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羊巴贝斯虫未定种trap基因的克隆表达及反应原性分析被引量：1: 2018年; 通过克隆trap基因，在原核表达系统中进行表达并纯化，Westernblot鉴定TRAP蛋白反应原性，应用生物信息学分析软件分析验证该基因／蛋白的结构。以羊巴贝斯虫未定种新疆株gDNA和cDNA为模板扩增trap基因全长；并构建pET-30a-trap原核表达载体。将构建成功的表达载体转入BL21（DE3）pLysS进行诱导表达；纯化可溶性的rBspTRAP，Westernblot分析其反应原性，并应用生物信息学分析软件分析验证该基因／蛋白的结构。结果显示：获得的traP基因全长为2338bp，开放阅读框大小为1944bp，具有5个内含子和6个外显子。氨基酸序列分析显示1～26位氨基酸为信号肽序列，45～201位和240～288住氨基酸分别为TRAP蛋白家族的vWA和TSPl结构域。Westernblot结果显示羊巴贝斯虫未定种新疆／敦煌株阳性血清可特异性识别rBspTRAP，该重组蛋白与莫氏巴贝斯虫（临潭株、天祝株、河北株、宁县株）阳性血清及尤氏泰勒虫阳性血清无交叉反应。本试验成功克隆trap基因并表达，该基因可以作为免疫学诊断用候选抗原，为以后建立鉴别诊断莫氏巴贝斯虫和羊巴贝斯虫感染的免疫学诊断方法奠定基础。; 何欣刘军龙刘爱红王锦明牛庆丽李有全殷宏罗建勋关贵全; 关键词：原核表达

In vitro infection of bovine and ovine red blood cells with Theileria annulata schizonts: Theileria annulata,the causative agents of tropical theileriosis,is protozoan parasites that cause lymphoproli...; Youquan Li~(1-6),Guiquan Guan~(1-6),Zhijie Liu~(1-6),Jifei Yang~(1-6),Qingli Niu~(1-6),Ze Chen~(1-6),Jianxun Luo, Hong Yin~(1-6*). 1 State Key Laboratory of Veterinary Etiological Biology 2 Key Laboratory of Veterinary Parasitology of Gansu Province 3 Engineering Research Center of Biological Detection of Gansu Province 4 Key Laboratory of Epizootic Diseases of Grazing Animal of Ministry of Agriculture 5 Key Laboratory of Veterinary Public Health of Ministry of Agriculture 6 Lanzhou Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Science,Xujiaping 1, Lanzhou,Gansu,730046,P.R.China; 关键词：INFECTION; 文献传递

In vitro infection of bovine and ovine red blood cells with Theileria annulata schizonts: Theileria annulata,the causative agents of tropical theileriosis,is protozoan parasites that cause lymphoproli...; Youquan LiGuiquan GuanZhijie LiuJifei YangQingli NiuJianxun LuoHong Yin; 关键词：INFECTION; 文献传递

我国部分地区蜱体内伯氏疏螺旋体流行病学调查: 本研究应用基于伯氏疏螺旋体外膜蛋白A(OspA)基因和编码鞭毛蛋白(F1a)基因的两种套式PCR方法,对野外采集的543份蜱的基因组进行检测。敏感性结果显示:基于OspA基因的引物对3个基因型标准菌株DNA检出的敏感性均...; 杨吉飞殷宏李有全; 关键词：伯氏疏螺旋体聚合酶链式反应; 文献传递

牛巴贝斯虫体外培养体系的建立被引量：2: 2012年; 利用静相培养技术,建立了牛巴贝斯虫(Babesia bovis)的体外连续培养体系,测定了虫体的生长特性和对不同种属动物红细胞的侵染性。结果显示,牛巴贝斯虫的生长周期介于33.66～38.51h之间;在体外可入侵牛、人、驴和绵羊的红细胞,难以侵入山羊的红细胞,且只在牛红细胞中实现传代培养。该方法的建立为寄生虫和宿主细胞相互作用的研究、治疗药物的筛选、诊断和疫苗用抗原的鉴定等提供了技术平台。; 杜鹏飞关贵全刘爱红马米玲任巧云殷宏罗建勋; 关键词：牛巴贝斯虫体外培养侵染性

