国家自然科学基金(30671819)
- 作品数：4 被引量：14H指数：2
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- Fas／FasL途径在氟致人神经母细胞瘤SH—SY5Y细胞凋亡中的作用被引量：1
- 2008年
- 目的探讨Fas／FasL途径在氟致人神经母细胞瘤SH—SY5Y细胞凋亡中的作用。方法用不同剂量氟化钠[NaF，0（对照）、20、40、80mg／L]对SH—SY5Y细胞进行染毒，24h后检测细胞存活率、凋亡率和Fas、FasL mRNA表达；选择40mg／L NaF组，观察在Fas受体激动剂（CH11）或拮抗剂（ZB4）作用下细胞凋亡率及Fas、FasL mRNA表达水平的改变。结果40、80mg／L组细胞存活率[（84．63±2．57）％、（69．04±5．63）％]明显低于对照组（100．00％），组间比较差异有统计学意义（P〈0．01）；细胞凋亡率随染毒剂量的升高呈上升趋势，40、80mg／L组细胞凋亡率[（8．54±1．95）％、（17．94±2．71）％]明显高于对照组[（3．32±1．33）％]，组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）；NaF能不同程度地上调Fas、FasL mRNA表达，使Fas／β-actin[40mg／L组（0．94±0．51）、80mg／L组（0．99±0，12）]和Fast／β-actin[40mg／L组（0．96±0．42）、80mg／L组（0．99±0．24）]比值增加，与对照组[Fas／β-actin（0．50±0．33）、FasL／β-actin（0．58±0．23）]比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。在对细胞凋亡率和Fas、FasL mRNA表达水平的影响中，NaF与CH11之间存在协同作用（F值分别为32．89、18．46、14．69，P〈0．01），NaF与ZB4之间存在拮抗作用（F值分别为5．73、24．26、10．17，P〈0．05或〈0．01）。结论NaF可诱导SH—SY5Y细胞凋亡，Fas／FasL途径在NaF诱导SH—SY5Y细胞凋亡中起重要作用。
- 徐八一徐志霞夏涛何平高萍何卫红王爱国
- 关键词：神经母细胞瘤细胞凋亡FASFASL
- Caspase-3和Caspase-8在氟化钠致人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡中的作用被引量：8
- 2008年
- 目的探讨半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶(Caspase)家族中的Caspase-3和Caspase-8对氟化钠(NaF)致人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡的影响。方法先用不同浓度NaF(20、40、80μg/ml)对SH-SY5Y细胞进行染毒,24h后检测细胞存活率、凋亡率、Caspase-3活性以及Caspase-3和Caspase-8 mRNA表达水平;再选择适宜的40μg/mlNaF染毒剂量组,观察在Fas受体激动剂CH11或拮抗剂ZB4作用下其细胞凋亡率、Caspase-3活性及Caspase-3和Caspase-8 mRNA表达水平的改变。结果与对照组比较,40、80μg/ml染毒组细胞存活率降低,差异有统计学意义(P<0.01);细胞凋亡率随染毒剂量的升高呈上升趋势,且40、80μg/ml染毒组细胞凋亡率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);40、80μg/ml染毒组Caspase-3活性及Caspase-3和Caspase-8 mRNA表达水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);激动剂CH11与NaF共培养对细胞凋亡显示出协同效应,拮抗剂ZB4可部分阻断NaF致SH-SY5Y细胞的凋亡。结论NaF可通过上调死亡受体Fas途径的关键酶Caspase-3和Caspase-8的表达,促进SH-SY5Y细胞凋亡。
