浙江省中医药优秀青年人才基金计划(A2005Y005)
- 作品数：3 被引量：32H指数：3
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- 发文基金：浙江省中医药优秀青年人才基金计划浙江省教育厅科研计划国家科技支撑计划更多>>
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- 铁皮石斛SCoT-PCR反应体系的优化被引量：8
- 2012年
- 目的对铁皮石斛的目标起始密码子(start condon targeted polymorphism,SCoT)多态性反应体系进行优化,为进一步对铁皮石斛遗传多样性的SCoT分析奠定基础。方法以铁皮石斛的新鲜叶片为试验材料,采用控制单一变量的方法分别研究模板DNA用量、引物浓度、TaqDNA聚合酶用量、dNTPs浓度、及退火温度共5个因素对SCoT-PCR扩增结果的影响。结果铁皮石斛SCoT标记的20μL优化反应体系为:DNA模板20 ng、引物浓度为30μmol/L、Taq DNA聚合酶用量为1.0 U、dNTP浓度为100μmol/L。适宜的PCR扩增程序为95℃预变性4 min;95℃变性50 s,56.1℃复性退火40 s,72℃延伸2 min,循环36次;72℃延伸5 min,4℃保存。1.5%琼脂糖凝胶电泳显示扩增产物在600～2 000 bp。结论该体系的建立为铁皮石斛种质遗传多样性分析、分子标记辅助育种等研究奠定了基础。
- 徐旭栋蒋瑞彬蓝小明颜美秋丁志山吕圭源金波
- 关键词：铁皮石斛遗传多样性分析分子标记辅助育种
- 人工栽培铁皮石斛种质资源遗传多样性的SCoT分析被引量：19
- 2013年
- 目的:将目标起始密码子多态性分子标记(SCoT)技术应用于铁皮石斛的遗传多样性研究。方法:采用SCoT分子标记技术和非加权平均距离法(UPGMA)对20份不同来源的人工栽培铁皮石斛样品进行遗传多样性分析。结果:从备选的56个引物中筛选出20个SCoT引物,对共扩增共获得226个条带,平均每个引物产生11.3个条带,其中多态性条带204条,多态性比率达到90.3%。结论:本实验发现不同来源的铁皮石斛人工栽培种存在较大的遗传差异,目前药材市场中的人工栽培铁皮石斛遗传多样性丰富,SCoT技术可有效应用于铁皮石斛的遗传多样性研究。
- 徐旭栋蒋瑞彬蓝小明颜美秋丁志山金波吕圭源
- 关键词：铁皮石斛
- 野生白及SRAP-PCR反应体系的优化被引量：7
- 2013年
- 采用浓度梯度设计法研究适合白及的SRAP-PCR反应体系。对影响SRAP-PCR的DNA模板、引物、dNTP、Mg2+、Taq酶、退火温度等6个因素进行优化。最终确定白及的SRAP-PCR优化体系:在20μL体系中,DNA模板30 ng、Mg2+2.5 mmol/L、dNTPs 0.25μmol/L、引物20μmol/L、Taq酶2.0U,扩增体系为:94℃预变性5 min;5个循环的94℃变性1 min,36℃退火1 min,72℃延伸1 min;之后35个循环:94℃变性1 min,48℃退火1 min,72℃延伸1 min;72℃最后延伸5 min。该体系的建立为野生白及种质资源遗传多样性的进一步相关遗传分析奠定了基础。
- 蒋瑞彬徐旭栋蓝小明王鸯妮丁志山金波
- 关键词：白及
