国家自然科学基金(31171524)
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
- 相关作者：王令强马丽李旭凯刘扬洋周玉霞更多>>
- 相关机构：华中农业大学墨尔本大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央高校研究生科技创新基金中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- T载体介导的基于attL核心区LR反应的简化快速Gateway克隆系统（英文）被引量：1
- 2018年
- Gateway克隆技术已得到广泛的应用。该技术先通过BP反应将目标片段连到带有完整attL特异识别位点的入门载体,然后与终载体通过LR反应得到表达载体。Gateway克隆方法与传统的酶切连接方法相比有快速简单等优点。但是,BP和LR酶都非常昂贵。本研究首先对3个常用Gateway载体的atts特异位点序列比对发现,attL序列核心交换位点"core attL"的21~22 bp长的碱基是保守和必要的。由此,设计含有core-attL序列的引物,通过PCR克隆得到DNA片段并连入p MD18-T载体,然后进行LR反应,可成功得到目标表达载体,并在保守的位点上正确重组。本研究还对其中一个带有绿色荧光蛋白基因的表达载体转化至烟草,能够正常表达该蛋白质。结果表明,通过将含有attL核心位点基因片段连接到p MD18-T载体上,可以省略BP反应而将目标片段连接到终载体上,节约了反应时间和成本。
- 朱晓博张贵粉王友梅Staffan Persson谢国生王令强
- 2,4-D、Dicamba和KT对小麦成熟胚离体培养的影响被引量：3
- 2014年
- 为了建立优良小麦品种遗传转化的高效组织培养体系,以扬麦158和郑麦9023成熟胚为外植体,探讨了Dicamba和2,4-D及KT对小麦成熟胚愈伤组织诱导和再生的影响。结果表明,Dicamba和2,4-D的愈伤组织诱导率最低为88.7%,最高可达95.1%,处理间无显著差异。不同激素诱导的愈伤组织在添加KT的培养基上分化时,再生率存在显著差异。两种基因型小麦用Dicamba诱导的愈伤组织比2,4-D诱导的愈伤组织具有更高的再生率。在分化培养时,培养基中添加5mg·L-1 KT比添加3mg·L-1的分化效果更好,但不同浓度KT对愈伤组织分化的效果因诱导激素的配比和基因型而异。扬麦158的综合指标更优,平均再生率可达20.1%,比郑麦9023高6.6%;采用4mg·L-1 Dicamba进行愈伤组织诱导,配合5mg·L-1KT分化培养更有利于小麦成熟胚离体培养。
- 刘扬洋马丽周玉霞刘雪琴刘雪琴
- 关键词：小麦成熟胚激素配比
- pep_pattern．Pl，搜索蛋白质序列模体的Perl脚本被引量：3
- 2014年
- 用Perl语言编写了一个pep_pattern．pl脚本，可从一组相关序列中搜索非常相似的序列片段，通过匹配所有可能的氨基酸片段的排列，统计每个匹配模体在序列中的出现频率和位置，搜索蛋白质序列中的2～4个多肽的模体。
- 李旭凯李旭凯王令强
- 关键词：PL蛋白质序列
