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IL-22在原发性胆汁性肝硬化中的表达及其临床意义被引量：5: 2010年; 目的探讨原发性胆汁性肝硬化（PBC）外周血中IL-22的表达水平及其临床意义。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测PBC患者血清中IL-22水平；全自动生化仪检测TBIL，γ-GT；并以健康体检者为对照组。结果40例PBC患者血清中IL-22水平（810．36±30．52pg／m1）明显高于健康对照组（361．51±30．52pg／ml，P〈0．05），且IL-22水平与TBIL和γ-GT呈显著正相关（r=0．386，P〈0．05；r=0．356，P〈0．05）。结论IL-22可能参与了PBC的发病机制，并可能成为一个潜在的治疗靶点。; 王淇泓周晔王爱华竺蓓邓安梅仲人前; 关键词：原发性胆汁性肝硬化 IL-22 酶联免疫吸附试验

原发性胆汁性肝硬化患者外周血TNFSF9的表达及其疾病关联性被引量：1: 2010年; 目的研究原发性胆汁性肝硬化患者外周血单个核细胞TNFSF9的表达及其临床意义。方法以40例健康人群作为对照，采用定量逆转录PCR检测40例原发性胆汁性肝硬化患者外周血单个核细胞TNFSF9的表达水平，血清中sTNFSF9的水平，并进一步分析其与Mayo评分的相关性。结果原发性胆汁性肝硬化患者外周血TNFSF9的表达在蛋白水平（1107．00±436．12）显著高于健康对照组（122．70±62．81）；TNFSF9 mRNA水平（4．96±0．39）也较健康对照组（1．04±0．22）高，且均与Mayo评分呈负相关（rs=0．327，P=0．041；rs=-0．400，P=0．013）。结论TNFSF9可能参与了原发性胆汁性肝硬化的发病机制，是潜在的治疗靶点之一。; 王淇泓周晔胡志德王爱华竺蓓邓安梅仲人前; 关键词：原发性胆汁性肝硬化

QLFATINSTL(93-102aa)是隐球菌抗原MP98 CTL优势表位被引量：1: 2008年; 目的鉴定隐球菌抗原MP98中的HLA-A*0201限制性CD8+CTL表位。方法应用数据库SYFPEITHI预测隐球菌MP98中可能存在的HLA-A*0201限制性CD8+CTL表位,经流式细胞术分析各抗原肽与HLA-A*0201的亲合力,经时间分辨荧光法检测外周血单个核细胞(PBMCs)对各抗原肽产生的增殖反应,经细胞毒性实验研究各抗原肽诱导的特异性T细胞的细胞毒杀伤活性,逐步鉴定MP98的HLA-A*0201限制性CD8+CTL表位。结果位于MP98氨基酸序列肽3(93-102aa)与HLA-A*0201分子具有较高的亲合力,并都能刺激HLA-A*0201阳性个体PBMC增殖,并诱导产生具有特异性杀伤活性的CTL。结论肽3 QLFATINSTL(93-102aa)是抗原MP98上HLA-A*0201限制性CD8+CTL的优势表位,可作为隐球菌疫苗设计的候选表位。; 谷明莉邓安梅周晔陈燕陈波仲人前温海陈孙孝; 关键词：隐球菌细胞毒性T细胞抗原表位

CD4^＋T细胞活化诱导细胞凋亡在原发性胆汁性肝硬化小鼠模型中的作用研究被引量：3: 2008年; 目的研究CD4^＋T细胞活化诱导细胞凋亡（activation induced cell death，AICD）在poly I：C诱导的原发性胆汁性肝硬化（研marybiliarycirrhosis，PBC）小鼠模型中的作用。方法30只C57BL／6雌性小鼠随机分为模型组和对照组，模型组小鼠腹腔注射poly I：C5mg／kg，对照组小鼠注射等体积无菌PBS，16周后通过测定血清抗线粒体抗体（antimitochondrial antibody,AMA）、碱性磷酸酶（alkali phosphatase，ALP）及肝脏HE染色验证模型。磁珠分离小鼠脾脏CD4^＋T细胞，分别以ConA和anti—CD3体外诱导细胞凋亡；实时荧光定量PCR测定T细胞中凋亡相关基因Fas、FasL和TRAIL（tumor necrosis factor-related apoptosis—inducing ligand）的表达；Westernblot检测CD4^＋T细胞中抗凋亡基因Bcl-2的表达。结果poly I：C注射16周后模型组小鼠血清AMA均为阳性，同时肝组织汇管区出现不同程度的炎性细胞浸润，而对照组AMA均为阴性，肝组织未出现明显病变。模型组小鼠血清ALP[（110．4±18．3）U／L]显著高于对照组[（52．2±15．4）U／L]，P〈0．001；模型组小鼠脾CD4^＋T细胞AICD显著低于对照组（P〈0．001），同时定量PCR结果表明：FasLmRNA水平较对照组有所降低（P〈0．05），而两组Fas水平差异无统计学意义（P〉0．05），TRAIL水平则显著低于对照组（P〈0．001）；Westernblot结果表明模型鼠的抗凋亡蛋白Bcl-2的表达较对照组显著增高。结论TH1细胞的凋亡缺陷可能在PBC小鼠模型的发病机制中有重要作用，该缺陷可能是由于自身免疫机制引起凋亡相关分子Fas体系及TRAIL的表达变化引起，同时通过上调Bcl-2的表达抑制自身反应性T细胞的凋亡。; 蒋廷旺邓安梅吴传勇陈波周晔钱琤谷明莉陈燕仲人前; 关键词：聚肌胞苷酸凋亡

