天津市自然科学基金(07JCZDJC07700)
- 作品数：7 被引量：15H指数：3
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- 相关机构：天津医科大学总医院天津市神经病学研究所更多>>
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- RNA干扰技术靶向P13K／AKT信号通路抑制胃腺癌SGC7901细胞侵袭转移的研究被引量：5
- 2009年
- 目的观察应用RNA干扰（RNAi）技术敲低PIK3R1、AKT1表达后在体外对胃腺癌SGC7901细胞侵袭的抑制作用。方法将重组腺病毒质粒表达载体rAd5-A—P转染至SGC7901细胞。RealtimePCR和Westernblot分别检测转染前后目的基因mRNA和蛋白的表达水平，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞外基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9的浓度变化。划痕、Transwell、3-D Matrigel基质生长实验评价肿瘤细胞侵袭能力的变化。结果rAd5-A-P可以有效抑制PIK3R1、AKTI的表达，MMP-2、MMP-9表达下调，基质金属蛋白酶组织抑制因子（TIMP）-2表达上调，ELISA证实细胞外MM9-2、MMP-9浓度在治疗组明显减低。划痕实验显示rAd5-A—P转染组细胞转移运动能力明显减弱，Transwell穿过细胞数结果：对照组（105．0．4-4．0）和无义序列组（102．5±6．4），rAd5-A．P转染组（67．0±3．9），3-D的Matrigel基质生长实验显示与对照组和无义序列组比较，rAd5-A—P转染组细胞形成的细胞团块较小。结论靶向AKT1、PIK3R1的RNAi技术可以序列特异性地抑制PIK3R1、AKT1表达，在体外明显抑制SGC7901细胞的侵袭能力。
- 付彦超张靖张凯茹张庆瑜康春生王涛
- 关键词：胃腺癌RNA干扰基因治疗
- 利用组织芯片技术研究Akt1 MMP2和PTEN在胃腺癌中的表达及其相关性被引量：3
- 2009年
- 目的：研究MMP2和PTEN在正常胃粘膜、癌旁组织和胃腺癌中的表达及相关性。方法：利用组织芯片技术通过免疫组织化学SP法检测胃腺癌、癌旁组织及正常胃粘膜中Akt1、MMP2和PTEN的表达。结果：在正常胃粘膜、癌旁组织和胃癌组织中，Akt1、MMP2和PTEN表达的阳性率差异均有显著性（P〈0．05）；在高、中、低分化不同病理级别的胃腺癌中MMP2和PTEN的表达率差异有显著性（P〈0．05），Akt1表达率差异无显著性（P〉0．05），但高分化和低分化比较差异显著性（P〈0．05）。Spearmen等级相关分析得出，PTEN的表达与Akt1、MMP2的表达呈负相关（P〈0．05），Akt1的表达与MMP2的表达呈正相关（P〈0．05）。结论：Akt1、MMP2在癌组织中表达的阳性率高于正常胃粘膜，且随病理级别的升高阳性率也升高，PTEN在癌组织中的表达则与之相反，它们对于胃癌的发生发展可能有重要作用。
- 崔小伟张庆瑜康春生赵凤娟宋小妹刘建
- 关键词：胃腺癌AKTMMP2PTEN组织芯片
- 糖原合成酶激酶-3在胃肠道肿瘤的作用及其研究进展被引量：1
- 2009年
- 糖原合成酶激酶-3(GSK-3)是一种多功能的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。实验证实,GSK-3通过多种途径在胃肠道肿瘤的生长、增殖及凋亡等方面起重要作用。现就近年来GSK-3在胃肠道肿瘤的研究进展作一综述。
- 张靖张庆瑜
- 关键词：糖原合成酶激酶-3胃肠道肿瘤治疗靶点
- 腺病毒介导的靶向蛋白激酶B1和环氧合酶2短发夹RNA抑制人胃腺癌细胞的侵袭和转移
- 2009年