莫氏巴贝斯虫trap基因的克隆表达及反应原性分析被引量：1: 2017年; 本研究以莫氏巴贝斯虫临潭株为研究对象,分别从其基因组D N A和c DNA中成功扩增trap基因全长,应用生物信息学分析软件分析验证了该基因和蛋白的结构;构建p ET-30a-trap原核表达载体,转入大肠杆菌BL21(DE3)p Lys S感受态细胞进行诱导表达;表达产物超声破碎后,对上清和沉淀进行SDS-PAG E分析。纯化可溶性的r Bm TRAP,W estern-blot分析其反应原性。结果显示,莫氏巴贝斯虫trap基因具有4个内含子和5个外显子,开放阅读框大小为2 100 bp。第1~23位氨基酸为信号肽序列,第45~201和第238~302位分别为TRAP蛋白家族的v WA和TSP1结构域;重组蛋白r Bm TRAP以可溶性蛋白和包涵体两种形式存在,莫氏巴贝斯虫临潭株、天祝株阳性血清可特异性识别r Bm TRAP,而与莫氏巴贝斯虫宁县株和河北株、羊巴贝斯虫未定种新疆株和敦煌株、吕氏泰勒虫和羊无浆体阳性血清无交叉反应。结果表明,r Bm TRAP具有作为血清学诊断方法候选抗原的潜力,为将来建立鉴别诊断莫氏巴贝斯虫临潭株、天祝株感染的免疫学诊断方法奠定了基础。; 何欣刘军龙刘爱红王锦明牛庆丽李有全殷宏罗建勋关贵全; 关键词：原核表达

我国羊巴贝斯虫trap基因结构及遗传进化分析被引量：4: 2017年; 本研究拟解析我国羊巴贝斯虫trap基因的结构特征,并以其为分子标志开展遗传进化分析,为理清我国羊巴贝斯虫的分类关系提供数据。用公布的巴贝斯虫trap基因序列BLAST两个羊巴贝斯虫全基因组本地数据库,以获得的保守序列片段为模板,设计PCR引物;克隆我国分离的6株羊巴贝斯虫trap基因全长序列,分析其序列结构特征;比对序列相似性,构建系统发生树,分析其遗传进化关系。结果克隆获得6株羊巴贝斯虫trap基因,分析结果显示,其具有3、4、5个内含子的三种内含子数目,预测的开放阅读框(ORF)大小分别为1 944、2 100/2 142和2 286bp;氨基酸序列分析显示,其都具有TRAP蛋白家族特征性的vWFA、TSR、跨膜域和CTD结构域;进化关系分析显示,感染我国羊的巴贝斯虫被分成3组,组内序列相似性为99.8%~100%,而组间为43.6%~74.6%。系统发生树上6株羊巴贝斯虫被分到两大枝,羊巴贝斯虫未定种和莫氏巴贝斯虫,而且莫氏巴贝斯虫又被分成两小枝。6株羊巴贝斯虫trap基因结构存在差异,但其蛋白特征性的结构域较为保守;我国分离的羊巴贝斯虫为两个种,但莫氏巴贝斯虫中可能存在两个亚种。; 何欣刘军龙刘爱红王锦明牛庆丽李有全殷宏罗建勋关贵全; 关键词：基因结构系统发生树

顶复门原虫滑动体相关分子的研究进展被引量：1: 2012年; 对顶复门原虫的运动装置———滑动体的主要组成蛋白分子及其在运动与宿主细胞入侵过程中的分子机制等方面的最新进展进行了综述,旨在总结现阶段顶复门原虫滑动体相关蛋白在其运动和宿主细胞入侵分子机理的最新研究概况,并对该领域研究中存在的主要问题和将来的研究方向进行分析。; 王锦明罗建勋殷宏关贵全; 关键词：滑动体分子机理

中国南方七省份牛无浆体病的流行病学调查被引量：12: 2014年; 为了调查我国南方地区牛羊感染牛无浆体的状况,用PCR检测了采自四川、重庆、云南、贵州、广西、湖南、广东等七省(区、市)共685份牛和羊的血液样品的DNA。PCR方法以16SrRNA基因为靶标,采用无浆体属通用引物EE1/EE2和牛无浆体特异性引物AB1f/AB1r对采集样品的全血基因组进行套式PCR扩增。PCR结果显示:四川省样品感染率为17.5%;重庆市样品感染率为25.7%;云南省样品感染率为29.6%;贵州省样品感染率为59.1%;广西壮族自治区样品感染率为14.0%;湖南省样品感染率为8.2%;广东省样品感染率为23.7%。调查证实了牛无浆体在我国南方地区有广泛的分布,该调查丰富了我国牛无浆体的流行病学资料。; 迟庆安刘志杰李有全杨吉飞陈泽罗建勋岳城殷宏; 关键词：流行病学

西尼罗病毒诊断的研究进展被引量：2: 2011年; 西尼罗病毒（WestNileVirus，WNV）首次于1937年12月在乌干达西尼罗地区的一名发热成年女性血液标本分离到，属黄病毒科（Flavivirdae）黄病毒属（Flavivirus）的乙型脑炎病毒血清群。可导致人类西尼罗热（westNileFever）或西尼罗脑炎（WestNileEncephalitis）。发病者常常出现发烧、头痛、皮疹、淋巴结肿大等症状，严重时表现为无菌性脑膜炎，甚至死亡。; 付钰广任巧云罗建勋殷宏; 关键词：西尼罗病毒乙型脑炎病毒无菌性脑膜炎淋巴结肿大标本分离成年女性

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