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上海市卫生局科研基金(2006078)

作品数：1 被引量：1H指数：1
相关作者：周辉蔡清萍胡志前王伟军石睿更多>>
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文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇蛋白
  • 1篇腺病
  • 1篇腺病毒
  • 1篇连环蛋白
  • 1篇Β-连环蛋白
  • 1篇Β连环蛋白
  • 1篇RNA干扰
  • 1篇HCT116
  • 1篇肠癌
  • 1篇大肠
  • 1篇大肠癌

机构

  • 1篇第二军医大学

作者

  • 1篇石睿
  • 1篇王伟军
  • 1篇胡志前
  • 1篇蔡清萍
  • 1篇周辉

传媒

  • 1篇中华实验外科...

年份

  • 1篇2009
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
腺病毒介导的RNA干扰对大肠癌HCT116细胞株β-连环蛋白表达的抑制作用被引量：1
2009年
目的构建针对人β-连环蛋白（catenin）的腺病毒载体pAdHl-shβ-catenin—GFP，应用RNA干扰（RNAi）的方法，观察其在体内和体外对人大肠癌细胞株HCT116生长的抑制作用。方法设计合成针对B—catenin的shRNA，并克隆至腺病毒表达载体AdH1-GFP上，制备针对β—catenin的腺病毒载体AdH1-GFP—shβ-catenin—GFP，与腺病毒骨架载体共转染293A细胞包装病毒，采用空斑法测定病毒滴度为5×10^9pfu／ml，感染HCT116细胞。应用Westernbolt和报告基因检测HCT116细胞B—catenin表达水平和转录活性，噻唑蓝（MTT）比色法测定活细胞数并绘制细胞生长曲线，建立软琼脂克隆形成实验观察肿瘤体外成瘤能力，同时建立裸鼠HCT116细胞移植瘤模型，观察肿瘤生长情况。结果成功构建针对β-catenin基因的RNAi腺病毒表达载体，与AdH1-GFP组比较AdH1-shβ、catenin—GFP组在感染24h和48hHCT116细胞β-catenin表达水平和转录活性显著降低，细胞的增殖和克隆形成能力则下降50％（P〈0．01）。体内实验表明重组腺病毒载体介导的β—cateninshRNA明显抑制肿瘤生长（P〈0．01）。结论腺病毒介导的RNAi技术可有效降低β—catenin在大肠癌细胞中的表达水平，抑制肿瘤细胞在体内外的增殖活性。
周辉王伟军胡志前石睿蔡清萍
关键词：大肠癌RNA干扰Β连环蛋白腺病毒
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