隐球菌保护性肽表位GMFDGLSGV多聚体的免疫原性研究: 2008年; 目的探讨纯化的隐球菌抗原肽GMFDGLSGV二聚体、四聚体、八聚体重组蛋白激发细胞毒性T淋巴细胞(Cytotoxic T lymphocyte,CTL)免疫应答的能力,为新型隐球菌疫苗的研制打下基础。方法通过细胞增殖和细胞毒性实验,研究纯化的GMFDGLSGV单体、二聚体、四聚体、八聚体重组蛋白刺激外周血单个核细胞(PBMC)产生的增殖反应和细胞毒活性,初步鉴定重组多聚体的免疫原性。结果10例HLA-A*0201阳性个体PBMC对八聚体的平均SI为37.4±3.07;增殖反应明显高于四聚体(平均SI为20.1±1.37)、二聚体(平均SI为14.1±1.06)、单体(平均SI为11.4±0.68)以及阴性对照(平均SI为1±0.10)引起的细胞增殖反应(P<0.01)。在抗原肽诱导的CTL细胞毒活性中,HLA-A*0201阳性个体PBMC对八聚体、四聚体、二聚体、单体及阴性对照组均表现不同程度的杀伤活性,平均活性分别为48.1±4.28、23.9±2.20、16.3±1.27、13.1±1.10、1.0±0.1(P<0.01)。结论本研究得到的重组优化八聚体具有较好的免疫原性,能有效刺激PBMC产生细胞增殖反应和细胞毒活性,为进一步开发有效的隐球菌疫苗打下了基础。; 谷明莉钱周晔陈波陈孙孝邓安梅仲人前; 关键词：结核分枝杆菌多聚体疫苗

隐球菌性脑膜炎患者外周血中TLR4的表达以及血清中TNF-α，IL-10的水平研究被引量：1: 2010年; 目的探讨Toll样受体4（TLR4）在隐球菌性脑膜炎患者外周血中的表达，以及研究血清中TNF—α，IL-10的变化情况。方法收集25例隐球菌性脑膜炎患者和25例健康体检者全血，采用荧光定量PCR（FQ—PCR）检测TLR2，TLR4的mRNA表达。ELISA法检测血清中TNF—α，IL-10的表达。结果隐球菌性脑膜炎患：者TLR4 mRNA的表达显著低于对照组（0．35±0．18）（P〈0．05），TLR2均无显著变化（0．87±0．23）（P〉0．05）。血清中的IL-10显著升高（4．25±1．30）pg／ml（P〈0．05），TNF—α的变化不显著（1．49±0．87）pg／ml（P〉0．05）。结论隐球菌性脑膜炎患者TLR4 mRNA表达显著下降，可能在隐球菌性脑膜炎的发病过程中起一定的作用。; 陈燕周晔邓安梅仲人前陈孙孝; 关键词：隐球菌性脑膜炎 TOLL样受体4 TOLL样受体2 荧光定量PCR

原发性胆汁性肝硬化动物模型外周血自然杀伤性T淋巴细胞及相关细胞因子表达分析被引量：2: 2008年; 目的了解聚肌苷酸胞苷酸（polyl：C）在C57BIM6小鼠中建立的原发性胆汁性肝硬化（primary biliary cirrhosis，PBC）动物模型外周血T淋巴细胞表型。方法20只雌性8周龄C57BIM6小鼠随机分为模型组和对照组，polyI：C5mg／kg腹腔注射模型组小鼠，对照组小鼠注射等体积无菌PBS，每周注射2次，16周后处死，然后进行肝组织苏木精-伊红（H．E）染色，间接免疫荧光法测定血清抗线粒体抗体（AMA），生化分析仪测定血清碱性磷酸酶（ALP）水平；流式细胞仪分析2组小鼠的外周血CD4＋、CD8＋T淋巴细胞及自然杀伤性T淋巴细胞（NKT）所占比例；ELISA法测定血清IL4和1干扰素（IFN-1）含量。结果polyI：C注射16周后建立了符合PBC实验室诊断指标的动物模型：汇管区炎性浸润、血清AMA阳性、血清ALP水平升高；模型组小鼠外周血CD4＊T淋巴细胞比例为（25．45±1．12）％，对照组为（26．72±O．63）％，差异无统计学意义（t=0．314，P〉0．05），模型组小鼠外周血CD8＋T淋巴细胞比例为（18．3±0．91）％，对照组为（17．8±0．58）％，差异无统计学意义（t=0．226，P〉0．05）；而模型组小鼠外周血NKT淋巴细胞比例为（11．56±5．09）％，对照组为（1．26±0．53）％，模型组高于对照组（t：9．504，P〈0．01），同时模型组小鼠血清IL4含量为（22．19±2．31）pg／ml，对照组为（8．72±0．87）pg／ml，差异有统计学意义（t：58．06，P〈0．01），模型组小鼠血清IFN-1的含量为（3．34±0．76）ng,／ml，对照组为（1．14±O．21）ng,／ml，差异有统计学意义（t=23．31，P〈0．01）。结论polyI：C诱导的PBC动物模型外周血NKT淋巴细胞比例显著增加，同时细胞因子IL4及IFN-1含量显著升高；NKT淋巴细胞可能在PBC模型及PBC的发病中发挥重要作用。; 蒋廷旺邓安梅吴传勇谷明莉周晔陈燕陈波钱琤仲人前; 关键词：肝硬化胆汁性 T淋巴细胞

