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江苏省教育厅自然科学基金(05KJB310077)
江苏省教育厅自然科学基金(05KJB310077)
- 作品数：2 被引量：7H指数：2
- 相关作者：徐娟徐闻欢王迎伟陈霞赵聃更多>>
- 相关机构：南京医科大学更多>>
- 发文基金：江苏省教育厅自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 结核杆菌ESAT-6抗原及Flt3配体双表达核酸疫苗的构建与体外表达被引量：2
- 2007年
- 目的:构建可同时表达flt3配体(flt3-ligand,FL)和结核杆菌6kD早期分泌蛋白(ESAT-6)的重组pIRES质粒,并在大鼠肾小球系膜细胞(GMC)中表达,为进一步研究结核杆菌DNA疫苗提供实验基础。方法:采用PCR方法将FL和ESAT-6基因分别定向克隆入真核双表达载体pIRES。在酶切分析及序列测定后,用脂质体转染至GMC细胞,Westernblot鉴定其体外表达。结果:核酸序列测定证实重组质粒构建正确,该重组质粒在体外GMC细胞中能表达FL和ESAT-6两种蛋白。结论:成功构建了结核杆菌FL和ESAT-6双顺反子真核表达质粒,并在体外实现了共表达。
- 徐闻欢徐娟王迎伟陈霞高玲娟吴宜琴
- 关键词：结核杆菌核酸疫苗体外表达
- 结核杆菌ESAT-6抗原多表位DNA疫苗的构建与表达被引量：5
- 2008年
- 目的:构建含3个结核杆菌ESAT-6抗原T细胞表位及Flt3配体基因的重组质粒,并使其在大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)中表达。方法:用计算机软件预测结核杆菌ESAT-6抗原的T细胞表位谱,选取3个T细胞表位,并以Ala-Ala-Tyr(AAY)序列作为接头,合成全基因序列,定向克隆入真核双表达载体pIRES及质粒pIRES-FL。在酶切分析与序列测定后,用PEI转染至GMCs细胞,并行Western blot鉴定其体外表达。结果:核酸序列测定证实重组质粒构建正确,Western blot证实该重组质粒能在体外GMCs细胞中表达融合蛋白。结论:成功构建了结核杆菌ESAT-6抗原多表位基因重组质粒。
- 陈霞徐闻欢徐娟赵聃王迎伟
- 关键词：结核杆菌ESAT-6T细胞表位DNA疫苗
