湖南省科技计划项目(2008SK3116)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 相关作者：周昌菊谷永红陈倩胡灵玉张卫社更多>>
- 相关机构：中南大学中南大学湘雅三医院更多>>
- 发文基金：湖南省科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 调宁蛋白基因siRNA重组腺病毒载体构建及其对体外子宫平滑肌细胞的作用被引量：2
- 2009年
- 目的:构建siRNA重组腺病毒载体,为研究Calponin-1基因在分娩发动中的作用机制提供实验基础。方法:采用消化酶法对足月妊娠人子宫平滑肌细胞原代培养,并用免疫细胞化学方法进行鉴定。构建腺病毒siRNA-Calponin-1质粒转染原代培养的子宫平滑肌细胞,采用RT-PCR和Western印迹检测Calponin-1的表达。结果:构建的Calponin-1siRNA腺病毒载体可以显著抑制子宫平滑肌细胞中Calpo-nin-1mRNA和蛋白的表达。实验组、空白对照组、空载体组的Calponin-1mRNA表达的灰度值分别为316.3±39.2,1048.5±126.4,1027.2±127.5,Calponin-1蛋白表达的灰度值分别为323.3±43.2,1021.5±143.4,1019.2±144.5,实验组与空白对照组、空载体组比较,差异有统计学意义(P<0.05),空白对照组与空载体组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:构建的pAdEasy-pShuttle-U6-Calponin-1siRNA质粒能抑制体外子宫平滑肌细胞Calponin-1的表达,为研究Calponin-1在分娩发动中的作用提供了实验基础。
- 谷永红周昌菊胡灵玉陈倩张卫社
- 关键词：子宫平滑肌细胞腺病毒载体分娩发动
- Calponin-1表达沉默对子宫平滑肌细胞生物学行为的影响被引量：1
- 2010年
- 目的研究抑制calponin-1表达对人子宫平滑肌细胞增殖、侵袭、凋亡和细胞骨架的影响,探讨妊娠时人子宫平滑肌细胞中calponin-1蛋白表达上调在分娩发动中的作用机制。方法构建腺病毒siRNA-calponin-1质粒,转染原代培养的人子宫平滑肌细胞,分别用四甲基偶氮唑蓝(MTT)、Transwell侵袭实验和流式细胞术(AnnexinV/PI双染法)检测转染siRNA-calponin-1前后对子宫平滑肌细胞增殖、侵袭、凋亡的影响;同时用Rhodamine-Phalloidin标记子宫平滑肌细胞骨架蛋白(F-actin),荧光显微镜观察其变化并进行荧光定量检测。结果实验组与空载体组、空白对照组比较,子宫平滑肌细胞的运动能力明显下降(P<0.05),细胞增殖能力及凋亡率无明显差异(P>0.05);空载体组与空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。实验组子宫平滑肌细胞中F-actin的含量减少,排列松散、不规则、微丝较细;空载体组、空白对照组子宫平滑肌细胞中F-actin微丝明显增多增粗、呈束状平行排列。结论体外实验表明抑制calponin-1的表达可以抑制子宫平滑肌细胞的运动而不影响其增殖和凋亡,并可引起子宫平滑肌细胞F-actin的形态变化与重排。此结果提示:妊娠时子宫平滑肌细胞迁移能力的改变及F-actin的重排,可能是导致分娩发动的重要机制之一。
- 谷永红周昌菊胡灵玉陈倩张卫社
- 关键词：RNA干扰分娩发动
- Calponin-1基因SiRNA重组腺病毒载体构建及转染子宫平滑肌细胞被引量：1
- 2009年
- 我们曾采用高通量的基因芯片技术结合蛋白质组学技术，获得了人类自然临产与未临产子宫体部与子宫下段的差异基因表达谱和差异性蛋白表达谱，为子宫收缩相关药物靶点的选择提供了理论基础。其中Calponin-1是被鉴定出的重要基因之一。Calponin-1蛋白属于钙结合蛋白，能与肌动蛋白结合，在调控平滑肌细胞功能中起关键性的作用。
- 谷永红周昌菊胡灵玉陈倩张卫社
- 关键词：子宫平滑肌细胞基因芯片技术蛋白质组学技术转染蛋白表达谱
