国家自然科学基金(31201103)
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
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- 相关机构：中国医学科学院基础医学研究所更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- miR-34a-5p抑制K562细胞红系分化被引量：4
- 2015年
- 目的探索miR-34a-5p对K562细胞红系分化的影响。方法分别用miR-34a-5p模拟物和反义抑制寡核苷酸转染K562细胞,用real-time PCR法检测过表达或干扰效率,并进一步用流式细胞术和联苯胺染色法检测K562细胞向红系的分化情况;通过Western blot方法检测miR-34a-5p的靶基因。结果 miR-34a-5p在K562细胞红系分化过程中呈现表达下降趋势;在K562细胞中过表达miR-34a-5p可抑制hemin诱导的红系分化(P<0.05);反之,干扰K562内源的miR-34a-5p表达会对K562红系分化产生促进作用(P<0.01);另一方面,miR-34a-5p通过靶向抑制c-MYB的表达抑制细胞向红系分化。结论 miR-34a-5p通过抑制c-MYB在K562细胞早期红系分化过程中发挥促进作用。
- 赵华路卜雯婧李玉霞翟頔温馨余佳
- 关键词：K562C-MYB红系分化
- miR-24通过靶基因Sp1调控β-类珠蛋白表达被引量：3
- 2013年
- 为了研究miR-24对于珠蛋白表达的调控作用,并明确其作用机制。首先采用定量PCR的方法确定miR-24在红系分化过程中的表达变化情况,以及miR-24过表达后珠蛋白的表达变化情况。进而通过报告基因实验以及Western blotting的方法确定miR-24的靶基因。通过表型回复实验证明miR-24是否通过靶基因调控珠蛋白的表达。结果发现在hemin诱导的K562细胞以及EPO诱导的造血干/祖细胞向红系分化过程中,miR-24表达上调,在K562细胞中过表达miR-24可以促进红系分化过程中ε-和γ-珠蛋白的表达上调,进一步的研究表明miR-24是通过靶基因Sp1来行使对珠蛋白的调控作用的。以上结果表明miR-24通过负调节其靶基因Sp1促进红系分化过程中珠蛋白的表达上调。
- 马艳妮王斌巩蓓王芳赵华路张俊武余佳
- 关键词：珠蛋白SP1红系分化K562细胞
- 转录因子Sp1抑制K562细胞红系分化被引量：2
- 2013年
- 目的研究转录因子Sp1在K562细胞诱导向红系分化过程中的表达变化,并确定其对于红系分化及珠蛋白表达的影响。方法用定量PCR及Western blot的方法确定Sp1在红系分化过程中的表达情况。通过RNAi的方法抑制Sp1的表达,并通过联苯胺染色确定K562细胞中血红蛋白的表达情况,同时定量PCR的方法分析红系分化相关基因的表达,流式细胞技术检测红系分化过程中表面标志蛋白的表达情况。结果在hemin诱导的K562细胞以及促红细胞生成素EPO诱导的造血干细胞向红系分化过程中,Sp1的mRNA及蛋白水平均呈明显下降,提示其可能负调节红系分化过程。在K562细胞中抑制Sp1的表达则可明显提高K562细胞中的血红蛋白含量,促进γ-,ε-珠蛋白,CD71,CD235a基因的表达,同时CD71,CD235a阳性细胞比例明显增加。结论以上结果说明转录因子Sp1负调节红系分化过程,抑制Sp1的表达可提高K562细胞中珠蛋白的表达,并促进K562细胞向红系分化。
- 马艳妮巩蓓董贺王斌阎赟梦张俊武余佳
- 关键词：SP1K562细胞红系分化
