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江苏省自然科学基金(BK2009089)

作品数：5 被引量：0H指数：0
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文献类型

  • 5篇中文期刊文章

领域

  • 5篇医药卫生

主题

  • 3篇乳腺
  • 3篇乳腺癌
  • 3篇细胞
  • 3篇腺癌
  • 2篇源性
  • 2篇人源
  • 2篇人源性
  • 2篇人源性抗体
  • 2篇免疫
  • 2篇抗体
  • 2篇基因
  • 2篇癌细胞
  • 2篇RUNX3
  • 2篇G250
  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白酶
  • 1篇预后
  • 1篇增殖
  • 1篇乳腺癌细胞
  • 1篇乳腺癌组织

机构

  • 4篇徐州医学院

作者

  • 4篇郑骏年
  • 2篇李望
  • 2篇白津
  • 2篇刘俊杰
  • 2篇程乾
  • 2篇曹梦函
  • 2篇方琳

传媒

  • 5篇徐州医学院学...

年份

  • 2篇2014
  • 2篇2013
  • 1篇2012
共 5 条 记 录，以下是 1-5
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排序方式：
RUNX3基因对乳腺癌细胞迁移和侵袭的影响
2014年
目的 研究RUNX3基因对乳腺癌细胞迁移及侵袭的影响,并探讨其分子作用机制.方法 分别用RUNX3的真核表达载体pFlag-RUNX3和对照载体pFlag-control转染乳腺癌MDA-MB-231、BT-549细胞,CCK-8细胞增殖实验检测RUNX3基因高表达后对2种乳腺癌细胞增殖的影响;细胞迁移和侵袭实验检测RUNX3基因高表达对2种乳腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响;人类肿瘤转移PCR芯片研究RUNX3基因高表达后乳腺癌细胞中转移相关基因的表达水平; RT-PCR和Western blot方法检测RUNX3基因表达后对2种乳腺癌细胞中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）mRNA和蛋白表达的影响;明胶酶谱实验检测RUNX3基因表达后对2种乳腺癌细胞分泌活性MMP-2的影响.结果 在2种乳腺癌细胞中过表达RUNX3能够抑制细胞的迁移和侵袭能力.在84个肿瘤转移相关基因中MMP-2受RUNX3的影响最显著.结论 RUNX3通过MMP-2通路调节乳腺癌细胞的迁移与侵袭.
白津曹梦函郑骏年
关键词：RUNX3乳腺癌迁移基质金属蛋白酶-2
Cullin1基因表达抑制对乳腺癌细胞增殖的影响
2012年
目的应用小于扰RNA（siRNA）干涉乳腺癌MDA—MB-231和BT-549细胞Cullin1（Cul1）基因的表达，探讨CullsiRNA（si—Cull）对人乳腺癌细胞株增殖的影响及其分子作用机制。方法体外化学合成CullsiRNA和ControlsiRNA（si—Ctd）序列，转染乳腺癌MDA—MB-231和BT-549细胞，CCK8细胞增殖实验分析Cull干涉后对2种乳腺癌细胞增殖的影响，流式细胞仪分析2种乳腺癌细胞周期的变化，Westernblot检测Cull蛋白、cyclin家族蛋白、CDK抑制剂蛋白表达水平。结果转染Cull的siRNA可以有效减少乳腺癌MDA—MB-231和BT-549细胞株Cull的表达，Cull干涉后通过增强p21、p27的表达，降低cyclinA、cyclinD1和cyclinE的表达，使细胞周期停滞在G，期，从而抑制细胞的增殖。结论CullsiRNA可以有效地减少乳腺癌MDA—MB-231和BT-549细胞Cull的表达，Cull干涉后可能通过影响cyclins、CDK抑制剂蛋白表达从而使细胞周期停滞在G1期，最终能明显抑制乳腺癌细胞的增殖。
白津李望雍红梅郑骏年
关键词：小干扰RNA乳腺癌增殖细胞周期
