国家自然科学基金(30901071)
- 作品数：4 被引量：33H指数：3
- 相关作者：陈泽良王玉飞徐杰于爽付思美更多>>
- 相关机构：西南大学军事医学科学院吉林大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 布鲁氏菌B.ovis virB缺失株的构建及胞内环境适应性分析被引量：2
- 2012年
- 目的:利用基于T载体快速克隆构建布鲁氏菌突变株的方法,构建缺失VirB启动子区域的绵羊附睾布鲁氏菌株,为绵羊附睾种布鲁氏菌IV型分泌系统功能研究奠定基础。方法:运用同源重组的原理,用Kana抗性基因替换编码分泌系统VirB的启动子区域,从而获得virB的突变株。通过RT-PCR对突变株virB基因的转录进行了分析;分析突变株和野生株在体外模拟的胞内环境下的生存能力,观察virB对B.ovis胞内生存环境适应的影响。结果:成功构建了B.ovis的缺失virB启动子区的突变株,突变株中virB基因的表达抑制。与野生株相比,突变株对胞内环境的适应力发生了改变。结论:利用T载体克隆和抗性替换的方法成功构建了B.ovis的virB的突变株,为B.ovis的IV型分泌系统的功能研究奠定了基础。
- 高光俊柯跃华徐杰王丽萍张正芳李卓琳王璐璐郭英飞王玉飞徐兴然陈泽良
- 布鲁杆菌Cu-Zn SOD和GroEL的克隆表达及细胞免疫特性比较分析被引量：3
- 2010年
- 目的分析比较布鲁杆菌两种外膜蛋白Cu-Zn SOD和GroEL的细胞免疫特性。方法以布鲁杆菌16M基因组为模板,PCR扩增Cu-Zn SOD和GroEL蛋白的基因序列。采用Gateway方法构建表达载体,在大肠埃希菌中诱导表达并纯化,用获得的纯化蛋白刺激减毒活疫苗S19免疫小鼠的脾细胞,并测定细胞上清中IFN-γ的水平。结果成功克隆表达了Cu-Zn SOD和GroEL蛋白,用这两种蛋白刺激S19免疫小鼠脾细胞后,细胞上清中的IFN-γ水平明显升高,并且GroEL刺激后的IFN-γ水平高于Cu-Zn SOD刺激后的IFN-γ水平。结论 GroEL和Cu-Zn SOD蛋白均具有细胞免疫反应特性,且GroEL的细胞免疫反应特性强于Cu-ZnSOD。
- 于爽徐杰付思美王玉飞白耀霞钟志军陈燕芬王同坤杨毅杜昕颖汪舟佳李竞黄留玉陈泽良
- 关键词：GATEWAY技术
- 利用T载体克隆快速构建布鲁氏菌缺失突变株被引量：17
- 2010年
- 目的:建立一种基于T载体快速克隆构建布鲁氏菌突变株的方法,提高布鲁氏菌突变株构建的效率。方法:采用融合PCR的方法,将待缺失基因上下游的同源臂与卡那霉素抗性基因融合起来,构建突变盒,然后将突变盒直接与T载体连接,构建突变载体,将载体转入布鲁氏菌感受态细胞并筛选抗性克隆,进而获得布鲁氏菌的缺失突变株。结果:结合融合PCR和T载体快速克隆,能够在48h之内构建好突变载体,与传统的酶切连接相比,效率高、周期短。结论:基于T载体快速克隆是一种非常高效的构建突变株的方法,为布鲁氏菌突变株的构建提供了一种新方法。
- 白耀霞杨毅王玉飞王同坤于爽陈燕芬付思美黄留玉田晋红陈泽良
- 关键词：布鲁氏菌T载体
- 我国近10年布鲁氏菌病研究文献分析(英文)被引量：12
- 2012年
- 目的分析我国近十年来布鲁氏菌的流行概况和研究水平,为我国布鲁氏菌病防控和研究提供科学依据。方法通过数据库检索近十年(2000～2010)的科技文献和数据资料,对其调研并进行统计分析。结果我国布病疫情防控及研究工作尽管取得了很大的进步,但目前布病疫情出现反弹的趋势,研究水平有待继续提高。结论我国布病疫情依然严峻,防控工作和科研水平总体上仍需加强,进而从根本上提高我国布鲁氏菌病的防治水平。
- 高光俊徐杰柯跃华陈泽良王玉飞徐兴然
- 关键词：布鲁氏菌疫情分析
