目的本研究拟通过体外细胞分子生物学实验,观察SNF5分子对子宫内膜细胞癌增殖的影响,并进一步探究其发生机制。方法 Western blot法检测不同子宫内膜癌细胞株SNF5蛋白表达水平;采用质粒转染技术,转染低表达SNF5的细胞株;CCK8实验比较低表达SNF5细胞与转染SNF5后以及高表达SNF5细胞间增殖能力的差异;利用细胞克隆形成实验,进一步探究SNF5分子对子宫内膜细胞癌增殖影响的机制。本研究不同组别间采用方差分析和t检验分析,P<0.05为差异具有统计学意义。结果随着子宫内膜癌细胞恶性程度的逐渐增高,SNF5的表达水平也呈上升趋势。其中,人子宫内膜癌细胞RL-952的SNF5的表达含量最高(2.82±0.1),JEC细胞次之(1.85±0.16),HHUA细胞最低(0.31±0.02)。为进一步探究SNF5分子影响子宫内膜癌细胞生物行为的具体机制,CCK8实验显示:HHUA-SNF5细胞的增殖能力明显高于HHUA细胞(3.8±0.5)倍,且恰好与高表达SNF5分子且高度恶性的RL-952细胞持平。为进一步探究SNF5影响细胞增殖的机制,克隆形成实验显示:HHUA-SNF5细胞的克隆形成能力明显高于HHUA细胞(5.0±0.3)倍;实时定量PCR显示:三个与增殖相关分子的转录因子的表达水平均明显上调,Sox2上调(2.4±0.7)倍(P<0.001),Nanog上调(1.5±0.4)倍(P<0.001),Oct4上调(1.9±0.2)倍(P<0.001)。结论 SNF5可通过促进子宫内膜癌中增殖相关分子(Sox2、Nanog和Oct4)的表达,以促进细胞自我更新,进而促进细胞增殖。
