广州市科技计划项目(10C36091669)
- 作品数：7 被引量：10H指数：3
- 相关作者：陆建华熊家祥胡春奎陈昊杨雪更多>>
- 相关机构：广州军区广州总医院第三军医大学南方医科大学更多>>
- 发文基金：广州市科技计划项目广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 水溶性脂聚体介导NR2B siRNA治疗神经病理性痛的实验研究
- 2011年
- 目的探讨水溶性脂聚体（WSLP）介导含2B亚基的N-甲基-D-天冬氨酸受体小干扰RNA（NR2B siRNA）治疗大鼠神经病理性痛的可行性。方法健康雄性SD大鼠100只，周龄6周，体重180-200g，采用随机数字表法，将大鼠随机分为5组（n=20）：对照组（C组）、假手术组（S组）、神经病理性痛组（NP组）、WSLP．NR2BsiRNA组（w组）、WSLP-阴性对照NR2BsiRNA（WN组）。采用坐骨神经分支部分结扎法制备大鼠神经病理性痛模型。c组不予任何处理；S组仅暴露坐骨神经，不牵拉和损伤神经；NP组于制备模型后即刻鞘内注射生理盐水20μl；W组和WN组于制备模型后即刻分别鞘内注射相应的siRNA20出。于模型制备前1d及制备后3、7、14和21d时测定机械缩足反应阈值（MWT）及热缩足反应持续时间（TWD），模型制备后3d，痛阈测定结束后，每组取10只大鼠，取L4-6节段背根神经节，测定NR2BmRNA及其蛋白的表达水平。结果与S组比较，NP组、W组和WN组MWT降低，TWD延长，NR2BmRNA及其蛋白表达上调（P〈0．05或0．01），c组上述指标差异无统计学意义（P〉0．05）；与NP组比较，w组MWT升高，TWD缩短，NR2BmRNA及其蛋白表达下调（P〈0．01），WN组上述指标差异无统计学意义（P〉0．05）。结论WSLP不仅成功介导NR2BsiRNA，抑制NR2B的表达，还可减轻大鼠神经病理性痛。
- 陆建华屠伟峰陈昊熊家祥胡春圭施冲
- 关键词：N-甲基-D-天冬氨酸小分子干扰神经痛
- NMDA受体2B亚基在慢性疼痛中的作用研究进展被引量：3
- 2010年
- 慢性、持续的疼痛可能是病人就医的最常见的原因，因此，慢性疼痛的发生机制及治疗手段的研究备受重视。新近的研究发现．N-甲基-D-天冬氨酸受体（N—methyl—D—aspartate receptor，NR）在痛敏的产生和维持方面起关键作用，
- 陆建华于英妮胡春奎施冲
- 关键词：慢性疼痛N-甲基-D-天冬氨酸受体NMDAB亚基受体2病人就医
- WSLP运载siRNA抑制炎性疼痛大鼠脊髓背角 NMDA 受体1基因表达的可行性被引量：1
- 2013年
- 目的:探讨低分子量聚乙烯亚胺(PEI)和胆固醇组成的水溶性脂聚体(WSLP)运载siRNA抑制炎性疼痛大鼠脊髓背角(SCDH)N-甲基-D-天冬氨酸受体功能亚基(NR1)基因表达的可行性及其对炎性疼痛大鼠机械性痛阈值的影响。方法:将WSLP直接与靶向NR1的siRNA连接形成WSLP/siRNA复合物,乱序siRNA作为对照(WSLP/scRNA);然后分别检测鞘内注射WSLP/siRNA对炎性痛模型大鼠SCDH NR1转录水平及蛋白水平表达的影响,并且测定鞘内注射此复合物后炎性痛大鼠50%机械性痛阈值的变化。结果:WSLP/siRNA注射后3 d,炎性疼痛大鼠SCDH NR1转录水平表达下降41%(P<0.01),蛋白水平的表达相应下降58%(P<0.01),WSLP/scRNA及PEI/siRNA注射后NR1转录水平及蛋白水平的表达无明显变化。WSLP/siRNA鞘内注射后3、7、14及21 d炎性痛大鼠的50%机械性痛阈值显著增高(P<0.01),WSLP/scRNA及PEI/siRNA均无此作用。结论:WSLP可有效运载siRNA抑制慢性炎性痛大鼠NR1的过度表达,从而治疗炎性疼痛大鼠痛觉过敏。
