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国家高技术研究发展计划(2006AA02Z473)
作品数:
3
被引量:21
H指数:2
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钦伦秀
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肝癌转移相关的微小RNAs在不同转移潜能肝癌细胞系的定量研究
被引量:14
2009年
目的研究与转移密切相关的微小RNAs(miRNAs)在不同转移潜能肝癌细胞系的表达水平,探讨其在肿瘤转移过程中的生物学功能。方法提取细胞系MHCC97H、MHCC97L、HepG2、L02的总RNA,通过反转录获得特异miRNA(miR122a、miR124a、miR-148a、miR-148b、miR-15a、miR-219、miR-30c、miR338、miR34a、Let7g、miR-9)的cDNA,并应用TaqMan MGB探针法对其进行定量检测。采用AB17500系统软件V1.3.1采集Ct值,并使用miRNA内参基因RNU6B校正,相对定量计算公式RQ=2^-△Ct,△Ct=CtmiRNAs-CtRNU6B。数据均经SPSS13.0统计软件包处理,采用t检验或非参数检验。结果转移相关的miRNAs(miR-124a除外)在MHCC97H与MHCC97L中表达,差异均有统计学意义。HepG2中miR-30c、miR338、miR-34a和Let—g的表达水平明显高于L02,分别为miR30c(8.41±0.40比6.82±0.29),miR-338(3.14±0.29比2.36±0.32),miR-34a(0.71±0.40比-2.95±0.26),Let-7g(4.07±0.55比-6.98±0.56),f值依次为2.948,12.656,7.484,3.684,P值均〈0.05,差异有统计学意义。而miR-148b、miR-9的表达则显著低于正常肝细胞,分别为miR-148b(1.96±0.51比3.76±0.28),miR9(-4.38±0.86比-1.10±0.53),f值依次为3.073,3.324,P值均〈0.05,差异有统计学意义。miR148家族中miR48b在所测细胞系中的表达(5.46±1.21)均显著强于miR-148a的表达(1.29±0.35),Z=-5.097,P=3×10^-7,差异有统计学意义。结论可以利用肝癌细胞系列细胞平台进-步研究肝癌转移相关miRNAs在肿瘤转移过程中的生物学功能。
赵越
贾户亮
周海军
董琼珠
付丽云
闫兆伟
孙健
任宁
叶青海
钦伦秀
关键词:
肝细胞
RNA
细胞系
肿瘤转移抑制基因HTPAP的Haploview单体型构建分析
被引量:1
2008年
目的通过单核苷酸多态性(SNP)检测对肿瘤转移抑制基因HTPAP进行单体型构建和分析。方法取100例肝细胞癌(HCC)新鲜标本,应用激光捕获组织显微切割获取纯肝癌细胞、提取DNA,对HTPAP基因上已登录的15个SNP位点进行检测,应用Haploview软件构建单体型。结果15个SNP位点中,有8个表现为单态、5个呈多态性、2个未能检测出。对100例肝细胞癌的该5个多态位点进行单体型构建后发现11种单体型,其中3种单体型(C-A-T-C-A、C-G-T-C-A和T-A-G-G-G)最常见,占87%,另外8种单体型占13%。4个SNP(rs7007097、rs3830326、rs1149、rs3739252)表现为强连锁不平衡关系,尽管rs11539529出现重组现象,但从整体看还是属于同一个单体型块。结论肿瘤转移抑制基因HTPAP在肝癌中常见C-A-T-C-A、C-G-T-C-A和T-A-G-G-G三种单体型,针对不同单体型研究分析可能为肝癌转移复发、预后预测提供新的途径和指标。
武金才
任宁
李国才
孙冰生
刘道永
史炯
戴春
董琼珠
孙海晶
叶青海
钦伦秀
关键词:
肝细胞
单核苷酸多态性
基因
骨髓间充质干细胞对人肝癌细胞系MHCC97-H增殖能力的影响
被引量:6
2008年
目的观察骨髓间充质干细胞(MSC)对肝癌细胞增殖能力的影响。方法人肝癌细胞系MHCC97-H培养液中分别加入0.25%和50%MSC的条件培养基(MSC-CM),采用CyQUANT细胞增殖实验检测吸光度A值变化。在MHCC97-H细胞培养液中添加50%MSC-CM,荧光实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测肿瘤增殖细胞核抗原(PCNA)、Ki-67抗原的变化。16只裸鼠皮下接种MHCC97-H细胞后,实验组经静脉注射MSC,1×10。个/次,每周3次,对照组静脉注射PBS;比较肿瘤体积。结果培养液中加入MSC-CM后A值依次为211.65±54.72、236.24±57.15和283.59±62.16(P〈0.05)。PCNA和Ki-67的表达水平分别升高1.8和7.0倍。实验组肿瘤体积(1745±455)mm^3大于对照组(972±568)mm^3(P〈0.05),肿瘤体积平均增加速度(56.0±26.1)mm^3/d高于对照组(32.4±14.5)mm3/d(P〈0.05)。结论骨髓间充质干细胞可促进肝癌细胞系MHCC97-H的增殖。
李国才
武金才
孙冰生
刘道永
钦伦秀
关键词:
肝细胞
间充质干细胞
增殖
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