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畜禽用益生菌的研究进展被引量：9: 2013年; 随着经济生活水平的提高和兽牧业的发展,如何吃到"放心肉"成为人们关注的话题。益生菌是一类适量服用后能够调节宿主肠道菌群有助于宿主健康的活的微生物,可以改善兽禽产品质量。本文从兽牧业的应用角度,介绍益生菌的概念由来、益生菌菌株特点及种类、对宿主的益生作用,最后对益生菌未来的发展方向进行展望。旨在让人们全面了解益生菌在兽牧业生产中不可忽视的优点及其替代抗生素的可能性。; 李雯静肖运才毕丁仁彭健石德时; 关键词：益生菌菌株饲料添加剂

猪PLE1基因启动子克隆及序列分析被引量：3: 2014年; 通过巢式PCR方法获得猪PLE1基因5′端上游启动子序列,通过T/A克隆法对PLE1基因的启动子进行克隆,并对PCR鉴定为阳性的克隆子进行测序,参考人、啮齿类的羧酸酯酶家族的启动子结构,并利用启动子在线分析软件对其进行生物信息学分析。结果成功克隆得到PLE1基因5′端上游1 153bp的调控片段,分析表明该调控区没有CpG岛,也不存在典型的TATA盒结构;有2个转录起始位点分别位于翻译起始密码子ATG上游-39bp和-37bp处,潜在的转录因子结合位点有C/EBP、Sp1、USF、CdxA、GATA-X、GATA-1、GATA-2、GATA-3、MZF1、AML-1a、SRY、Nkx-2、Lyf-1、deltaE等。另外还发现了7种基序分别为EGF_1、INTEGRIN_BETA、CTCK_1、ANAPHYLATOXIN_1、THIOLASE_3、TUBULIN、VWFC_1。研究结果可为进一步揭示PLE1基因转录调控机制提供理论参考。; 李朋辉肖启玲闫秉芳王喜亮肖运才李自力刘梅毕丁仁石德时; 关键词：启动子转录因子

猪肝羧酸酯酶1基因的克隆和在原核细胞中的功能性表达: 2015年; 为获得有活性的猪肝羧酸酯酶1(PLE1)并研究其功能,利用RT-PCR与常规PCR方法,从大白猪肝组织中扩增PLE1基因的ORF。将PLE1的ORF序列连接到pET15b原核表达载体,在Origami TM2(DE3)中与pGro7质粒共诱导表达,纯化目的蛋白质并检测其酶活性。测序结果表明克隆到PLE1基因编码区全长1 686bp的片段,该片段编码562个氨基酸。SDS-PAGE和Western blotting结果显示,PLE1融合蛋白质成功表达,在30℃的培养温度下,IPTG诱导6h后,PLE1重组蛋白质表达量最高,且大部分以可溶性形式存在。酶活性试验结果表明,PLE1融合蛋白质水解底物p-NPA的酶活力为1.24U。研究结果不仅为研究PLE1水解兽药特性提供高纯度的具有原有酶活性的重组蛋白质,也为PLE同工酶家族其他重要成员的活性功能研究提供理论依据和技术手段。; 肖启玲李朋辉闫秉芳杨路王喜亮肖运才李自力刘梅毕丁仁石德时; 关键词：活性检测

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湖北省自然科学基金(2012FFB02906)