- 马国亮杨雪董文芳彭捷陆建华党健
- 关键词：炎性疼痛小干涉RNA
- 水溶性脂聚体可运载N-甲基-D-天冬氨酸受体2B小干涉RNA治疗慢性炎性疼痛被引量：4
- 2013年
- 目的慢性炎性疼痛的基因治疗缺乏安全且高效的载体，本实验探讨了低分子量聚乙烯亚胺（polyetllylenimine，PEI）和胆固醇组成的水溶性脂聚体（water-soluble lipopolymer，WSLP）运载N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基（N-Methyl-D-aspartic acid receptor2B，NR2B）小干涉RNA（small interfering RNA，siRNA）治疗大鼠慢性炎性疼痛的可行性。方法将WSLP直接与靶向NR2B的siRNA连接形成WSLP／siRNA复合物，乱序siRNA作为对照（WSLP／scRNA）；然后检测鞘内注射WSLP／siRNA对完全弗氏佐剂（freund＇s adjuvant complete，CFA）炎性痛模型大鼠脊髓背角（spinal cord doral horn，SCDH）NR2B蛋白表达的影响。并且测定鞘内注射此复合物后炎性痛大鼠机械缩足反射阈值（mechanical withdrawal threshold，MWT）及热缩足反射持续时间（thermal withdrawal duration，TWD）的变化。结果WSLP／siRNA注射后3d，炎性疼痛大鼠SCDH NR2B蛋白水平的表达与CFA组比较显著下降58％（P〈0．01），WSLP／scRNA及PEI／siRNA注射后NR2B的表达无明显变化（P〉0．05）。WSLP／siRNA鞘内注射后3、4d及5d炎性痛大鼠的MWT[（3d：（9．2±1．3）；4d：（9．8±1．2）；5d：（9．5±．2）]较CFA组[（3d：（4．6±1．2）；4d：（4．9±1．8）；5d：（5．0±1．8）]显著增高（P〈0．01），TWD[（3d：（3．27±0．32）s；4d：（3．83±0．49）s；5d：（3．57±0．33）s]较CFA组[（3d：（6．71±0．45）s；4d：（6．97±0．54）s；5d：（6．63±0．38）s]显著缩短（P〈0．01），WSLP／scRNA及PEI／siRNA均无此治疗作用（P〉0．05）。结论WSLP可有效运载siRNA抑制CFA所致慢性炎性痛大鼠NR2B的过度表达，从而对炎性疼痛大鼠具有治疗作用。
- 杨雪董文芳彭捷熊家祥陆建华
- 关键词：小干涉RNA炎性疼痛
- 水溶性脂质体运载基因药物复合物治疗大鼠神经病理性痛
- 2013年
- 背景:有研究报道病毒载体运载N-甲基-D天冬氨酸受体1小干扰RNA可有效缓解大鼠炎性疼痛,但病毒载体存在安全隐患。目的:探讨水溶性脂质体运载N-甲基-D天冬氨酸受体1小干扰RNA在体内外沉默N-甲基-D天冬氨酸受体1的效应和治疗神经病理性痛的可行性。方法:将PC12随机分为阴性转染组、对照转染组和水溶性脂质体转染组,分别以N-甲基-D-天冬氨酸受体1小干扰RNA、聚乙烯亚胺与N-甲基-D-天冬氨酸受体1小干扰RNA的复合物及水溶性脂质体与N-甲基-D-天冬氨酸受体1小干扰RNA的复合物转染PC12细胞,检测各组N-甲基-D-天冬氨酸受体1基因mRNA及蛋白水平表达的变化。