国家自然科学基金(30471849)
- 作品数：13 被引量：108H指数：5
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- 激活素受体样激酶1促进人脐静脉内皮细胞增殖和迁徙
- 2006年
- 目的:研究激活素受体样激酶1(ALK1)对人脐静脉内皮细胞的作用。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),RT-PCR分析ALK1和ALK5在HUVEC激活状态下表达的变化。脂质体转染pcDNA3.1+ALK1到HUVECs,流式细胞仪检测HUVECs增殖的改变,boyden小室检测ALK1对HUVECs迁徙的影响。结果:ALK1在HU-VEC安静状态高表达,ALK1能促进HUVECs的增殖和迁徙。结论:ALK1通过促进内皮细胞的增殖和迁徙在血管重塑中发挥作用。
- 李斌唐仕波林少芬孟晶
- 关键词：脐静脉内皮细胞细胞增殖细胞运动
- 利用血管模型体外模拟新生血管的形成被引量：1
- 2005年
- 目的:利用体外二维和三维血管模型,模拟血管的发生发展过程。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞,将内皮细胞消化到细胞培养池内,利用无血清培养基培养细胞,观察内皮细胞逐渐形成二维血管的过程;利用Ⅰ型胶原蛋白构成三维系统,将内皮细胞置于其上培养,随着三维系统溶解成油井样结构,内皮细胞在其壁上形成三维血管样结构。结果:二维、三维血管模型顺利形成,从二维血管模型观察到:内皮细胞首先形成血管网样结构, 相互联系逐渐紧密,细胞之间界限逐渐消失,形成血管壁样结构,并从不规则形状到规则的圆形。三维血管模型随三维系统溶解形成,首先形成的血管样结构不紧密,经过重塑形成规整的环状。结论:血管的形成主要经过增殖、出芽、形成、重塑这4个阶段,从结构疏松到联系紧密,从不规整到规整的环状结构。
- 李斌唐仕波马萍萍林少芬孟晶
- 关键词：新生血管化生理性
- FK506对人视网膜微血管内皮细胞增殖及凋亡的影响被引量：2
- 2006年
- 目的:观察FK506对常规及高糖培养条件下的人视网膜微血管内皮细胞(HRCECs)的增殖状态、细胞周期及凋亡的影响。方法:分离培养HRCECs,并应用第Ⅷ因子相关抗原抗体鉴定。取P3-4代HRCECs进行高糖培养(30mmol/l右旋葡萄糖)培养,应用MTT法检测其生长状态。应用100pM的FK506对常规培养的高糖培养条件的HRCECs进行干预,通过MTT法、流式细胞仪检测其对生长状态、细胞周期及凋亡的影响。结果:FK506可抑制常规及高糖培养条件下HRCECs的增殖,其可抑制高糖培养下细胞周期,但可同时减少凋亡的发生,但对常规培养的细胞周期及凋亡则无影响。结论:上述结果提示FK506可能有抑制新生血管发生的作用,成为增殖性糖尿病视网膜病变的有效药物。
- 马红婕李涛梁小玲丁小燕谢素贞唐仕波
- 关键词：糖尿病血管内皮细胞FK506细胞周期
- 色素上皮衍生因子在氧诱导血管增生性视网膜病变小鼠中的表达被引量：4
- 2007年
- 目的探讨氧诱导血管增生性视网膜病变小鼠视网膜中色素上皮衍生因子（PEDF）mRNA及蛋白的表达变化及意义。方法80只出生后2d的C57／BL6小鼠随机分为模型组（64只）和对照组（16只），出生后第7天模型组小鼠和母鼠一起放入氧气含量为75％的饲养箱中饲养，出生后第12天回到正常大气环境中饲养；对照组小鼠始终在正常大气环境中饲养。出生后第7、12、17天时，模型组及对照组在每个时间点分别取小鼠4只，荧光素心脏灌注后行视网膜铺片，荧光显微镜下观察血管分布和形态；提取模型组小鼠出生后第7、8、10、12、12．