国家自然科学基金(91339101)
- 作品数：5 被引量：8H指数：1
- 相关作者：张伟丽陈宇米雪楠王雷贺淑君更多>>
- 相关机构：北京协和医学院北京海淀妇幼保健院中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省科技攻关计划北京市重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- MicroRNA-181b诱导血管内皮细胞衰老和功能异常的机制研究
- 2014年
- 目的研究micro RNA-181b(mi R-181b)和胰岛素样生长因子1受体(Insulin-like growth factor 1 receptor,IGF1R)参与血管内皮细胞衰老和血管新生的调节机制。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs),传代培养计算细胞群体倍增水平(Population doublings,PDL),将PDL≤8 HUVECs定义为年轻细胞,PDL≥44 HUVECs定义为衰老细胞,并检测mi R-181b和IGF1R在年轻(PDL8)和年老(PDL44)HUVECs中的表达。PDL8 HUVECs过表达或抑制mi R-181b后,分别用MTS比色法、划痕(Wound healing)和成管(Tube formation)实验检测内皮细胞的增殖、迁移、成管等血管新生能力。采用双荧光素酶报告系统法检测mi R-181b对IGF1R转录后水平的调控。此外,给予缺氧刺激,观察缺氧应激条件下mi R-181b对IGF1R表达的调控作用。结果过表达mi R-181b可抑制PDL8内皮细胞的增殖能力22%(P<0.001)、迁移能力23%(P<0.001),对成管能力没有显著影响(P>0.05)。与PDL8HUVECs比较,mi R-181b在PDL44衰老内皮细胞中上调64%(P=0.046),IGF1R的m RNA和蛋白水平分别下调39%和45%(P=0.004,P=0.014)。荧光素酶活性实验显示mi R-181b可与IGF1R的3’UTR结合,但过表达mi R-181b对IGF1R的表达水平无显著影响(P>0.05)。在缺氧应激条件下,mi R-181b可上调IGF1R的表达(P=0.005)。结论 Mi R-181b抑制血管内皮细胞增殖、迁移等血管新生能力,这一作用与mi R-181b在缺氧应激条件下上调血管发育相关基因IGF1R的表达相关,其机制仍需进一步研究。
- 米雪楠杨淑均陈宇惠汝太张伟丽
- 关键词：MICRORNAS内皮细胞衰老血管新生胰岛素样生长因子1受体
- ARHGEF7遗传变异与颅内动脉瘤相关被引量：1
- 2023年
- 目的探讨Rho鸟嘌呤核苷酸交换因子7(ARHGEF7)基因遗传变异与颅内动脉瘤形成和破裂风险的关系。方法收集颅内动脉瘤患者121例(包括未破裂组患者41例,破裂组患者80例)和健康对照155名,检测ARHGEF7的10个遗传变异。利用logistic回归模型分析ARHGEF7遗传变异与颅内动脉瘤发生和破裂风险的关系。结果在校正年龄、性别和传统心血管危险因素后,与rs4145274GG基因型相比,rs4145274GA与颅内动脉瘤破裂风险降低相关,比值比为0.24[95%可信区间(CI):0.09~0.69,P<0.05];与rs1555751CC基因型相比,rs1555751CT与颅内动脉瘤破裂风险降低也相关,比值比为0.17(95%CI:0.05~0.63,P<0.05)。rs4145274和rs1555751的联合效应提示患者遗传风险评分越高,颅内动脉瘤破裂风险越低,比值比为0.14(95%CI:0.04~0.55,P<0.05)。结论ARHGEF7遗传变异可能是颅内动脉瘤破裂风险的遗传标记。
- 吴毅毅张梅杨云云李亚强李静贺佳乐张伟丽
- 关键词：颅内动脉瘤疾病风险
- MicroRNA-181b对衰老内皮细胞血管新生功能的影响被引量：6
- 2014年
