国家自然科学基金(30700171)
- 作品数：7 被引量：27H指数：3
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- 相关机构：华中科技大学广州军区广州总医院武汉大学更多>>
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- 尿道注射聚（乳酸-羟基乙酸）共聚物微球治疗压力性尿失禁
- 2008年
- 目的观察聚（乳酸-羟基乙酸）（PLGA）共聚物微球在大鼠尿道的组织相容性以及对实验大鼠尿失禁模型的治疗作用。方法双相乳化法制备PLGA微球，电子显微镜及计算机图像分析仪分析其表征；将40只成年雌性SD大鼠随机均分为2组（实验组和对照组），并接受尿道松解术形成压力性尿失禁模型。实验组接受微球尿道注射，对照组仅接受等量生理盐水注射。在注射前1周和注射后2、4和8周，所有大鼠接受腹部漏点压（ALPP）的检测。此外，术后第2、4和8周，每组动物每个时间点处死3只，应用苏木素-伊红（HE）染色方法检测微球在尿道组织的形态学演变，此外应用免疫组织化学方法检测巨噬细胞特异性的炎症标志物CD68在注射部位尿道组织的表达，以评价微球与尿道肌层的组织相容性。结果PLGA微球可成功地注射于大鼠尿道的肌层，并诱导局部炎症反应；CD68免疫染色证实浸润细胞以单核细胞和巨噬细胞为主。以微球和增生细胞为主的混杂组织位于黏膜下肌层内，发挥尿道填充作用。在术后2周，炎症反应最为明显，以后随着时间逐渐减退。全程未见变性、坏死等破坏性病理改变；实验组ALPP在微球注射后较注射前和对照组明显改善，并可维持到注射后8周。结论PLGA微球在尿道组织是安全的，可起到尿道填充作用增加尿道阻力，发挥治疗压力性尿失禁的作用。PLGA微球作为可注射的细胞支架可用于尿失禁的组织工程。
- 曾晓勇袁启龙李平彭鄂军庄乾元叶章群
- 关键词：微球尿失禁细胞支架
- 兔不同部位脂肪干细胞体外培养的生物学特性比较被引量：10
- 2008年
- 背景:在脂肪干细胞的研究中,针对其体外培养时生物特性与动物年龄的关系研究较多,但与脂肪部位的关系研究较少。目的:观察比较兔不同部位脂肪干细胞在体外培养时的生长特性,为下尿路组织工程的构建提供优良的种子细胞。设计、时间及地点:细胞学体外实验,于2007-11/2008-03在华中科技大学同济医学院附属同济医院泌外实验室完成。材料:脂肪来源于兔龄4个月的雄性新西兰大白兔1只,体质量为1.8kg。方法:戊巴比妥耳缘静脉麻醉,依次无菌取出附睾附近脂肪垫、腹膜后脂肪、颈背部脂肪,I型胶原酶酶解法分离出脂肪源间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,ADSCs),进行体外传代后差速贴壁培养纯化。主要观察指标:观察3个部位第5代ADSCs的形态特征和生长状态,MTT法测定不同部位细胞的倍增时间。结果:①颈背部脂肪条状分布,与血管成分位置分布鲜明;附睾附近脂肪来源较丰富,且含包膜,细胞成分污染机率较小;腹膜后脂肪周围血管较多。②传代后差速贴壁培养细胞呈铺路石样,生长分化活跃,第5代左右细胞饱满,形态为较均一的多边形。③等量脂肪情况下,附睾附近和颈背部脂肪的原代ADSCs产量较多。④颈背部和附睾附近来源ADSCs分别与腹膜后来源的ADSCs的倍增时间比较差异有显著性意义(P<0.01)。结论:用于组织工程的种子细胞选取最好为5代左右;颈背部和附睾附近脂肪组织丰富且所含ADSCs较多,生长速度快,为较佳ADSCS的来源部位。
- 袁启龙曾晓勇李平叶章群
- 关键词：干细胞脂肪组织生物学特性
- 组织工程修复与重建尿道的研究进展被引量：5
- 2008年
- 先天性畸形、外伤或肿瘤等疾病致使尿道损伤、狭窄或缺损,常需要进行尿路修复与重建,其中长段或复杂型的修复与重建一直是较为棘手的问题,往往需要替代材料,可临床上常因理想材料的缺乏或选择不当,使重建手术困难甚至失败。
- 袁启龙曾晓勇叶章群
- 关键词：尿道
- 兔不同部位脂肪来源干细胞体外成肌诱导能力的比较被引量：3
- 2010年