- 何卫红徐八一徐志霞夏涛何平高萍王爱国
- 关键词：氟化物氟化钠细胞凋亡CASPASE-3CASPASE-8
- 氟对原代培养大鼠海马细胞NCAM mRNA和蛋白表达的影响被引量：4
- 2007年
- 目的探讨氟对原代大鼠海马细胞生长发育、神经细胞黏附分子(NCAM)mRNA 及蛋白表达的影响。方法原代培养大鼠海马细胞暴露于20、40和80μg/ml 氟化钠24 h 后,观察染氟前后海马细胞生长情况,采用噻唑蓝比色试验、逆转录-聚合酶链反应和蛋白印迹技术分别检测大鼠海马细胞存活情况、NCAM mRNA 和蛋白表达水平。结果与对照组相比,80μg/ml 剂量组海马细胞数量减少,突起减少、变短,细胞存活率下降。40、80μg/ml 剂量组 NCAM mRNA 水平均显著低于对照组,20μg/ml 剂量组 NCAM mRNA 水平虽与对照组之间差异无统计学意义,但存在下降的趋势,NCAM mRNA 水平与氟浓度呈现一定的剂量效应关系,且随染氟浓度升高而降低。40、80μmg/ml 剂量组细胞 NCAM-180蛋白表达水平显著低于对照组,各染氟组细胞 NCAM-140蛋白表达水平显著低于对照组,80μg/ml 剂量组细胞 NCAM-120蛋白表达水平显著低于对照组。结论氟可抑制海马细胞生长和存活,并使 NCAM mRNA 和蛋白表达水平下降,氟对发育中海马损伤可能是其神经毒性的作用位点之一。
- 夏涛张明何卫红何平王爱国
- 关键词：氟海马细胞
- 细胞内钙离子和活性氧在氟化钠致人神经母细胞瘤SH—SY5Y细胞损伤中的关系被引量：2
- 2009年
- 目的探讨细胞内钙离子水平（[Ca^2＋]i）和活性氧（ROS）在氟化钠（NaF）致人神经母细胞瘤SH—SY5Y细胞损伤中的关系。方法用40mg／LNaF对SH—SY5Y细胞进行染毒，检测在染毒不同时间（0、3、6、12、18、24h）的[Ca^2＋]，和ROS水平的变化，选择最佳染毒时间；观察最佳染毒时间（12h）40mg／LNaF与38．23mg／LBAPTA—AM或380．40mg/L乙二醇双（2-氨基乙醚）四乙酸（EGTA）或16．32mg／LN-乙酰半胱氨酸（NAC）共同和单独作用下，[Ca^2＋]i、细胞内ROS和培养液乳酸脱氢酶（LDH）水平变化。结果染毒3、6、12、18、24h，[Ca^2＋]i水平（5620．0±226．3、4775．5±85．6、3312．3±87．5、3047．0±75．0、2717．0±66．5），与0h（2115．0±24．0）比较，均明显升高（P〈0．05）；ROS水平（4449．53±324．61、7463．07±117．43、20227．33±178．04、8817．56±200．13、7975．61±92．90），与0h（4098．01±21．22）比较，除3h外也明显升高（P〈0．05）；[Ca^2＋]i、ROS达到峰值的时间分别为3、12h。[Ca^2＋]i、LDH水平，NaF组[3279．5±94．0，（1057．50±64．35）U／L]、NaF＋NAC组[3583．0±350．7，（561．02±85．50）U／L、NaF＋EGTA组[3701．5±157．7，（1074．50±86．97）U／L]、NaF＋BAPTA—AM组[2766．5±38．9，（521．43±40．80）U／L]，与对照组[2022．5±118．1，（186．97±8．73）U／L]比较，均有明显升高（P〈0．05）；ROS水平，NaF组（19003．04±332．34）、NaF＋EGTA组（19170．12±95．46）明显高于对照组（4060．98±145．66，P〈0．05）。在对ROS和LDH的影响中，NaF与NAC之间存在拮抗作用（F值分别为976．11、43．54，P〈0．05）。在对[Ca^2＋]i、ROS和LDH水平的影响中，NaF与BAPTA—AM之间存在拮抗作用（F值分别为15．65、1515．53、115．00，P〈0．05）。结论NaF诱导SH—SY5Y细胞损伤的机制可能是通过胞内钙库的释放而提高[Ca^2＋]i水平，升高的[Ca^2＋]i促使ROS�
- 徐志霞徐八一夏涛何平高萍郭丽娟牛强黄南王爱国
- 关键词：氟化钠神经母细胞瘤活性氧钙离子