中西医结合治疗原发性胆汁性肝硬化小鼠疗效分析被引量：2: 2009年; 探讨熊去氧胆酸(UDCA)和"一贯煎"在原发性胆汁性肝硬化小鼠中的疗效。对polyI∶C注射的C57BL/6雌性小鼠分别给予UDCA、"一贯煎"和两种药物联合治疗,分析不同药物治疗组血清ALP、-γGT的变化,实时荧光定量RT-PCR方法检测脾脏单个核细胞BCMA mRNA的表达,并分析肝门管区单个核细胞浸润率。结果表明,PBC模型鼠肝门管区单个核细胞浸润率、脾脏单个核细胞BCMA mRNA的表达较正常小鼠明显增加(P<0.05);不同治疗组较模型对照组ALP、-γGT显著下降(P<0.05),"一贯煎"或联合治疗还能减少肝门管区单个核细胞浸润率、下调脾脏单个核细胞BCMAmRNA和ALP。"一贯煎"或联合熊去氧胆酸治疗PBC小鼠疗效更好,为以后中西医联合治疗PBC提供了理论依据和技术支持。; 唐裕杰吴传勇蒋廷旺谷明莉陈燕周晔韩志君邓安梅仲人前; 关键词：B细胞成熟抗原原发性胆汁性肝硬化熊去氧胆酸一贯煎

检测隐球菌患者外周血中Toll样受体4的表达及临床意义: 2010年; 目的:探讨Toll样受体4(TLR4)在隐球菌性脑膜炎患者外周血中蛋白的表达。方法:收集30例隐脑患者和30例健康体检者全血,采用流式细胞术检测TLR4的蛋白表达,ELISA法检测血清中IL-12、IL-4的表达,并用免疫散射法检测血清IgG、IgA、IgM的含量,并分析TLR4与它们的相关性。结果:隐球菌性脑膜炎患者TLR4蛋白表达显著低于对照组(P<0.05),且TLR4蛋白表达水平与IgG、IL-12显著相关(分别为r=0.4369、P<0.001,r=0.5344、P<0.001),与IL-4(r=0.0111,P=0.6168)不相关。结论:隐脑患者TLR4蛋白表达显著下降,IgG、IL-12与TLR4蛋白的变化具有一定的相关性,为我们进一步研究隐脑的致病机制打下基础。; 陈燕周晔邓安梅仲人前陈孙孝; 关键词：流式细胞术 TOLL样受体4

Siglec-1与原发性胆汁性肝硬化的相关性研究: 2009年; 目的检测Siglee-1（sialic acid—binding immunoglobulin—like lectins，唾液酸结合的免疫球蛋白样凝集素，CD169）在原发性胆汁性肝硬化（primary biliary cirrhosis，PBC）患者外周血单核细胞上的蛋白及mRNA表达水平，并探讨其在原发性胆汁性肝硬化发生发展中的作用。方法流式细胞术检测45例PBC患者及36例健康对照者、40例肝炎后肝硬化对照者外周血CD14，CD169双阳性细胞的表达率；实时荧光相对定量RT—PCR方法检测入选对象单核细胞中Siglec—1mRNA的含量；生化常规测定所有入选者血清生化指标水平。结果流式细胞术检测结果显示：PBC组单核细胞cD14，CD169双阳性率为13．0％±2．5％，显著高于健康对照组（1．0％±0．2％，P〈0．01）及肝炎后肝硬化对照组（4．1％±0．5％，P〈0．01）。PBC组Siglec—1mRNA的相对表达量为健康对照组的3．42倍，差异具有统计学意义（P〈0．01）。结论PBC患者单核细胞表面siglec-1蛋白表达显著增高，mRNA含量显著增加，说明PBC患者外周血单核细胞已经发生巨噬细胞化，单核巨噬细胞介导的免疫炎症反应在PBC发生发展过程中起重要作用。; 周晔奚伟强蒋廷旺陈燕姚定康邓安梅仲人前; 关键词：原发性胆汁性肝硬化 SIGLEC-1 流式细胞术实时荧光定量PCR

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