5、13、14、15、17、19天时间点的视网膜总RNA，通过逆转录-聚合酶链式反应（RT—PCR）检测PEDF、血管内皮生长因子（VEGF）、低氧诱导因子（HIF）-1α mRNA的表达变化；分别取模型组和对照组出生后第17天时的小鼠眼球，冰冻切片后通过免疫组织化学染色检测PEDF、VEGF、HIF-1α蛋白在视网膜组织中的表达变化。结果模型组小鼠在出生后第17天时视网膜有大量新生血管形成，视盘周围见大范围无灌注区PEDFmRNA表达在缺氧24h后开始下调，72h达到下降高峰，随后逐渐恢复正常水平,VEGF、HIF-1αmRNA则在高氧环境下表达下调，缺氧状态下迅速升高，于缺氧48h时到达高峰，然后缓慢下降；PEDF／VEGF、PEDF／HIF-1α比值在缺氧状态下显著降低。出生后第17天时，模型组小鼠视网膜中PEDF蛋白表达显著弱于对照组小鼠；而VEGF、HIF-1α蛋白表达则是模型组显著强于对照组。结论PEDFmRNA及蛋白在氧诱导血管增生性视网膜病变小鼠视网膜中明显下降，其趋势与VEGF和HIF-1α的变化相反，PEDF／VEGF、PEDF／HIF-1α表达平衡失调，可能是缺氧状态下视网膜新生血管生成的重要原因。
- 李涛丁小燕谢素贞马红婕唐仕波
- 关键词：动物实验
- 发状分裂相关增强子-1对血管形成相关因子作用的实验研究被引量：2
- 2006年
- 目的研究发状分裂相关增强子1(HESR1)基因在血管形成和维持中的作用。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),构建PcDNA3.1+HESR1重组质粒、RNA干扰用pSIREN+HESR1质粒。脂质体将这两个质粒分别转染到HUVEC,并以转染空白质粒体作为对照。在HUVEC内分别高表达HESR1、下调HESR1的表达,采用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR)和免疫印迹法检测HUVEC内HESR1不同表达状态时血管内皮生长因子第2受体(KDR)、激活素受体样激酶1(ALK1)、血管生成因子1(Ang1)表达的改变。结果在HUVEC内高表达HESR1基因能下调KDR的表达,上调ALK1、Ang1的表达;当抑制HESR1基因,KDR的表达上调,ALK1、Ang1的表达下调。结论HESR1基因可调控HUVEC中KDR、ALK1、Ang1的表达,在血管的形成和维持中发挥关键作用。
- 李斌唐仕波林少芬孟晶
- 关键词：转录因子血管生成诱导剂血管内皮生长因子受体2
- 氧诱导的视网膜病变小鼠模型建立方法的改良被引量：3
- 2006年
- 目的:建立简单、稳定、成模率高的氧诱导的视网膜病变小鼠模型。方法:用改良法(A组)和传统方法(B组)分别建立氧诱导的视网膜病变的C57BL/6小鼠模型,比较两组的母鼠死亡率、乳鼠成活率和成模率,视网膜冰冻切片GSL染色免疫组化观察两组的视网膜新生血管,荧光素灌注视网膜铺片检测视网膜无灌注区和新生血管的面积。结果:改良法(A组)与传统法(B组)相比较,乳鼠成活率未降低,且具有母鼠死亡率低,成模率高,动物消耗量少的特点。改良法制作的小鼠模型视网膜无灌注区和新生血管面积较传统法多而典型。结论:改良法操作简单,能构建出高效、稳定、典型的视网膜新生血管模型。该方法值得推广和借鉴。
- 丁小燕梁小玲谢素贞朱晓波唐仕波
- 关键词：动物模型小鼠
- 晚期增殖性糖尿病视网膜病变的治疗价值探讨被引量：12
- 2006年
- 目的探讨玻璃体视网膜手术对晚期增殖性糖尿病视网膜病变的治疗价值。方法回顾性分析VI期PDR患者33例42眼经标准的玻璃体视网膜手术治疗后的临床资料,对术前后视力,手术并发症及预后等进行重点分析。结果随访35眼,术后视力明显提高,0.05以上者从术前的6/42眼(14.29%)提高到术后的15/35眼(42.86%),其中12眼(80%)视力>0.1。一次手术视网膜复位27/35眼(77.14%),至随访末期(9月)31/35眼(88.57%)。术前伴有视盘萎缩,视网膜血管闭塞,光定位不准,新生血管性青光眼等预后较差,但术后视力仍有11/16(68.8%)眼有不同程度的提高,6/16(37.5%)眼视力≥FC。结论玻璃体视网膜手术可以部分改善晚期PDR患者的视功能,即便是合并严重缺血的病例仍有一定的治疗价值。
