河南省高等学校青年骨干教师资助计划项目(2012GGJS-172)
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
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- 发文基金：河南省高等学校青年骨干教师资助计划项目国家自然科学基金NSFC-河南人才培养联合基金更多>>
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- 环介导等温扩增技术的引物设计与筛选研究被引量：1
- 2014年
- [目的]研究引物设计与非特异扩增之间的关系.[方法]以单核细胞增生李斯特菌（Listeria monocytogenes）的特异性基因hlyA与沙门氏菌（Salmonella）的特异基因invA为例设计引物,进行环介导等温扩增.[结果]就环介导等温扩增的任何2条引物而言,如果2条引物3’端的3～4碱基在同一条引物上都有2个互补序列,在常用的LAMP反应体系与反应条件下,必然有非特异性扩增,LAMP引物设计与筛选应避免这种情况出现.[结论]按照该试验的原则设计引物,可降低非特异性扩增.
- 王德国王永真王爱萍
- 关键词：引物设计
- 增加环介导等温扩增灵敏度与特异性的两种实用方法被引量：3
- 2014年
- 拟以单核细胞增生李斯特菌的特异基因prfA为研究对象,采用二甲基亚砜(DMSO)以及Touchdown-LAMP增加环介导等温扩增的灵敏度与特异性.结果表明,在环介导等温扩增反应体系中添加7.5%的DMSO并采用Touchdown-LAMP方法,克服了假阳性扩增,灵敏度增加了100倍,在灵敏度与特异性方面优于现有的商业化试剂盒.
- 王德国
- 关键词：环介导等温扩增
- 环介导等温扩增技术的假阳性扩增研究被引量：4
- 2015年
- 将环介导等温扩增技术最初报道中的M13噬菌体引物排列成四种组合FIP+BIP+F3+B3、FIP+BIP+F3、FIP+BIP+B3、FIP+BIP,分别在不加M13噬菌体模板的情况下以相同的反应体系及反应条件进行等温扩增,琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物,分析环介导等温扩增中产生假阳性的原因.结果表明,关于环介导等温扩增技术最初报道的试验具有非特异性扩增现象,环介导等温扩增的假阳性主要是引物二聚体引起的而并非是气溶胶污染导致的.
- 王德国王永真王爱萍
- 关键词：脱氧核糖核酸环介导等温扩增假阳性