将48只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、聚乙烯亚胺组及水溶性脂质体组,后3组建立大鼠神经病理性疼痛模型,并分别鞘内注射生理盐水、聚乙烯亚胺与N-甲基-D-天冬氨酸受体1小干扰RNA的复合物和水溶性脂质体与N-甲基-D-天冬氨酸受体1小干扰RNA的复合物;假手术组只暴露坐骨神经。结果与结论:水溶性脂质体转染组N-甲基-D-天冬氨酸受体1的mRNA与蛋白表达水平明显低于其他两组(P<0.01)。与假手术组比较,模型组、聚乙烯亚胺组及水溶性脂质体组N-甲基-D-天冬氨酸受体1的mRNA和蛋白表达上调,累积疼痛评分升高(P<0.01);与模型组比较,水溶性脂质体转染组脊髓背角N-甲基-D-天冬氨酸受体1mRNA与蛋白表达及累积疼痛评分下降(P<0.01),聚乙烯亚胺组上述指标无明显变化(P>0.05)。表明在体内条件下水溶性脂质体可有效运载N-甲基-D-天冬氨酸受体1小干扰RNA,抑制N-甲基-D-天冬氨酸受体1的过度表达,还可减轻大鼠神经病理性痛。
- 胡春奎陆建华陈昊熊家祥
- 关键词：生物材料PCI2细胞神经病理性痛
- 水溶性脂质体运载siRNA沉默大鼠脊髓NR1表达可行性的实验研究
- 2012年
- 目的探讨水溶性脂质体(WSLP)运载N-甲基-D-天冬氨酸受体1(NR1)小干扰RNA(siRNA)沉默大鼠脊髓NR1表达的可行性。方法根据文献合成WSLP,将合成的WSLP与siRNA连接形成WSLP/siRNA。将18只SD大鼠随机均分为3组:NS组(鞘内注射生理盐水)、WSLP/siRNA组(鞘内注射WSLP/siRNA混合物)、裸siRNA组(鞘内注射裸siRNA)。通过实时定量PCR和Western blot技术分别检测各组大鼠脊髓NR1 mRNA和蛋白表达水平的变化。结果 NS组与裸siRNA组脊髓NR1 mRNA和蛋白表达水平无明显差异,WSLP/siRNA组脊髓NR1mRNA和蛋白表达水平下降。结论 WSLP可有效运载siRNA沉默大鼠脊髓NR1 mRNA和蛋白表达,为WSLP运载NR1-siRNA治疗慢性疼痛的实验打下基础。
- 胡春奎陆建华陈昊熊家祥
- 关键词：N-甲基-D-天冬氨酸受体1小干扰RNA
- 水溶性脂质体运载siRNA对神经病理性疼痛大鼠脊髓NMDA受体1的影响被引量：3
- 2012年
- 目的探讨水溶性脂质体(WSLP)运载N-甲基-D-天冬氨酸受体1(N-methyl-D-aspartate receptor1,NMDAR1)利用小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)治疗神经病理性疼痛的可行性。方法采用坐骨神经分支选择结扎切断(spared nerve injury model,SNI)制作神经病理性疼痛大鼠模型,选取鞘内置管成功SD大鼠24只,随机均分为四组:S组,仅暴露坐骨神经,不结扎;C组,SNI+鞘内注射生理盐水;W组,SNI+鞘内注射WSLP/siRNA混合物;L组,SNI+鞘内注射乱序siRNA与WSLP混合物。通过实时定量PCR和western-blot技术分别检测各组大鼠脊髓背角NMDAR1 mRNA相对表达和NMDAR1蛋白表达水平的变化。结果 C组和L组第4天脊髓背角NMDAR1 mRNA相对表达和NMDAR1蛋白表达水平显著高于S、W组(P<0.05)。结论 WS-LP可有效运载siRNA抑制神经病理性疼痛大鼠NMDAR1的过度表达。
- 胡春奎陆建华陈昊熊家祥林勤剑
- 关键词：NMDAR1SIRNA神经病理性疼痛