- 李双农唐仕波李加青马红婕丁小燕李涛闫宏
- 关键词：增殖性糖尿病视网膜病变玻璃体视网膜手术视力预后
- HESR1基因在血管新生中作用的初步研究
- 2005年
- 目的研究转录因子HESR1在血管新生中的作用。方法检测内皮细胞激活状态HESR1表达的影响,克隆HESR1基因,转染到HUVEC,绿色荧光和PCR观察HESR1在内皮细胞的表达,流式细胞仪检测它对血管内皮细胞增殖,boyden小室检测对细胞迁移的影响,建体外二维血管模型,观察HESR1对血管形成的影响。结果内皮细胞激活状态HESR1的表达下降,HESR1基因能抑制内皮细胞的增殖和迁移,减少血管新生。结论HESR1基因通过抑制内皮细胞的增殖和迁移,使内皮细胞从激活状态转入安静状态,减少血管的形成,维持血管的稳定状态。
- 李斌唐仕波林少芬肖迎孟晶
- 关键词：新生血管
- 胰岛素控制血糖对糖尿病大鼠早期视网膜血管的影响被引量：5
- 2007年
- 目的:探讨胰岛素控制血糖对糖尿病早期大鼠视网膜血管形态改变和血管内皮细胞生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响。方法:实验动物Wistar大鼠分正常对照组、糖尿病组、糖尿病血糖严格控制组和糖尿病血糖非严格控制组。链尿佐菌素(Streptozotocin,STZ)诱导糖尿病动物模型,动物成模3周后糖尿病血糖严格控制组及血糖非严格控制组大鼠予胰岛素治疗,20d后处死,行Fluorescein isothiocyanate-dextran(FITC-Dextran)灌注视网膜血管铺片观察大鼠视网膜血管形态变化,并行VEGF免疫荧光染色观察大鼠视网膜VEGF的表达改变。结果:FITC-Dextran灌注示糖尿病血糖非严格控制组大鼠视网膜浅层血管多处荧光素聚集,不均匀分布,深层毛细血管局部扩张、迂曲;血糖严格控制组视网膜血管管径较均匀一致,无局部扩张或狭窄。糖尿病血糖非严格控制组VEGF高表达,血糖严格控制组较糖尿病组、血糖非严格控制组视网膜VEGF表达下降,统计学比较具有显著性差异(P<0.05)。结论:胰岛素治疗严格控制血糖至正常水平可以降低糖尿病早期大鼠视网膜VEGF的表达、减轻视网膜血管损害;血糖波动会加重糖尿病视网膜病变的发展。眼科学报2007;23:205-211.
- 王玉粦马萍萍李斌林少芬吴炎冯锦尚唐仕波
- 关键词：糖尿病视网膜病变胰岛素血管内皮细胞生长因子
- 糖尿病性视神经病变的临床分析被引量：54
- 2005年
- 目的观察糖尿病性视神经病变的临床表现、眼底血管造影和视野特征.方法对173例321眼0～Ⅴ期糖尿病视网膜病变患者的临床表现、视力、视野、荧光造影等临床资料进行分析.结果 321眼中有视神经病变者共155眼,占48.3%.临床表现多样,轻者无任何症状,重者视力下降明显.眼底检查可有视盘水肿、色淡、充血等多种改变.荧光造影中主要表现为视盘新生血管40眼,占25.8%、视盘充盈缺损21眼,占13.5%、视盘水肿45眼,占29.0%及视盘晚期染色49眼,占31.6%.0期DR患者中,25.9%视神经有异常改变.Ⅰ～Ⅴ期DR患者视神经异常率分别为25.0%,37.5%,43.0%,65.1%,85.1%.结论糖尿病性视神经病变发生率高,临床表现多种多样.糖尿病视网膜病变越严重,发生糖尿病视神经病变的可能性越大,但两者不平行.荧光造影检查对糖尿病视神经病变的早期诊断有重要意义.糖尿病性视神经病变是影响视力和预后的重要因素,应引起眼科医生的高度重视.
- 丁小燕欧杰雄马红婕闫宏唐仕波
- 关键词：糖尿病性视神经病变缺血性视神经病变糖尿病视网膜病变