- 目的对兔不同部位的脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)体外成肌诱导能力进行比较,观察部位来源是否与干细胞分化能力有关,以便为尿路组织工程种子细胞的提取选择较佳取材部位。方法从1只4月龄雄性新西兰大白兔附睾附近、腹膜后、颈背部无菌取出脂肪组织,Ⅰ型胶原酶酶解法提取ADSCs,体外培养并传代后差速贴壁培养进行纯化,用鼠源性兔CD44分子的单克隆抗体做免疫细胞化学染色行初步鉴定,然后取各部位第5代ADSCs行成脂、成骨、成肌多向诱导分化,采用油红O染色行成脂诱导鉴定,von Kossa染色行成骨诱导鉴定,RT-PCR法对诱导对照组(含10%FBS的L-DMEM培养基培养)及诱导组(成肌诱导培养基培养)细胞行肌肉早期标志物α-actin基因的检测。结果 3个部位脂肪均可获取贴壁的ADSCs;差速贴壁培养细胞呈铺路石样生长;兔CD44免疫细胞化学染色呈阳性。各部位第5代ADSCs行成脂诱导14d油红O染色可见红色脂滴;成骨诱导28d后von Kossa染色可见细胞外不同程度黑色钙沉积。RT-PCR检测示,成肌诱导42d后诱导对照组α-actin条带较弱,诱导组呈强阳性条带;各部位ADSCs成肌诱导42d的α-actin增长率分别为:附睾附近38.446%±4.852%,腹膜后28.622%±4.879%,颈背部35.471%±3.434%,腹膜后增长率与其余2个部位比较差异均有统计学意义(P<0.05),其余2个部位间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论兔不同部位ADSCs在体外培养时表现出不同的成肌分化能力,附睾附近和颈背部脂肪可作为下尿路组织工程种子干细胞来源的较佳取材部位。
- 袁启龙曾晓勇陈亮彭鄂军叶章群
- 关键词：脂肪来源干细胞分化平滑肌细胞体外培养
- 静电纺丝聚乳酸/聚己内酯共混纤维支架与兔脂肪源干细胞的体外生物相容性研究被引量：10
- 2011年
- 目的利用兔脂肪源干细胞评价静电纺丝聚乳酸/聚己内酯共混纤维支架的生物相容性。方法脂肪源干细胞取自新西兰白兔皮下脂肪组织,经分离、培养后接种到待检支架上,使用倒置相差显微镜和扫描电镜观察细胞在支架上的生长形态;MTT法比较支架上培养和常规培养条件下的脂肪源干细胞生长曲线与倍增时间。结果脂肪源干细胞在纤维支架上生长良好,生长曲线与常规培养时基本一致,两组间细胞倍增时间差异无统计学意义(P>0.05)。结论脂肪源干细胞能够在静电纺丝聚乳酸/聚己内酯共混纤维支架材料上正常生长增殖,该支架材料生物相容性好。
- 陈亮彭鄂军吴柏霖曾晓勇庄乾元叶章群
- 关键词：生物相容性脂肪源干细胞静电纺丝聚乳酸聚己内酯
- 膀胱替代的组织工程策略被引量：1
- 2009年
- 组织工程学是应用细胞生物学和生物材料学的原理,研究开发用于修复或改善人体病损组织或器官的结构、功能的生物活性替代物的一门新兴学科。近年来,组织工程学的蓬勃发展为膀胱替代提供了崭新的思路。尤其进入21世纪以来,随着干细胞研究的深入和新的生物材料不断出现,使应用组织工程技术再造的新膀胱从实验室走向临床成为可能。本文就组织工程膀胱替代的基础研究和临床应用的发展和现状进行了概述。
- 曾晓勇杨为民
- 静电纺丝聚乳酸／聚己内酯共混纳米纤维的体外细胞相容性被引量：1
- 2012年
- 目的利用脂肪干细胞（ADSCs）检测不同混合比例静电纺丝聚乳酸／聚己内酯共混支架的生物相容性。方法聚乳酸（PLA）和聚己内酯（PCL）按3：1、2：1、1：1的重量比混合后经静电纺丝技术制成3种比例的纳米纤维支架（NFS）。将兔皮下脂肪分离出的ADSCs接种于NFS上，显微镜观察培养1、3、7d时ADSCs在3种支架上的形态；噻唑蓝（MTT）比色法检测接种后1-7dADSCs在NFS上的增殖和接种后6、24h的黏附细胞百分率；活死细胞染色比较接种7d时不同NFS上ADSCs的活死细胞数量。结果3：1、2：1、1：1支架纤维直径分别为（973±65）、（617±44）、（432±24）nm；1：1NFS上的ADSCs数量明显多于其他两种支架；ADSCs在1：1NFS上增殖较快，接种后第6、7天时，较3：1NFS及2：1NFS组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）；l：1NFS上黏附的ADSCs数量最多，较另外两组差异有统计学意义（P〈0．05）；ADSCs在3种支架上的活细胞百分率分别为（65．60±7．80）％、（69．16±8．30）％、（82．20±10．20）％。结论PLA：PCL为1：1的静电纺丝NFS具有较好的生物相容性。
- 白轶陈亮彭鄂军吴柏霖王玉玺曾晓勇叶章群
- 关键词：脂肪干细胞静电纺丝聚乳酸聚己内酯生物相容性
