞通透性增强.
- 刘琛王裴李牧王凤君
- 关键词：缺氧诱导因子1,Α亚基RNA干扰内皮细胞缺氧通透性
- 细胞外信号调节激酶在失血性休克后活性变化及其在血管反应性调节中的作用被引量：3
- 2011年
- 目的观察失血性休克后细胞外信号调节激酶（ERK）的活性变化及其对休克血管反应性的影响。方法采用72只健康成年sD大鼠，复制失血性休克模型，观察休克后不同时期大鼠肠系膜上动脉（SMA）血管组织中ERK活性的变化，同时测定血管反应性的变化；并观察改变ERK活性对休克血管反应性的影响。结果失血性休克后，大鼠肠系膜上动脉血管组织中ERK活性升高，在休克30min时达到最高点（为正常组的2．6倍，P〈0．01），随着休克时间的延长，ERK的活性逐渐降低，在休克后2h降低为正常对照组的56．1％（P〈0．05）；失血性休克大鼠的血管反应性变化也呈现休克早期升高、休克晚期降低的趋势。给予An出I处理可使休克2h血管组织内ERK活性升高为休克2h组的1．9倍（P〈0．01），同时休克血管反应性明显升高，而ERK的抑制剂PD98059可拮抗AngII诱导ERK活性增加和血管反应性升高的作用。结论ERK在失血性休克大鼠血管反应性调节中具有重要作用。
- 杨光明李涛徐竞唐婧刘良明
- 关键词：失血性休克细胞外信号调节激酶血管反应性
- 大鼠严重烧伤早期RAS的变化对心功能及心肌损害的影响被引量：7
- 2008年
- 目的研究烧伤早期RAS对心功能及心肌损伤的影响。方法健康雄性Wistar大鼠42只,随机数字法分为对照组(正常组,假伤组)和烧伤组,在大鼠30%TBSAⅢ度烧伤后1、3、6、12、24h检测血清AngⅡ,ACE,cTn-I和心肌组织AngⅡ,ACE,ACE2含量变化及血流动力和心肌力学指标(SBP,DBP,LVSP,LVEDP,+LVdp/dtmax,-LVdp/dtmax),Westernblot检测心肌组织中ACE2表达。结果烧伤后1h开始LVSP,+LVdp/dtmax,-LVdp/dtmax较对照组均明显降低(P<0.01),LVEDP明显增高(P<0.01),并于6h达到高峰,血清中cTn-I,AngⅡ,ACE和心肌组织中的AngⅡ,ACE,1h开始较对照组明显增高(P<0.01),6h达到峰值;而心肌组织中的ACE2在烧伤前后无明显变化。结论ACE-AngⅡ轴的变化趋势与血流动力、心肌力学指标及血清cTn-I变化相一致,提示RAS中重要效应轴ACE-AngⅡ轴在烧伤早期心肌损害中起着重要作用。烧伤后ACE2无明显变化,可能是导致ACE-AngⅡ轴过度激活的原因之一。
- 雷泽源黄跃生肖蓉张兵钱张琼
- 关键词：ACE2心肌力学
