国家自然科学基金(30700156)
- 作品数：8 被引量：13H指数：2
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- 一种无支架心肌薄片的体外构建被引量：1
- 2009年
- 构建无支架工程化心肌组织,建立一种无支架心肌组织工程技术。以1.2×106个/cm2的接种密度培养新生大鼠心室肌细胞,胰蛋白酶消化这些细胞,可获得一种无支架材料的心肌薄片。观察该薄片,利用组织学方法和透射电镜检测该薄片。该心肌薄片在体外可自发搏动,可自发卷为管状,由3～5层细胞组成,胞外有大量胶原;该薄片表达肌节型肌动蛋白、层粘连蛋白、平滑肌肌动蛋白和八因子相关蛋白;在透射电镜下,发现该薄片中有很多细胞有肌丝结构并有大量线粒体。这表明该薄片由心肌细胞、平滑肌细胞、血管内皮细胞、成纤维细胞等多种细胞构成,与天然心肌组织类似。本实验构建出一种无支架工程化心肌组织薄片,建立了一种简便的无支架心肌组织工程技术。
- 郭勇张西正魏严郭春李瑞欣徐晓莹张永红
- 关键词：心肌薄片工程化心肌组织
- 冻存和传代后脂肪间充质干细胞向心肌样细胞的分化被引量：3
- 2009年
- 背景:脂肪间充质干细胞是一种成体多能干细胞,将成为一种重要的用于心肌组织工程和心脏病细胞治疗研究的种子细胞。目的:观察脂肪间充质干细胞经液氮冻存和长期传代后向心肌样细胞分化的能力。设计、时间和地点:对比观察,于2007-09/2008-06在解放军军事医学科学院卫生装备研究所组织工程实验室完成。材料:大鼠脂肪间充质干细胞,来自2月龄Wistar大鼠附睾脂肪垫。方法:第3代大鼠脂肪间充质干细胞液氮冻存6个月,复苏后用10μmol/L5-氮胞苷诱导,2周后检测细胞分化状况。另外,将间充质干细胞长期传代培养,用10μmol/L5-氮杂胞苷处理,2周后检测细胞分化状况。以未经5-氮杂胞苷处理的脂肪组织间充质干细胞为对照。主要观察指标:免疫组织化学染色观察α-肌节型肌动蛋白、骨骼肌快肌肌浆球蛋白(骨骼肌细胞特有)和GATA-4的表达。结果:液氮冻存后的脂肪间充质干细胞,经诱导后α-肌节型肌动蛋白和GATA-4免疫组织化学染色均为阳性,骨骼肌快肌肌浆球蛋白免疫组织化学染色为阴性;第6代脂肪间充质干细胞,经诱导后免疫组织化学染色结果与冻存后相同;第9代脂肪间充质干细胞,经诱导后α-肌节型肌动蛋白、骨骼肌快肌肌浆球蛋白和GATA-4免疫组织化学染色均为阳性。对照组均为阴性表达。结论:脂肪间充质干细胞冻存后可向心肌样细胞分化;长期传代的脂肪间充质干细胞也能向心肌样细胞分化,但经5-氮杂胞苷诱导也可能同时向骨骼肌样细胞分化。
- 郭勇李瑞欣张西正郭春孙鹃魏严徐晓莹
- 关键词：脂肪间充质干细胞冻存传代分化
- 体外构建工程化心肌组织的研究与应用
- 2012年
- 背景:"工程化心肌组织"是应用组织工程的方法,构建出具有天然心肌组织特征的心肌,将它移植到体内,最终修复或完全替代病损组织。但以往研究获得的工程化心肌组织存在较多的缺陷,仍不能满足实际需要。目的:总结体外构建工程化心肌组织方法的研究进展。方法:由第一作者用计算机检索中国期刊全文数据库(CNKI:2000/2010)和Medline(2000/2010)数据库,检索词分别为"心肌,组织工程,心肌构建物"和"Myocardial Constructionmaterials,Tissue Engineering,Myocardial"。从种子细胞、支架材料、体外培养环境和生物反应体系、工程化心肌组织的再血管化、移植实验5方面进行总结,对不同的种子细胞及生物支架材料和体外培养的环境、移植工程化组织的再血管化等方面进行了介绍。共检索到150篇文章,按纳入和排除标准对文献进行筛选,共纳入30篇文章。结果与结论:适合心肌细胞生存和心肌细胞形成的新型生物活性支架,理想的种子细胞、体外培养环境与生物反应体系、移植工程化组织的再血管化,动物移植实验等方面都是组织工程化心肌组织再造的关键所在。构建的组织工程化心肌组织应同时具备良好的收缩功能、稳定的电生理特性、力学强度和柔韧性、无免疫原性及自身能血管化或在移植后能迅速血管化的条件,但未来还需进一步研究。
- 孙鹃张愉张西正
- 关键词：心肌
- 脂肪间充质干细胞向心肌细胞分化中心肌发育相关基因的表达
- ＜正＞无菌条件下取大鼠附睾脂肪垫和肠系膜脂肪组织,以0.2%胰蛋白酶多次消化,离心消化液收集细胞,培养并传代之,取第三代细胞经克隆形成能力、表面特异蛋白以及多向分化潜能检测,证实该细胞在极低密度培养时可形成单细胞克隆,C...