- 目的构建靶向性蛋白激酶B1（Aktl）和环氧合酶2（COX-2）短发夹RNA（shRNA）腺病毒载体，研究其对SGC-7901人胃腺癌细胞侵袭和转移的抑制效果。方法构建腺病毒载体pGSadeno-Akt1＋COX-2（tad5-A＋C）并体外转染SGC-7901人胃癌细胞株后，用实时定量PCR和蛋白印迹分别检测对照组SGC-7901、空载组tAd5-HK和治疗组tAd5-A＋C中Akt1、COX-2 mRNA和蛋白质的表达，其中以对照组SGC-7901、空载组rAd5-HK作为阴性对照。用ELISA法分别检测它们的MMP-2和MMP-9含量；用Transwell法分析它们的侵袭和转移能力。结果构建的rAd5-A＋C重组腺病毒载体在转染SGC-7901细胞48h后呵显著抑制kktl和COX-2mRNA的表达，而治疗组rAd5-A＋C的Aktl和COX-2蛋白表达量与对照组和空载组相比分别下调68．4％和60．2％（均P〈0．01）；tad5-A＋C组中MMP-2和MMP-9含量分别为（39．7±1．7）ng／ml、（31．3±3．6）ng／ml，明显低于对照组SGC-7901（278．4±15．5）ng／ml、（225．4±15．1）ng／ml和空载组rAd5-HK（275．5±2．1）ng／ml、（226．0±23．3）ng／ml（P=0．01、P=0．021）。结论腺病毒介导的靶向性Aktl和COX-2shRNA可抑制人胃腺癌细胞的侵袭和转移。
- 张靖付彦超康春生张庆瑜王涛张洁
- 关键词：肿瘤转移蛋白激酶类环氧合酶2
- 靶向Akt1的小分子干扰RNA对人胃癌细胞系SGC7901生长抑制的体外研究被引量：1
- 2009年
- 目的研究靶向Akt1小分子RNA对SGC7901胃癌细胞的增殖和侵袭的抑制作用。方法通过构建人Akt1特异性siRNA并转染SGC7901胃癌细胞,应用Western blot和realtime PCR检测了Akt1-siRNA的敲低效果;流式细胞术及Transwell试验等方法分析对增殖、侵袭、凋亡的影响。结果Akt1-siRNA可以下调Akt1的表达,并且下调Akt1后细胞的增殖活性明显受到抑制;细胞周期在G0/G1期有明显的阻滞(χ2=11.076,P=0.026);早期凋亡的细胞明显增多(F=89.386,P=0.00);肿瘤细胞的侵袭性生长受到了抑制(F=21.351,P=0.00)。结论靶向人Akt1的siRNA可以特异性的抑制Akt1的表达,进而抑制细胞的生长,siRNA可以成为胃癌靶向治疗的一种新的策略。
- 崔小伟张庆瑜康春生赵凤娟刘建宋小妹
- 关键词：AKT1SIRNA胃癌细胞侵袭
- 靶向蛋白激酶B1、环氧合酶2和磷月旨酰肌醇-3-激酶调节亚基1 shRNA腺病毒表达载体的构建及其抗胃腺癌增殖作用的研究被引量：1
- 2009年
- 目的构建针对肿瘤相关基因蛋白激酶B1（protein kinase B1，AKT1）、环氧合酶2（cyclooxygenase 2，COX-2）、磷脂酰肌醇-3-激酶调节亚基1（phosphatidylinositol kinase 3 regulatory subunit1，PIK3R1）的小发卡RNA（small hairpin，shRNA）重组腺病毒表达载体，体内外研究其对人胃腺癌SGC7901细胞增殖的影响，为胃腺癌的联合基因治疗提供参考。方法构建一个编码COX2，AKT1及PIK3R1三条shRNA的重组腺病毒质粒表达载体，包装扩增并鉴定其病毒滴度。在体内外转染SGC7901细胞，检测肿瘤细胞生长情况，蛋白表达和细胞周期变化。结果经酶切分析，测序鉴定表明成功构建并扩增rAd5-C—A—P腺病毒表达载体。转染SGC7901后COX2，AKT1及PIK3R1的mRNA和蛋白的表达水平均明显降低，甲基氮唑蓝（methyl thiazolyltetrazolium，MTT）法显示转染后第6d细胞存活率为27．6％，流式细胞周期显示G0／G1期阻滞，2-D的Matrigel基质生长实验显示rAd5-C—A-P转染组细胞贴壁生长能力明显减低，体内实验中肿瘤生长也明显减慢（P％0．01）。结论靶向COX-2，AKT1和PIK3R1的shRNA技术可以序列特异性地抑制SGC7901细胞的COX-2，AKT1和PIK3R1表达，在体内外对SGC7901细胞增殖产生明显抑制作用。
- 付彦超张靖张凯茹张庆瑜康春生王涛
- 关键词：联合基因治疗胃腺癌
- 胃癌基因治疗靶点的研究进展被引量：4
- 2008年
- RNA干扰(RNAi)是近几年来发现的研究生物体基因表达、调控与功能的一项崭新技术,近几年许多研究应用siRNA(small interfering RNA)对胃癌相关的致癌因子进行RNA干扰,在体内和体外试验中均产生了明显效果,从而促进了胃癌基因治疗研究的快速发展。随着研究进展更多的与胃癌相关的致癌因子和抑癌因子被发现,并成为胃癌基因治疗的新靶点。
- 付彦超张庆瑜
- 关键词：RNA干扰小干扰RNA胃癌基因治疗