- 目的研究microRNA-181b(miR-181b)对衰老内皮细胞增殖、迁移和管腔形成等血管新生功能的影响。方法原代培养人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs),通过传代培养计算细胞群体倍增水平(Population doublings,PDL),建立HUVECs衰老模型(PDL44)。在PDL44 HUVECs中过表达或抑制miR-181b,分别用MTS法、划痕实验及成管实验检测内皮细胞增殖、迁移和成管功能。结果过表达miR-181b可抑制PDL44内皮细胞的增殖功能18%(P<0.001),减少内皮细胞迁移率40%(P=0.032);反之,给予miR-181b抑制剂可显著改善PDL44内皮细胞的迁移和增殖。给予血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)刺激,未观察到miR-181b对PDL44内皮细胞成管功能的调控作用。结论抑制miR-181b可提高衰老内皮细胞的增殖和迁移能力,提示它可作为一个新的靶点,调节内皮细胞的损伤修复和血管新生。
- 范婧尧米雪楠陈宇贺淑君王雷惠汝太张伟丽
- 关键词：细胞衰老血管新生内皮细胞功能MICRORNAS
- 核不均一核糖蛋白A1在血管平滑肌钙化中的作用机制
- 2016年
- 目的研究核不均一核糖蛋白A1(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1,hnRNP A1)是否可以通过IκBα/NF-κB信号通路调控平滑肌细胞的钙化过程。方法分离培养原代人脐动脉血管平滑肌细胞(human umbilical artery smooth muscle cells,HUASMCs),构建pc DNA3.1-hnRNP A1真核表达质粒并转染HUASMCs,观察hnRNP A1对HUASMCs增殖和凋亡功能的影响。建立HUASMCs钙化模型,研究hnRNP A1在血管平滑肌钙化过程中的作用机制。结果 hnRNP A1表达水平在HUASMCs由收缩型转变为合成型的分化过程中显著上调,但hnRNP A1对HUASMCs细胞的增殖和凋亡功能无显著影响。无论是否给予H2O2刺激,hnRNP A1均可促进HUASMCs细胞形成钙化结节,其促进钙化的分子机制不是通过IκBα/NF-κB信号通路介导。结论本研究发现hnRNP A1在平滑肌细胞由收缩型向合成型转化的过程中表达上调,过表达hnRNP A1促进平滑肌细胞钙化。
- 李健杨淑均陈宇张伟丽
- 关键词：血管钙化HNRNPA1
- PPARβ/δ及其配体在RAW264.7泡沫细胞模型中的作用被引量：1
- 2014年
- 目的研究过氧化物酶体增殖物激活受体(Peroxisome Proliferators-activated Receptor,PPAR)-β/δ及其激动剂GW0742、抑制剂GSK0660在RAW264.7泡沫细胞模型中的作用。方法本研究选用RAW264.7细胞,共分为6组,分别是对照组、LPS组、ox-LDL组、模型组、激动剂组和抑制剂组。实时定量PCR(Real-time Quantitative PCR)用来检测PPARβ/δ和单核细胞趋化蛋白(monocyte chemoattractant protein,MCP)-1 m RNA的水平,蛋白质印迹法(Western Blotting,WB)检测PPARβ/δ和MCP-1蛋白的表达,酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked Immunosorbent Assay,ELISA)测定细胞培养液上清中炎症因子肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α,白介素(interleukin,IL)-10和MCP-1的水平。结果对照组、LPS组、ox-LDL组、模型组、激动剂组的PPARβ/δ蛋白质和m RNA水平逐渐增加(P<0.01),而抑制剂组PPARβ/δ蛋白质和m RNA水平则明显低于模型组和激动剂组(P<0.01)。MCP-1蛋白质和m RNA的水平在对照组、ox-LDL组、LPS组、模型组逐渐增加(P<0.01),而激动剂组明显降低(P<0.01),抑制剂组又有所增加(P<0.01)。总之,MCP-1的蛋白质和m RNA水平在各组之间差异显著(P<0.01)。细胞培养液中TNF-α、MCP-1的水平LPS组、ox-LDL组、模型组明显升高(P<0.01),而激动剂组明显降低(P<0.01),抑制剂组又有所增加(P<0.01)。而IL-10在激动剂组和抑制剂组则表现出相反的趋势。结论 GW0742可以显著增加PPARβ/δ的表达,降低炎症因子MCP-1、TNF-α的水平,升高IL-10的水平;GSK0660则发挥完全相反的作用。
- 秦春焕李红莉
- 关键词：脂多糖氧化低密度脂蛋白