- 郭勇张西正郭春魏严李瑞欣徐晓莹张永红
- 文献传递
- 拉伸刺激促进脂肪间充质干细胞向心肌样细胞分化
- <正>脂肪间充质干细胞(adipose tissue-derived mesenchymal stem cells,ADMSCs)是近几年来逐步得到重视的一种成体多能干细胞,可分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、肌肉细胞...
- 郭勇张西正魏严郭春李瑞欣张彦军曾强成
- 文献传递
- 山东省禽隐孢子虫病的流行病学调查被引量：1
- 2009年
- 为进一步掌握山东省禽类隐孢子虫病的流行状况,自2007年3月至2008年4月对山东省6个地市及18个县市的禽类进行了调查。共采集6190份粪样,经饱和蔗糖溶液漂浮法和改良抗酸染色法检查,隐孢子感染率为20.46%。根据形态学特征,将分离得到的隐孢子鉴定为贝氏隐孢子虫。调查结果表明,不同饲养方式、不同种类、不同地区和季节的禽类隐孢子虫感染率有明显差异。
- 许禔森
- 关键词：隐孢子虫流行病学
- 冻存和传代后的脂肪间充质干细胞向心肌样细胞分化
- ＜正＞目的脂肪间充质干细胞是一种成体多能干细胞,具有取材方便、于细胞含量大、病人易接受的优点。国内外的很多研究表明,脂肪间充质干细胞在体外培养环境下也可以分化为心肌或心肌样细胞,而且分化能力较好。因此脂肪间充质干细胞将成...
- 郭勇张西正李瑞欣郭春闫玉仙孙鹃
- 文献传递
- 拉伸刺激促进脂肪间充质干细胞向心肌样细胞分化
- ＜正＞目的力学刺激对间充质干细胞分化的影响是近年来研究的热点,国内外的大量研究表明,未分化的间充质干细胞是一种对力学刺激很敏感的细胞,力学刺激对间充质干细胞的分化有重要影响。正常心肌细胞和心肌组织是在力学环境下维持正常工...
- 郭勇张西正李瑞欣张春秋郭春
- 文献传递
- 小肠黏膜下层的制备及其在心肌组织工程中的应用被引量：5
- 2008年
- 目的制备小肠黏膜下层生物材料,并以其为支架材料体外构建工程化心肌组织。方法将猪小肠黏膜下层以0.25%胰酶和0.5%SDS各处理24h,制备出脱细胞小肠黏膜下层。用材料试验机沿平行或垂直于管腔的方向进行单轴拉伸,检测其力学性能,同时检测其细胞毒性和组织相容性,然后将3日龄新生大鼠心肌细胞接种于小肠黏膜下层支架上,体外构建工程化心肌组织薄片,倒置显微镜下观察。经Masson组织化学染色、肌节型肌动蛋白免疫组化染色和透射电镜观察对获得的心肌薄片进行评价。结果小肠黏膜下层的力学性能良好,已经完全脱去细胞,无细胞毒性,组织相容性良好;接种12h后,心肌细胞开始在小肠黏膜下层上搏动,2d后心肌细胞-支架复合物(工程化心肌组织薄片)开始自发搏动,可搏动14d。构建的工程化心肌组织薄片由多层心肌细胞构成并有大量胞外胶原。结论成功制备出力学性能和生物相容性良好的小肠黏膜下层生物支架材料,并以其为支架成功构建出工程化心肌组织薄片。
- 郭勇张西正李瑞欣孙鹃魏严郭春闫玉仙
- 关键词：小肠黏膜下层肌细胞心脏
- 体外培养心肌细胞代谢和微管蛋白对拉伸应变的响应被引量：1
- 2009年
- 探讨不同参数的拉伸应变与体外培养心肌细胞代谢和微管蛋白含量的关系。建立体外细胞基底膜拉伸装置,分析膜上应变分布。分离乳鼠心肌细胞接种在膜上,施加不同大小和频率的周期性应变,观察细胞形态,测定培养液中葡萄糖和乳酸含量,Western Blot法测定细胞内聚合态微管蛋白-βtubulin含量。自行研制的基底膜拉伸装置性能稳定。所得心肌细胞成活率较高,α-横纹肌肌动蛋白和结蛋白免疫细胞化学染色阳性。拉伸后细胞由多角形趋向于杆状,且排列方向改变。固定频率1 Hz时,8%应变组的葡萄糖比消耗速率,乳酸比生成速率和-βtubulin含量均明显高于对照组（P〈0.05）。固定应变8%时,1 Hz的周期性拉伸对细胞代谢的促进作用最为明显（P〈0.01）,频率0.5~2 Hz的拉伸应变均可使-βtubulin含量升高。适当的拉伸应变可促进体外培养心肌细胞的代谢和微管聚合。
- 魏严张西正郭勇李瑞欣吴金辉闫玉仙张永红
- 关键词：机械牵张心肌细胞代谢微管蛋白