表达抗G250人源性抗体增殖缺陷型腺病毒的构建
2013年
目的构建表达抗G250人源性抗体的增殖缺陷型腺病毒。方法通过重叠延伸PCR、常规PCR方法，分别获得G250重链的可变区和恒定区（GH）eDNA序列及G250轻链（GL）eDNA序列，并克隆至pCLON12-IRES载体上，构建质粒pCLON12-GL-IRES—GH。酶切质粒pCLON12-GL—IRES—GH回收GL—IRES—GH片段，克隆至腺病毒载体pDC315，构建pDC315-GL—IRES—GH（pDC315-G250）。将pDC315-G250与腺病毒包装骨架质粒pBHGE3共转染HEK293细胞，重组包装表达G250抗体的增殖缺陷型腺病毒AdDC315一G250。纯化病毒表达的G250抗体，免疫印迹实验检测该抗体能否与细胞表面抗原特异性结合。结果PCR及测序结果表明成功构建质粒pCLON12-GL—IRES—GH及腺病毒穿梭质粒pDC315-G250。PCR鉴定表明重组腺病毒AdDC315-G250含有目的基因，病毒包装成功。免疫印迹实验结果显示，纯化的抗体在G250抗原阳性的细胞中能检测到目的条带。结论成功构建表达抗G250人源性抗体的增殖缺陷型腺病毒。
方琳程乾李望刘俊杰郑骏年
关键词：肾肿瘤G250抗体重组腺病毒
表达抗G250人源性抗体腺病毒对肾癌细胞的影响
2013年
目的检测腺病毒Ad-G250表达的G250全长人源性抗体的生物学活性及其对肾癌细胞的影响。方法扩增纯化腺病毒Ad—G250、Ad—EGFP（对照病毒）。病毒感染LO-2细胞，ELISA法检测细胞培养液中抗体的表达量。收集病毒感染后的细胞上清液进行纯化，Westernblotting检测纯化抗体的相对分子质量及其与细胞表面G250抗原的结合能力。免疫组化法检测Ad—G250表达的抗体是否具有生物学活性。CCK-8法检测Ad—G250对肾癌Ketr-3及ACHN细胞增殖的影响。AnnexinV—PE／7-AAD法检测Ad—G250对‘肾癌Ketr-3及ACHN细胞凋亡的影响。结果病毒Ad—G250感染LO-2细胞后G250抗体的表达量随着感染天数的增加而增加。Westernblotting实验显示Ad—G250能够表达G250抗体的轻链和重链，电泳图上该抗体能使G250抗原阳性的Ketr-3和786-O细胞在相对分子质量58×10’附近出现反应条带，而G250抗原阴性的ACHN和HK-2细胞在相应位置无反应条带。细胞免疫组化实验显示Ketr-3细胞膜被染成棕黄色，而ACHN细胞未见着色。CCK-8实验结果显示，Ad—G250对Ketr-3细胞有抑制作用，而对ACHN细胞的抑制作用不明显；Ad—G250抑制Ketr-3细胞增殖存在浓度及时问依赖性。凋亡实验显示，Ad—G250诱导Ketr-3细胞凋亡作用和ACHN细胞相比差异具有统计学意义，Ad—G250诱导Kert-3凋亡作用和Ad—EGFP相比差异有统计学意义。结论腺病毒Ad—G250成功表达出具有生物学活性的人源性G250抗体，且Ad—G250可抑制表达G250抗原的肾癌细胞增殖，诱导其凋亡。
方琳程乾李望刘俊杰郑骏年
关键词：G250放射免疫显像
RUNX3在人类乳腺癌组织中的表达及其临床意义
2014年
目的 研究人类相关转录因子3（human runt-related transcription factor 3,RUNX3）在乳腺癌组织中的表达水平及其临床病理意义.方法 应用组织芯片和免疫组化的方法评估RUNX3在256例乳腺癌组织中的表达水平,并通过统计学分析其与临床病理特征及患者预后的关系.结果 在256例乳腺癌组织中RUNX3阳性表达率和阴性率分别为32％ （83/256）和68％ （173/256）,RUNX3的表达水平与乳腺癌的病理分级呈高度相关（P=0.000）,RUNX3低表达提示5年总生存率低以及无瘤生存率低（P=0.000;P =0.001）.结论 RUNX3低表达与乳腺癌的进展以及预后差呈高度相关.
白津曹梦函郑骏年
关键词：RUNX3乳腺癌组织芯片免疫组化预后
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