国家自然科学基金(20805019)
- 作品数：5 被引量：58H指数：4
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- 基于分子信标荧光纳米探针的李斯特菌DNA均相检测方法被引量：6
- 2010年
- 基于分子信标(MB)识别和荧光纳米粒子探针技术,建立了均相体系中李斯特菌目标DNA的高灵敏检测新方法.首先以羊抗人免疫球蛋白(IgG)标记的异硫氰酸荧光素(FITC)为核材料,成功制备了FITC-IgG@SiO2核壳荧光纳米粒子,有效防止了传统方法中采用单一FITC制备纳米颗粒时泄露严重的问题.随后以FITC-IgG@SiO2荧光纳米粒子和纳米金分别标记单核细胞增生李斯特菌序列特异性分子信标探针5'端和3'端,成功构建了单核细胞增生李斯特菌序列特异性分子信标荧光纳米探针.在实验优化条件下,α(令α=F/F0,F代表MB和目标DNA杂交以后的荧光强度,F0代表MB完全闭合时的荧光强度)与目标DNA浓度在1～200pmol/L浓度范围内呈良好的线性关系,检出下限为0.3pmol/L,相对标准偏差为2.6%(50pmol/L,n=11).将该方法应用于食品样品中单核细胞增生李斯特菌的检测,结果与国标法一致.
- 王周平徐欢段诺吴佳叶菁乐国伟
- 关键词：纳米金分子信标单核细胞增生李斯特菌DNA杂交
- 核酸适配体功能化金纳米探针识别-共振光散射法检测腺苷
- 2010年
- 将纳米探针技术、核酸适配体识别与共振光散射检测技术有机结合,以腺苷为模式分析物,通过均相体系中腺苷与其特异结合核酸适配体识别反应,使形成网络聚集结构的金纳米结构解聚,从而引起共振光散射信号强烈变化。基于此,建立了核酸适配体识别的均相检测腺苷的新方法。该方法对腺苷检测的浓度线性范围为0.1～10μmol/L,检测限为0.04μmol/L(3S/N)。该方法对腺苷的检测灵敏度高、选择性好,鸟苷、胸苷、胞苷、尿苷等对检测不产生干扰。
- 王周平段诺彭晓丽乐国伟
- 关键词：核酸适配体纳米探针共振光散射腺苷
- 微生物ATP提取方法及其在微波灭菌效果快速评价中的应用研究被引量：8
- 2010年
- 本文对ATP发光技术中微生物ATP提取方法进行了优化研究,通过对不同提取剂提取效率的比较,发现苯扎溴铵提取效果好,并且无需稀释,能真实体现微生物细胞内的ATP水平。通过对苯扎溴铵提取时间和提取浓度的优化,结果显示采用体积分数为0.05%苯扎溴铵溶液与菌液混合3-4 min,即可将细胞内的ATP最大限度地释放出来。将该提取方法与ATP生物发光反应体系偶联,实现了对微波灭菌效果的快速评价,在短时间内即可得到可靠结果。试验比较了不同微波功率和微波时间的灭菌效果,实验结果表明,大肠杆菌ATCC25922在用2450 MHz 650w微波照射60 s时可被完全杀灭,而金黄色葡萄球菌ATCC25923则需70 s才能被杀灭。当用2450 MHz微波同样处理60 s时,650 w即可杀灭大肠杆菌ATCC25922,而金黄色葡萄球菌ATCC25923则需700 w才可被完全杀灭。
- 叶菁王周平乐国伟施用晖
- 关键词：生物发光苯扎溴铵微波灭菌
- 纳米金标记黄曲霉毒素B1新型检测方法被引量：14
- 2009年
- 本文建立了两种基于银增强纳米金标记探针的高灵敏度免疫分析方法。方法一是用黄曲霉毒素B1(AFB1)抗体与金标抗原、待测抗原进行竞争免疫反应,然后加入银增强溶液,以金为核沉积生长银,通过检测光密度来确定待测物中AFB1的含量,该方法的检出限可达到0.01 ng/mL。方法二是在前一种方法的基础上,将银化学溶出,通过化学发光法检测沉积的银量来确定待测物中AFB1的含量,该方法的检出限可达到0.002 ng/mL。
- 李井泉毛秀君王周平王丽施用晖
- 关键词：纳米金化学发光
- 核酸适配体识别-荧光法检测赭曲霉素A被引量：30
- 2011年
- 建立了核酸适配体识别-荧光探针技术检测赭曲霉素A(OTA)的新方法。基于微孔板上固定的核酸适配子与目标物质OTA结合时构象发生变化,导致预先与其互补杂交的FAM标记短链DNA解离,引起荧光信号发生变化,据此可实现对OTA的定量检测。当微孔板包被亲和素浓度为25 mg/L、适配子浓度为50 nmol/L,FAM标记互补短链DNA用量为150 nmol/L,OTA结合缓冲液为10 mmol/L HEPES(含120mmol/L NaCl、5 mmol/L KCl、20 mmol/L MgCl2、20 mmol/L CaCl2,pH7.0),45℃反应40 min时,可获得方法的最佳分析结果。在最佳实验条件下,对OTA的检测线性范围为2.0×10-8～1.0×10-5g/L;检出限为1×10-8g/L;相对标准偏差为2.6%(1×10-6g/L,n=11)。本方法选择性良好,操作简单,已成功应用于实际样品中OTA的检测。
- 段诺吴世嘉王周平
- 关键词：核酸适配体荧光分子识别赭曲霉素A
